碘对人胎大脑神经原特异性烯醇化酶表达的影响

利用生理剂量碘作用于早期人胎大脑神经细胞无血清培养物,经离子交换法分离出神经细胞的神经原特异性烯醇化酶(NSE)和非神经原特异性烯醇化酶(NNE)。两酶的转换方式与体内相似,碘促进神经细胞 NNE(αα,αγ亚基)向 NSE(γγ亚基)转换。培养25天 KI(?)组NSE 含量比培养30天对照组含量高,培养30天 KI_2组 NSE 含量是对照组的3倍,且 NSE 出现提前,活性增高。培养15天时加碘的作用比开始培养时加碘的作用更加明显。     

几种激素和IL-1β对人脑星形胶质细胞IL-6 、TNF-α分泌的影响

目的 观察T3等因素对体外培养人胎大脑星形胶质细胞分泌IL-6、TNF-α的调节作用。方法 纯化培养人胎大脑星形胶质细胞,应用酶联免疫分析(ELISA)方法检测培养上清液中IL-6、TNF-α的水平。结果 (1)星形胶质细胞(AC)在体外培养条件下可自发分泌IL-6,而TNF-α则几乎检测不到。(2)LPS(0.1μg/mL)即可诱导AC产生IL-6和TNF-α。(3)IL-1β是IL-6分泌的主要诱导剂,但不诱导TNF-α分泌。(4)氢化可的松可明显抑制AC分泌IL-6、TNF-α。(5)T3在72h可刺激IL-6的分泌。(6)胰岛素对IL-6的分泌没有明显的调节作用。结论 AC可通过分泌细胞因子参与炎症反应等病理过程并维持中枢神经系统的正常发育、内环境的稳定,且受多种因素的调节。在中枢神经系统中T3、胰岛素主要参与调节发育和代谢,可能不直接参与炎症和免疫机制调节。     

碘及甲状腺激素对体外培养早期人胚大脑神经细胞分化的研究——神经特殊烯醇酶免疫组织化学观察

本实验在用脱碘水配制的无血清培养液中建立了80天胚龄的人胎儿大脑神经细胞原代培养缺碘、缺甲状腺素体外生物学模型;神经特殊烯醇酶(NSE)免疫组织化学观察证明,NSE阳性反应即分化成熟的神经细胞百分比随培养日龄增长,生理浓度的碘离子与生理浓度的T_3作用基本相同,使培养神经细胞突起加长、分化成熟率增多、胞浆面积增大,即直接促进神经细胞分化成熟;单独补加生理浓度T_4时未显示出这种促进分化作用。     

IL-6、IL-1β、TNFα对人胎大脑神经细胞c-fos、c-jun的表达调控

目的：探讨ＩＬ－６、ＩＬ－１β、ＴＮＦα在大脑神经细胞体外发育过程中对原癌基因ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ的表达调控规律。方法：应用人胎大脑神经细胞无血清原代培养模型。通过ＤＮＡ－ＲＮＡ斑点杂交,采用计算机图像分析系统测定杂交点的平均灰度值。结果：ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ的表达均在ＩＬ－６、ＩＬ－１β、ＴＮＦα作用后１５～３０ｍｉｎ开始上调,１ｈ达高峰,而后下降。结论：这些细胞因子均在转录水平上促进神经细胞ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ的表达。为分析其生物学效应的分子机制奠定基础。     

T3对人神经干细胞分化为少突胶质细胞的影响

目的 以体外诱导生成的人神经干细胞(NSCs)为模型，研究甲状腺激素(TH)对其分化的影响。方法 无菌状态下取因治疗目的而终止妊娠的胎龄10～22周的人胎大脑半球，机械法分散细胞后，以10^5个／ml细胞密度接种于含N-2配方的DMEM／F12培养基中，同时添加表皮生长因子(EGF，20μg／L)和／或碱性成纤维生长因子(bFGF，20μg/L)。采用自然分化以及T3诱导的方法诱导分化，免疫组织化学方法鉴定分化后的细胞类型，抗体分别为NF-200、GFAP、Gal-C，并采用抗MBP、O4、A2B5抗体鉴别少突胶质细胞发育的不同阶段。结果 T3有助于向胶质细胞方向发展，包括少突与星形胶质细胞，MPB阳性细胞比例超过80％，尤其在EGF L组，这种现象更为突出。结论 NSCs的定时分化是内外源信号共同作用的结果。TH就是这样一种信号，激活“生物钟”机制的效应组件，在有限次的分化后诱导NSCs分化为少突胶质细胞。     

Effects of parathyroid hormone and estradiol on proliferation and function of human osteoblasts from fetal long bone. An in vitro study.

The effect of parathyroid hormone (PTH) (0.01 nM-10 nM) and 17 -estradiol (E2, 1 nmol-10 nM) alone or in combination on 3H thymidine incorporation, alkaline phosphatase and adenylate cyclase activities were investigated in human fetal osteoblasts using serum-free monolayer primary cultures. The results showed that PTH inhibited cell proliferation while E, promoted it. On alkaline phosphatase activity, PTH showed a complex results while E, were slightly inhibitory. PHT-E2 combination suggested that E2 could alter the effect of PTH alone, also potentiated the anabolic and antagonize the catabolic effects of PTH on bone formation.     

IL-6、IL-1β、TNFα对人胎大脑神经细胞体外生长的影响1

目的研究IL-6、IL-1β、TNFα在人胎大脑神经细胞体外发育过程中的作用,为临床防治提供实验依据.方法应用10～13周龄人胎大脑神经细胞无血清原代培养模型,观察活细胞形态,MTT法测定细胞存活率.结果IL-6促进细胞贴壁、突起生长与伸展,IL-1β、TNFα对形态学影响不大.IL-6、IL-1β单独作用时,细胞存活率呈一过性下降,后又出现升高,但IL-6升高出现较早,作用较强,作用强度与实验浓度无关;TNFα(10～1000U/ml)作用下细胞存活率持续低于对照组,仅10U/ml组体外16d(16DIV)时高于对照组108.26%;IL-1β与TNFα联合作用时仅于16DIV时为对照组109.90%(P＜0.01),呈轻度协同效应.结论人胎大脑神经细胞体外发育过程中,IL-6、IL-1β具有神经营养作用,促进细胞存活,IL-6还可促进细胞生长、分化;TNFα体外主要为神经毒性作用;IL-1β与TNFα联合作用于培养后期可显轻度协同效应.作用机理可能与局部自分泌与旁分泌有关.     

氟对人胎成骨细胞培养物生长分化影响的探讨

本实验使用人胎成骨细胞(OB)培养物做为氟中毒模型。通过形态学观察及细胞蛋白含量、碱磷酶活性、细胞放射性钙摄入率等生化指标测定,分析了氟的细胞毒作用。证实了氟中毒情况下氟离子可以影响 OB 的多种代谢途径;氟抑制 OB 生长、功能的浓度不在同一水平,不同的氟中毒浓度对 OB 功能产生双相作用。     

3,5,3′-三碘甲腺原氨酸对人胎大脑神经细胞培养物微管蛋白发育的影响

本文报道利用3个月龄人胎大脑神经细胞无血清培养液培养的原代培养物,经同位素法测定观察了细胞内微管蛋白(Tubulin)发育的变化。培养5,10,15,20天的培养物,证明生理剂量的3,5,3′(?)三碘甲腺原氨酸(T_3)对神经细胞微管蛋白的发育有明显的影响,可直接促进人胎大脑神经细胞分化成熟。