原生质体融合:遗传操作和工业微生物育种的工具

原生质体融合(Protoplast fusion)技术已成功地应用于细菌和真菌系统,从而有可能获得重组体子代。在真菌中,已证实种间的非亲本型分离子的获得。评价融合技术的价值时,在目前必须注意它在绘制细菌遗传图中的应用。原生质体的特性,尤其对于再生回复,能     

质粒间重组后弗氏链霉菌的新霉素磷酸转移酶基因在大肠杆菌内的表达

体外重组和分子克隆的技术促进了一种微生物的基因在另一个种系发生的远缘种内表达的研究。例如,已证实不同的革兰氏阳性细菌(金黄色葡萄球菌、枯草杆菌和环状芽孢杆菌)的基因在大肠杆菌内表达。已构建能在链霉菌和大肠杆菌中复制的双功能复制子;链霉菌DNA     

药用肽和蛋白质

治疗学的一较合理的途径是利用天然内源性化合物治疗疾病。但许多重要的内源性蛋白质和肽及其它内源性化合物由于普遍存在药理上独特的副作用,以及药物动力学不理想,致使临床应用受到限制。最近,采用改良的内源性化合物的同系物和/或采用新的药物给药系统已日益引起人们的注意。这些技术也为探索化合物的作用机制提供新的方法。如近年,采用重组DNA 技术和化学技术改变天然产生的分子以及通过内源性化合物或其同系物与合成的肽或天然产生的蛋白质的接合已取得一些成就。     

链霉菌质粒启动基因在大肠杆菌中的表达

启动基因-探针质粒的实验表明,大肠杆菌DNA含有许多在变青链霉菌(S.lividans)中作为启动基因的序列.提高大肠杆菌转录的大肠杆菌amp C启动基因的突变在变青链霉菌中有类似的序列,提示变青链霉菌的RNA聚合酶能识别与大肠杆菌RNA聚合酶的细菌启动基因的相同特征.链霉菌中相当少的序列在大肠杆菌中可作为启动基因,而大多数链霉菌启动基因在大肠杆菌中无作用.Jaurin等证明来源于变青链霉菌的"SEP"序列("链霉菌-大肠杆菌型"启动基因)是在大肠杆菌     

供产生抗生素链霉菌种间基因转移用的DNA无性繁殖系

新抗生素的产生或抗生素结构和效能的改变主要通过化学的途径,如半合成抗生素或生物学的途径,如突变生物合成。近年来生物遗传工程学无论在理论研究或应用方面都有很大的发展,利用 DNA 体外重组和基因克隆化以及原生质体融合的技术已越来越受刭重视,这些新技术的应用无疑将为创制新抗生素开辟广阔的前景。本期介绍两篇译文供读者了解这方面的研究概况。     

用于抗生素产生的链霉菌基因克隆

链霉菌产生数千种已知的抗生素,包括许多具有重大医药价值的抗生素,如四环素。有些链霉菌可携带100多种表达的基因用于抗生素生产——超过基因组的1%。对参与抗生素产生的基因结构和调节的更好了解,将有助于开发提高抗生素产量更为合理的方法。此外,来自不同种的基因克隆和基因重组将可产生有价值的新抗生素。     

链霉菌原生质体融合:原生质体经紫外线照射后的融合

几种链霉菌的原生质体在聚乙二醇存在下可以融合,并产生高比例的染色体基因的重组子。这一发现对这些重要的抗生素产生菌的经典和应用遗传学有很大的影响。在许多链霉菌中,在融合后在再生培养基上产生的孢子总数中,重组子的比例或含有重组子的单个再生菌落的比例是很高的——在最适条件下至少达20％——这对分析融合杂交或分离特定需要的重组基因型十分适用且不需要每个亲株有任何     

庆丰链霉菌质粒DNA的转化

以PEG沉淀法从庆丰链霉菌M-15菌株中分离到具有闭环和开环两种构型的质粒DNA,其分子量约为10×10~6道尔顿。以此质粒DNA作为供体,以质粒消除突变株A544制备原生质体作为受体,在40％聚乙二醇(PEG1000)的诱导下进行DNA转化。从实验结果获得的遗传性状来看,受体菌的表型由Pro~-→Pro~+、Sm~s→Sm~r、Qm~s→Qm~r,证明为转化子,并证明庆丰霉素合成是受质粒DNA控制的。     

重组DNA:胰岛素的新来源

重组DNA技术将很快导致大规模合成医用胰岛素。数十年来对DNA特性进行基础研究而发展起来的这项技术,现已为合成有用的蛋白质(如胰岛素)提供了方法并为研究基因活性提供了重要的工具。本文以人胰岛素的生产为例说明此项技术实用意义。这领域内的其它发展,例如重新将基因插入到人体细胞中的技