5种抗血小板药对大鼠肝酪蛋白激酶Ⅱ的影响

用ＤＥＡＥ－纤维素和肝素－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ层析法部分纯化了大鼠肝酪蛋白激酶Ⅱ（ＣＫⅡ）；研究了５种抗血小板药对ＣＫⅡ活性的影响。结果表明，肝素对ＣＫⅡ有强烈的抑制作用，其ＩＣ５０为０．８８ｍｍ·Ｌ－１；蝙蝠葛碱、川芎嗪对ＣＫⅡ有明显的抑制作用（Ｐ＜０．０１），但较肝素的作用弱得多；汉防己碱对ＣＫⅡ活性没有明显影响；而潘生丁能使ＣＫⅡ活性明显升高，在一定范围内呈剂量依赖关系。这些结果可能对研究ＣＫⅡ是否在血小板的聚集和活化中起某些作用有重要的参考价值。     

BRD7逆转录病毒稳定系的构建及其功能评价

目的探索BRD7（bromodomain．containingprotein7）是否具有抑癌基因的功能。方法根据NCBI提供的BRD7基因序列设计特异性引物扩增其编码区序列,经酶切、连接转化后进一步挑取单克隆菌落进行菌液PCR筛选及测序鉴定得到阳性重组质粒。共转293T细胞后收集浓缩病毒上清并感染U20S细胞,24h后用嘌呤霉素（puromycin）筛选稳定表达BI①7、的细胞株。结果菌落PCR扩增及DNA测序分析证明重组pMSCV-BRD7．GFP质粒克隆成功。GFP绿色荧光结果显示,绝大部分细胞成功整合了pMSCV-GFP或pMSCV-BRD7．GFP外源质粒;Westernblotting检测发现感染重组质粒pMSCV-BRD7．GFP的细胞株中BRD7蛋白的表达水平显著高于对照组。功能结果显示,过表达BRD7显著抑制U20S细胞的增殖,促进下游靶基因p21与MDM2的表达。结论本研究成功构建了针对BRD7基因的逆转录病毒稳定系,且初步证明了BRD7发挥抑癌基因的功能,为下一步深入研究其被调控的机制与功能奠定了基础。     

Tyrphostins对大鼠肝酪蛋白激酶Ⅱ活性的影响(英文)

目的:研究Tyrphostins(AG123,AG1394,AG114,AG1109,AG555)对酪蛋白激酶Ⅱ(CKⅡ)活性的影响。方法:依次采用DEAE-纤维素和肝素-Sepharose层析将大鼠肝CKⅡ纯化了104倍,通过将去磷酸化的酪蛋白和[γ-~(32)P)ATP与CKⅡ保温的方法测定CKⅡ的活性。结果:AG213对CKⅡ有强烈的抑制作用(IC_(50)44.7μmol·L~(-1)[41.5μmol·L~(-1),47.9μmol·L~(-1)]),AG1394(144μmol·L~(-1))对CKⅡ的抑制率为89％。AG114和AG1109对CKⅡ也有明显的抑制作用,而AG555对CKⅡ的活性没有影响。结论:某些tyrphostins是CKⅡ抑制剂。     

Effect of quercetin on cell cycle of HL-60 cells

本文报道了槲皮素对人早幼粒白血病细胞株ＨＬ－６０细胞的增殖和细胞周期的影响．结果表明槲皮素能抑制ＨＬ－６０细胞的增殖，呈剂量依赖关系，当槲皮素作用２４，４８，７２ｈ后，其ＩＣ５０分别为４６．６，２８．７，１４．９μｍｏｌ·Ｌ－１．流式细胞仪分析表明，槲皮素能明显增加ＨＬ－６０的Ｇ２－Ｍ期细胞，而相对减少Ｇ０／Ｇ１细胞之百分比，且呈剂量依赖关系，当去除槲皮素时，该作用是可逆的．结果表明槲皮素对肿瘤细胞的生长抑制作用可能与其对细胞周期的影响有关．     

槲皮素水溶性衍生物的制备及生物活性

槲皮素（ｑｕｅｒｃｅｔｉｎ；３，３′，４′，５，７ｐｅｎｔａｈｙｄｒｏｘｙｆｌａｖｏｎｅ）是天然的黄酮类化合物，具有抗肿瘤、抗血小板、抗氧化作用，并影响多种酶的活性〔１～４〕．但由于槲皮素不溶于水，难于吸收〔５〕，极大地限制了其生物利用度和体内给药...     

