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目的 建立聚合酶链式反应法(polymerase chain reaction,PCR)对中药水蛭进行快速种间鉴别。方法 根据中国药典项下3种水蛭(宽体金线蛭、日本医蛭及尖细金线蛭)CO1序列的差异设计并合成3对种属特异性引物,对其进行PCR反应条件优化;对不同批次的水蛭进行稳定性试验,并对同批次的水蛭进行灵敏度试验;利用优化的PCR条件对水蛭混合样品进行分析。结果 3对引物分别能在60,61,59℃的退火温度下扩增出1 000~2 000,1 000~2 000,3 000 bp左右的明亮条带,检测限分别为0.1,1,10 ng,并能够准确鉴别以不同比例混合的水蛭样品。结论 所设计的3对引物可以快速鉴别中药水蛭、常见伪品及混掺水蛭,并具有较高的种间特异性及良好的种内稳定性和灵敏度,可作为中药水蛭传统基原鉴别方法的补充,为其质量控制提供更多参考。 相似文献
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基于AHP-CRITIC法正交优选乌甘袋泡茶提取工艺及抗炎作用研究 总被引:4,自引:0,他引:4
目的确定指标权重系数,建立乌甘袋泡茶饮片最佳提取工艺并进行抗炎机制研究。方法比较层次分析法(AHP)、基于指标相关性的权重确定方法(CRITIC)、AHP-CRITIC混合加权法确定权重系数,对正交试验结果进行综合得分比较,优选乌甘袋泡茶饮片提取工艺。通过HE染色观察大鼠咽部黏膜病理变化,测定血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6β和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量变化探讨抗炎作用。结果 AHP-CRITIC混合加权法科学优选出最佳煎煮工艺参数为饮片浸泡30 min,第1次加7倍量水煎煮45 min;第2、3次加6倍量水煎煮30 min,浓缩至饮片质量5倍量。乌甘袋泡茶高、中剂量组可以改善咽部黏膜组织病变,可以降低L-1β、IL-6β、TNF-α含量。结论通过AHP-CRITIC混合加权法正交试验优选的乌甘袋泡茶饮片提取工艺稳定。此工艺条件下的饮片提取液继续浓缩制备的乌甘袋泡茶对大鼠慢性咽炎有一定的治疗作用,通过降低炎症因子发挥药效。 相似文献
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