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目的 从形态学角度了解白细胞介素1局部应用对外周神经损伤后神经再生的作用。并通过对脊髓前角神经元的研究,初步探讨其有关机制。方法 用昆明小鼠单侧坐骨神经切割伤后一期端端缝合为损伤模型。按是否给予白细胞介素1分为实验组和对照组,分别在术后28d和42d切取坐骨神经和相应脊髓节段,测定神经纤维面数密度比,神经纤维断面面积,髓鞘厚度及脊髓前角神经元计数,脊髓前角神经元等效圆直径,等效圆面积,作定量比较。结果 术后28d,神经纤维面数密度比,神经纤维断面面积实验组均优于对照组,髓鞘厚度无显著性;术后42d,除近端神经纤维断面面积两组差异无显著性外,余各指标实验组均优于对照组。损伤侧脊髓前角神经元计数。等效圆直径,等效圆面积在28d和42d,实验组均优于对照组。结论 外周神经损伤局部应用白细胞介素1能促进神经再生,保护脊髓前角神经元。 相似文献
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hNET基因重组腺病毒载体构建和体外表达 总被引:2,自引:0,他引:2
目的以复制缺陷的腺病毒为载体,用细菌内同源重组法构建含有人的去甲肾上腺素转运子(human neurotransmitter transporter,hNET)基因的腺病毒载体。方法利用限制性内切酶KpnⅠ XbaⅠ从pCMV5质粒中切下目的基因hNET,亚克隆至经同样酶切的腺病毒穿梭质粒pAdtrack-CMV,形成重组穿梭质粒pAdtrack-CMV-hNET,PmeⅠ酶切线性化后,与pAdeasy-1在大肠杆菌BJ5183中进行同源重组,获得含目的基因的重组体质粒Ad-hNET,PacⅠ酶切后用脂质体Lipofectamine2000转染HEK293细胞,包装成重组体腺病毒。采用PCR技术和Western Blotting对重组体腺病毒进行鉴定,利用穿梭质粒pAdTrack-CMV中带有绿色荧光蛋白报告基因检测表达,经过扩增和纯化,测定病毒滴度。结果测序结果证明hNET序列的正确,PCR、PacⅠ酶切电泳和Western Blotting证实腺病毒重组质粒Ad-hNET构建成功。扩增纯化后测定重组病毒Ad-hNET的滴度为1.2×1010pfu/mL。结论成功构建了能表达hNET基因的重组腺病毒载体,为肿瘤的靶向治疗提供前期的研究工作。 相似文献
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