"七年制早期科研训练"的实践及建立"学习型组织"的初步设想

实施“七年制早期科研训练”是我校培养创新型高级医学人才的重要举措,几年来细胞生物学教研室积极实践,总结出了自己的一些经验和体会。同时针对目前“七年制早期科研训练”中存在的问题,提出了建立“学习型组织”的初步设想与计划,旨在进一步提高学生的学习和创新能力,提高教育教学的整体水平,努力培养出基础知识扎实、求知欲望强烈、富有创新意识和创新思维的高素质人才。     

一种从石蜡包埋组织中快速提取DNA的方法

目的建立从甲醛固定石蜡包埋组织中高效、快速提取基因组DNA的方法。方法将一片10μm厚石蜡包埋大肠癌组织切片直接浸入150μl消化液中,56℃孵育0.5h、1h和2h,灭活蛋白酶K后离心取上清即为DNA提取物。琼脂糖凝胶电泳检测所提取DNA的片段分布,紫外分光光度法测定DNA的产量及纯度。以提取的DNA为模板,PCR扩增不同长度产物片段并进行产物的直接测序以评价提取方法。结果该提取方法能够获得较长片段的基因组DNA,从一片10μm厚石蜡切片中即可获得大约60μg的DNA,在0.5h消化条件下获取的模板DNA,即可实现对152bp、293bp、392bp和541bp等4种不同片段的100%扩增,1h消化组的PCR产物可直接用于DNA测序。结论建立了一种简单、快速地从甲醛固定石蜡包埋组织中提取DNA的方法,只需一步消化即可获得满足普通PCR及测序需要的基因组DNA。     

灵芝多糖抗H2O2诱导的HDF细胞衰老及其机制的研究

目的 探讨不同剂量灵芝多糖(GLP)对抗H2O2诱导的HDF细胞衰老及可能的细胞周期调控机制.方法 将HDF细胞培养至24代时分成6组:即青年组、对照组、衰老模型组及GLP小剂量(50 mg/L)、中剂量(100 mg/L)、大剂量(150 mg/L)组,体外DMEM培养,各GLP组和衰老模型组自30代始添加 H2O2诱导HDF细胞衰老,直至38代.采用MTT法检测细胞活力;Dimri法检测β-半乳糖苷酶活性;RT-PCR法检测p16INK4a、CyclinD1、CDK4的表达;Western印迹法检测Rb蛋白表达和磷酸化Rb.结果 与青年组及对照组比较,衰老模型组细胞活力下降(P＜0.01),β-半乳糖苷酶活性升高(P＜0.01),CyclinD1 mRNA表达升高(P＜0.01),CDK4 mRNA表达下降(P＜0.01),p16INK4a表达升高(P＜0.01),Rb磷酸化减少(P＜0.01);与衰老模型组细胞比较,中剂量和大剂量GLP细胞活力明显提高(均P＜0.01),而β-半乳糖苷酶活性降低(均P＜0.01),CyclinD1 mRNA表达降低(均P＜0.01),CDK4 mRNA表达升高(均P＜0.01),p16INK4a表达降低,Rb磷酸化增多(均P＜0.01),但两组之间差异无统计学意义(均P＞0.05).结论 GLP可通过改变细胞周期调控因子CyclinD1/CDK4/p16INK4a进而调节Rb的磷酸化状态,发挥抗H2O2诱导的HDF细胞衰老作用.     

铜、赖氨酰氧化酶与胎膜早破

胎膜早破为一个常见的产科并发症 ,其病因和发病机制尚不清楚 ,但胎膜本身结构的改变可能是最主要的因素。铜是人体必需的微量元素之一 ,是胎膜中胶原纤维发育成熟的关键酶赖氨酰氧化酶的活性辅基。当体内铜缺乏时 ,赖氨酰氧化酶活性下降 ,胶原发育成熟障碍 ,羊膜变薄 ,使胎膜弹性及韧性下降而易于发生破裂     

铜、赖氨酰氧化酶与胎膜早破

胎膜早破为一个常见的产科并发症，其病因和发病机制尚不清楚，但胎膜本身结构的改变可能是最主要的因素，铜是人体必需的微量元素之一，是胎膜中胶原纤维发育成熟的关键酶赖氨酰氧化酶的活性辅基。当体内铜缺乏时，赖氨酰氧化酶活性下降，胶原发育成熟障碍，羊膜变薄，使胎膜弹性及韧性下降而易于发生破裂。     

