EF-hand对钙调磷酸酶B同源蛋白2的生物学功能影响

目的探讨EF-hand结构对钙调磷酸酶B同源蛋白2（CHP2）的生物学功能的影响。方法通过PCR扩增CHP2 cDNA片段,构建带GFP标签的野生型及EF-hand突变型CHP2表达质粒;与钠氢离子交换蛋白1（NHE1）共转染PS120细胞;采用激光共聚焦显微镜、膜滤过法、免疫共沉淀等手段,明确CHP2结合Ca2＋的数量、部位,以及对CHP2与NHE1结合的影响;在血清饥饿条件下,观察表达EF-hand突变的CHP2（NHE1/CHP2-EF3m/4m）对细胞生存的影响。结果分别突变EF-hand结构EF3或EF4,CHP2结合Ca2＋减少;同时突变EF3和EF4,CHP2不能结合Ca2＋;免疫共沉淀实验结果显示乙二胺四乙酸（EDTA）剥夺CHP2携带的Ca2＋之后,CHP2与NHE1结合的数量明显减少;不携带Ca2＋的CHP2在细胞内与NHE1结合的数量也明显减少;在血清饥饿条件下,表达不携带Ca2＋的CHP2的细胞存活数量减少。结论 CHP2能结合2个Ca2＋,结合部位在EF3和EF4;携带Ca2＋能增强CHP2与NHE1的结合能力;在血清饥饿条件下,携带Ca2＋的CHP2能提升细胞抵抗死亡的能力。     

KAI1、MMP-9蛋白表达及微血管密度与胃癌浸润和转移的相关性

目的:探讨KAI1、MMP-9蛋白表达以及微血管密度(MVD)值与胃癌浸润转移的相关性。方法:在71例胃癌组织及20例正常胃黏膜组织中,应用免疫组织化学SP法检测KAI1、MMP-9的蛋白表达,用CD34标记新生血管内皮细胞并于显微镜下计数MVD,进而分析它们与胃癌临床病理特征间及彼此之间的关系。结果:胃癌中KAI1的表达明显降低,MMP-9的表达明显升高,MVD值在胃癌中也较正常胃黏膜中明显增高,两组间差异有显著意义(P<0.05);KAI1与MMP-9的表达均与浸润深度、淋巴结转移密切相关(P<0.05),此外,KAI1的表达还与TNM分期有关(P<0.05);MVD值与分化程度、淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.05)。经统计分析KAI1表达阴性组MVD值显著高于阳性组,而MMP-9表达阳性组MVD值显著高于阴性组(P<0.05)。结论:KAI1、MMP-9及MVD值与胃癌的侵袭转移密切相关,可作为评价胃癌的进展与预后的有力指标;KAI1、MMP-9可能通过影响血管生成参与胃癌的进展过程,为临床针对胃癌的抗血管治疗提供新的思路。     

超声斑点追踪技术（二维应变）评价左束支传导阻滞患者左室心内膜下心肌收缩功能的研究

目的应用超声斑点追踪二维应变探讨左束支传导阻滞患者左室心内膜下心肌收缩功能的改变。方法完全性左束支传导阻滞患者（CLBBB）20例、正常对照者20例,采用心尖长轴四腔心和二腔观的二维灰阶动态图像,应用二维应变软件测量左室壁各节段的心内膜下心肌收缩应变、应变率及整体长轴应变（GLS）,心尖双平面Simpson法测量左室射血分数（LVEF,FS%）。结果与正常组比较,CLBBB组的左房内径、E/A、左室长轴心内膜下心肌的纵向收缩期峰值应变、应变率减低（P〈0.05）。结论超声斑点追踪二维应变能准确地评价左束支患者的左室心内膜下心肌收缩功能。