C57小鼠发育过程中海马NGF基因转录水平的研究

采用半定量RT－PCR法测定了1，6，12月龄C57小鼠海马βNGF mRNA水平，将β－肌动蛋白基因作为内标。结果表明，6，12月龄两组间无显著性差异，但均显著低于1月龄组，说明C57小鼠发育过程中其海马β NGF基因转录水平明显降低。另外，发现C57小鼠海马β NGF基因第294位碱基为C，与普通小鼠的T不同，但这种碱基差异并不影响氨基酸组成。     

乙肝病毒核心抗原基因在大肠杆菌中的高表达

乙肝核心抗原在大肠杆菌表达由Michael Nassal完成,国内马贤凯等人成功地使乙肝核心抗原在Lac启动子控制下高表达。本文使乙肝核心抗原基因在P_LP_R启动子控制下,用温敏法诱导产生HBcAg,该菌株能稳定地高表达。可以代替肝提取的HBcAg,菌     

卫氏并殖吸虫(安徽休宁)的基因组文库构建、重组DNA探针制备及其应用

并殖吸虫病是世界性分布的人兽共患病,亦是危害我国人民健康的重要寄生虫病之一。迄今,对并殖吸虫的分类尚有分歧意见,影响到并殖吸虫的虫种分布的确定,与宿主之间的关系,以及流行病学和防治工作等方面的研究。本实验用分子生物学技术,以安徽休宁卫氏并殖吸虫为主要研究对象,进行基因分析,为并殖吸虫分子分类学研究提供依据。     

乙肝病毒e抗原基因在大肠杆茵中高表达

取pZD 8703质粒DNA(本室构建的高表达乙肝核心抗原基因质粒)用Ava Ⅰ酶切开,Bal 31酶消化,加四种核甘酸dNTP、DNA聚合酶大片段酶补平后,用T_4 DNA连接酶连接,再用EcoRI酶消化,回收EcoRI小片段连接到pJLA 503的EcoRI位点,转化受体菌JM103,获得在P_RP_L启动子控制下,由温度调节CIts 857开启和关闭的高表达乙肝e抗原(HBeAg)的重组体。用抗HBe-β)单克隆酶标抗体配套的ELISA双抗体夹心法测定经超声波处理的细菌原液,HBeAg的终效价在1:10240以上,只含少量HBeAg。可以代替血清HBeAg用作配套检测试剂。     

卫氏并殖吸虫基因文库的构建——Ⅰ重组克隆的方法

以SDS-酚-乙醇沉淀法提取卫氏并殖吸虫成虫基因组DNA,分别用Sau 3A和Eco RI核酸限制性内切酶酶切,电泳回收0.4—4Kb大小的DNA片段,与相应的大肠杆菌质粒载体pBR~(322)或pUR~(222)重组连接,转染大肠杆菌7118。结果显示,pUR~(222)质粒经碱性磷酸脂酶处理后与DNA片段以1/4(W/W)比例重组连接,获得的重组克隆最多,并且可以利用菌落的色泽不同,从麦康凯培养基平板上直接挑选出重组克隆。是利用质粒载体构建基因文库重组克隆的较好方法。     

卫氏并殖吸虫基因组DNA文库构建Ⅱ．基因组DNA文库的构建及鉴定

以ＥｃｏＲＩ酶切安徽地区卫氏并殖吸虫基因组ＤＮＡ，电泳分离回收０．４～４ｋｂ的ＤＮＡ片段。与ＥｃｏＲＩ酶切并经牛肠碱性磷酸脂酶处理的大肠杆菌质粒ｐＵＲ２２２载体，在Ｔ４ＤＮＡ连接酶作用下重组连接，构建卫氏并殖吸虫基因组ＤＮＡ文库，获得１．０８×１０６个重组克隆。经重组克隆质粒的快速鉴定和卫氏并殖吸虫基因组ＤＮＡ探针菌落原位杂交证实，重组克隆中含有与卫氏并殖吸虫基因组ＤＮＡ同源的ＤＮＡ插入片段，并初筛到１９个阳性重组克隆。表明卫氏并殖吸虫基因组ＤＮＡ文库构建成功。     

遗传工程药物进展

 基因工程问世以来，大大促进了分子生物学的发展，引起各国的竟相研究。例如干扰素的基因工程，有70多个国家在研究，并力争早日打入国际市场。美国是研究和开发的先行国，目前基因工程的大部分产品在美国都获得了成功。欧美在生物学、生化方面历史悠久、力量雄厚，而日本走在前面的有传统的发酵技术和酶工程方面的成就。我国基因工程发展很快，已取得明显成果，有几项已达到国际先进水平。     

乙肝病毒e抗原基因在大肠杆茵中高表达

取pZD 8703质粒DNA(本室构建的高表达乙肝核心抗原基因质粒)用Ava Ⅰ酶切开,Bal 31酶消化,加四种核甘酸dNTP、DNA聚合酶大片段酶补平后,用T_4 DNA连接酶连接,再用EcoRI酶消化,回收EcoRI小片段连接到pJLA 503的EcoRI位点,转化受体菌JM103,获得在P_RP_L启动子控制下,由温度调节CIts 857开启和关闭的高表达乙肝e抗原(HBeAg)的重组体。用抗HBe-β)单克隆酶标抗体配套的ELISA双抗体夹心法测定经超声波处理的细菌原液,HBeAg的终效价在1:10240以上,只含少量HBeAg。可以代替血清HBeAg用作配套检测试剂。     

毒素源性大肠杆菌致病因子的分子遗传学进展

大肠杆菌是人们最熟悉的肠道菌，一般认为不致病，但在十九世纪开始有毒素源性大肠杆菌引起家畜腹泻的报道，尔后发现引起婴儿、成人和旅行者腹泻。