抗生素在产褥感染的应用

产褥感染是指分娩时及产褥期生殖道受病原体感染 ,引起局部和全身的炎性变化 ,发病率约为 1 0 %～ 7 2 % [1] ,每年由产褥感染导致的产妇死亡占产妇死亡总数的8% [2 ] 。近 2 0年来 ,随着新抗生素不断问世 ,产褥感染引起的产妇死亡也明显减少 ,但由于细菌耐药菌株的出现 ,在治疗中又增加了新的困难。迄今 ,产褥感染仍是导致产妇死亡的主要原因之一[3 ] 。1　产褥感染时常见病原菌的特性及其对抗生素的特殊敏感性需氧性链球菌 :根据溶血能力分成甲型、乙型、丙型 ,其中甲型、丙型链球菌致病力弱 ,而B族乙型溶血性链球菌致病性最强 ,可以产生…     

广义似然比检验应用于基因芯片表达数据的分析

基因芯片技术的出现使同时监测成千上万个基因的表达成为可能,人们可以全面的在基因组水平上揭示不同基因之间的相互关系,使研究效率明显提高,为基因诊断和基因治疗提供了可能性.但基因芯片技术的成本昂贵、复杂、检测灵敏度较低、重复性差等特点制约了其发展,特别是其得到的海量数据的分析成为基因芯片研究的瓶颈[1].利用基因芯片获得的基因表达数据具有数据量大、维数高、样本量小、非线性的四大特点.所以如何采用有效的数学统计方法找出隐藏在基因表达数据下的生物信息成为当前的研究重点.     

混合法用于基因芯片数据的分类分析

目的 研究广义似然比检验(GLRT)与支持向量机(SVM)相结合的混合法在基因芯片表达数据分类研究中的应用效果.方法 结合 Golub研究的白血病基因表达数据,利用GLRT寻找白血病表达水平存在显著性差异的基因,再使用SVM对白血病进行分类.结果 基于GLRT鉴别得到的特征基因有很强的代表性,SVM分类的效果明显优于其他方法.结论 混合法在解决数据量大、维数高、样本量小、非线性问题中具有很强的优势,可以有效的用于基因芯片表达数据的分类研究.     

Chip-based TGCE定量检测大肠癌K-ras基因点突变

目的建立一种定量检测大肠癌中K-ras基因突变比例的方法,并分析其与临床病理参数之间的关系。方法利用微流控温度梯度毛细管电泳(Chip-based temperature gradient electrophoresis,Chip-basedTGCE)对4例代表性大肠癌组织切片中的K-ras基因突变进行检测,通过AutoCAD软件计算出K-ras基因突变比例,结果经克隆测序校正后获得线性回归方程。应用该方法定量检测84例石蜡包埋大肠癌组织中的K-ras基因突变比例,并探讨其与临床病理参数的关系。结果 Chip-based TGCE检测K-ras基因突变比例与克隆测序检测K-ras突变比例的线性回归方程为y=0.993x-1.387,K-ras基因突变比例与肿瘤部位和浸润深度有显著相关性(P0.05),检测获得的最低K-ras突变比例达到2.51%。结论该研究显示Chip-based TGCE是一种快速、灵敏、便捷、经济的基因突变比例定量分析方法。     

孕妇饮食做到"四无"

妇女怀孕后,每天所吃的食物,除了维持自身机体代谢和消耗所需外,还要保证胎儿的生长发育,也就是说,一个人要吃两个人的饭。因此,孕妇营养的好坏,不但影响自身健康,也直接影响胎儿的生长发育。但由于缺乏科学引导,很多孕妇及其家庭成员都陷入了一些误区,为母婴带来了本可避免的危害。那么,孕妇饮食到底该注意些什么呢? 无不足 无过剩 孕妇如果营养不良,会导致胎儿发育迟缓或流产;而营养过剩,又可能导致胎儿巨大及各种并发症,造成难产。所以,孕妇饮食应根据其特殊的营养特点进行合理搭配,在质和量上满足孕产需要,保证既无不足,也不要过剩。同时注意饮食多样化,做到粗细搭配,荤素搭配,不偏食,不挑食。具体的食物选择,应遵循以下一些原则: 糖类不能少 糖类是能量供给的最