槲皮素单硫酸酯钠对 HL-60细胞生长的影响(英文)

通过观察槲皮素单硫酸酯钠 (SQMS)对 HL-60细胞毒作用 ,细胞周期变化 ,胞内 Ca2 +浓度([Ca2 +]i)变化及蛋白激酶 CK2活性的变化研究SQMS对 HL- 60细胞生长的影响 .发现 SQMS(2 0- 1 2 0μmol· L-1)可浓度依赖性抑制 HL- 60细胞的生长 ,阻断 HL- 60细胞于 G0 /G1期 ;SQMS(1 0 0μmol· L-1)可使 [Ca2 +]i 由 (1 0 5± 9) nmol·L-1上升到 (2 0 1± 1 3) nmol· L-1;低浓度 SQMS(0 .55-8.8μmol· L-1)可显著抑制从 HL- 60细胞中纯化的蛋白激酶 CK2的活性 .结果提示 ,SQMS可抑制HL- 60细胞生长 ,其机理可能与抑制 HL- 60细胞中蛋白激酶 CK2的活性 ,提高细胞 [Ca2 +]i 及促进细胞分化有关 .     

三种tyrphostin对大鼠肝酪蛋白激酶Ⅱ的作用(英文)

目的：研究ｔｙｒｐｈｏｓｔｉｎ对酪蛋白激酶Ⅱ（ＣＫⅡ）的作用．方法：依次采用ＤＥＡＥ纤维素和肝素Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ层析将大鼠肝ＣＫⅡ进行了部分纯化，通过将去磷酸化的酪蛋白和［γ３２Ｐ］ＡＴＰ与ＣＫⅡ保温的方法测定ＣＫⅡ的活性．结果：ＡＧ３４对ＣＫⅡ有强烈的抑制作用ＩＣ５０３３μｍｏｌ·Ｌ－１（２７－４１μｍｏｌ·Ｌ－１），ＡＧ３７２（１２１μｍｏｌ·Ｌ－１）和ＡＧ１１１２（１５０μｍｏｌ·Ｌ－１）对ＣＫⅡ有明显的抑制作用．ＡＧ３４对ＣＫⅡ的动力学研究表明：它与酪蛋白和ＡＴＰ均呈非竞争性抑制作用．结论：ＡＧ３４、ＡＧ３７２和ＡＧ１１１２是ＣＫⅡ的抑制剂，ＡＧ３４的抑制作用与酪蛋白和ＡＴＰ均呈非竞争性．     

Tyrphositns对大鼠肝酪蛋白激酶Ⅱ活性的影响

目的；研究Ｔｙｒｐｈｏｓｔｉｎｓ（ＡＧ１２３，ＡＧ１３９４，ＡＧ１１４，ＡＧ１１０９，ＡＧ５５５）对酪蛋白激酶Ⅱ（ＣＫⅡ）活性的影响。方法：依次采用ＤＥＡＥ－纤维素和肝素Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ层析将大鼠肝ＣＫⅡ纯化了１０４倍，通过将去磷酸化的酪蛋白和（γ－＾３２Ｐ）ＡＴＰ与ＣＸⅡ保温的方法测定ＣＫⅡ的活性。结果：ＡＧ２１３对ＣＸⅡ有强烈的抑制作用（ＩＣ５０４４．７μｍｏｌ．Ｌ＾－１（４１．５μｍｏｌ．     

槲皮素对HL-60细胞周期的影响

本文报道了槲皮素对人早幼粒白血病细胞株HL-60细胞的增殖和细胞周期的影响. 结果表明槲皮素能抑制HL-60细胞的增殖， 呈剂量依赖关系， 当槲皮素作用24， 48， 72 h后， 其IC₅₀分别为 46.6, 28.7, 14.9 μmol·L^-1流式细胞仪分析表明，槲皮素能明显增加HL-60的G₂-M期细胞，而相对减少G₀/G₁细胞之百分比，且呈剂量依赖关系，当去除槲皮素时，该作用是可逆的. 结果表明槲皮素对肿瘤细胞的生长抑制作用可能与其对细胞周期的影响有关.