微乳的研究进展及应用

微乳是由油相、水相、乳化剂及助乳化剂在适当比例自发形成的一种透明或半透明、低黏度、各向同性且热力学稳定的油水混合系统,其作为药物载体的主要优点是可同时增溶不同溶解性能的成分,分散性好,利于吸收,提高生物利用度.现从微乳作为给药载体时的特点和在药剂学中的研究应用情况,对近年来国外进展状况进行综述.     

金花茶通过AMPK/PPAR-α通路减轻NAFLD引起的脂代谢异常机制研究

[目的]观察金花茶(Camellia chrysantha(Hu) Tuyama)对非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)的防治效果,初步研究其作用机制。[方法]将48只C57BL/6小鼠随机分为6组:对照组、NAFLD模型组、金花茶粉末低剂量组、金花茶粉末高剂量组、金花茶水提物低剂量组、金花茶水提物高剂量组,每组各8只。除对照组采用普通饲料喂养外,其他各组采用高脂膳食喂养8周建立NAFLD模型,喂养结束后检测小鼠的体重、脂肪重量、血清生化指标、肝组织中极低密度脂蛋白受体(very low density lipoprotein receptor,VLDLR)、过氧化物酶体增殖物激活受体-α(peroxisome proliferator activated receptor-α,PPAR-α)与磷酸化腺苷酸激活蛋白激酶(phosphorylated-adenosine monophosphate activated protein kinase,p-AMPK)蛋白的表达水平变化。[结果]低剂量金花茶粉末与水提物均可以显著降低NAFLD小鼠血清中甘油三酯(triglyceride,TG)、谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)和谷草转氨酶(aspartate transaminase,AST)水平(P＜0.05),其中低剂量金花茶水提物显著降低NAFLD小鼠肝组织中VLDLR表达水平(P＜0.05),显著提高p-AMPK与PPAR-α蛋白表达水平(P＜0.05)。[结论]金花茶水提物通过下调VLDLR蛋白表达,上调p-AMPK、PPAR-α蛋白表达,减轻NAFLD引起的脂代谢异常,缓解NAFLD小鼠肝脏脂质病变。     

钩藤碱诱导Nrf2核转位对大鼠星形胶质细胞缺血再灌注损伤的保护作用及调控机制

目的观察钩藤碱对星形胶质细胞缺血再灌注损伤过程中胞质和胞核的NF-E2相关因子2(Nrf2)表达变化,分析其核转位情况与细胞氧化损伤水平的相关性。并观察磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)信号通路在钩藤碱诱导Nrf2核转位中的作用。方法大鼠原代星形胶质细胞分为对照组、模型组、钩藤碱组和PI3K抑制剂组。对照组用DMEM正常培养;钩藤碱组用3μg·mL-1钩藤碱预孵育6h;PI3K抑制剂组用3μg·mL-1钩藤碱和Wortm annin(PI3K抑制剂)共同预处理6h,更换无糖无血清培养基,放入缺氧培养箱1h后再复氧并更换原培养条件1h,诱导原代培养的大鼠星形胶质细胞损伤。分光光度法检测细胞MDA、GSH及培养液LDH水平,。流式细胞术检测细胞内活性氧簇(ROS),用荧光强度(FI)来表示ROS水平。Western blot检测胞质和胞核内Nrf2表达水平。结果钩藤碱明显诱导Nrf2核转位,其诱导作用可被Wortm annin部分阻断。模型组ROS、MDA、LDH水平较对照组显著升高(P<0.01),钩藤碱组ROS、MDA、LDH水平较模型组显著降低(P<0.01),抑制剂组ROS、MDA、LDH水平显著高于钩藤碱组,低于模型组(P<0.01)。结论钩藤碱可诱导Nrf2核转位,减轻缺血再灌注引起的氧化损伤,PI3K信号通路是钩藤碱诱导Nrf2核转位的重要信号通路,抑制该通路可减弱钩藤碱对星形胶质细胞氧化应激损伤的保护作用。     

蓝萼甲素对人肝癌细胞HepG2细胞株的作用

目的观察蓝萼甲素对人肝癌细胞HepG2的抑制和诱导细胞凋亡作用。方法不同浓度蓝萼甲素处理HepG2细胞后,MTT检测24h,48h细胞生长抑制率,LDH试剂盒检测细胞LDH释放量,倒置显微镜观察细胞形态,RT-PCR法对凋亡相关基因Bc-l 2,bax和c-myc的mRNA表达进行检测,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果在1.25~20μmol.L-1剂量范围内,蓝萼甲素对HepG2的生长有显著抑制作用,并呈剂量依赖性。蓝萼甲素5,10,20μmol.L-1能够使HepG2培养液中的LDH释放量显著增加,倒置相差显微镜观察,可见细胞明显皱缩。同时蓝萼甲素可使细胞Bc-l2表达减少,Bax表达增加,c-myc表达减少。结论蓝萼甲素可抑制HepG2细胞增殖并诱导其凋亡,其机制可能与调控Bc-l2,Bax,c-myc的mRNA的表达有关。     

积雪草苷对Aβ诱导星形胶质细胞炎性介质释放的影响

目的:观察积雪草苷对Aβ1-42诱导星形胶质细胞炎性介质释放的影响.方法:分离并鉴定新生大鼠大脑皮质星形胶质细胞,用5μMAβ1-42激活原代星形胶质细胞,刺激其分泌NO,并大量表达iNOSmRNA.用不同浓度的积雪草苷进行干预,检测积雪草苷处理后细胞培养液中NO的含量,RTPCR检测iNOSmRNA的表达.结果:积雪草苷有效地抑制了Aβ1-42诱导星形胶质细胞NO的释放,并降低了iNOSmRNA的表达水平.结论:积雪草苷具有较好的神经抗炎作用.     

伊立替康联合氟尿嘧啶对大肠癌LOVO细胞株增值和凋亡的影响

目的探讨伊立替康联合氟尿嘧啶体外抑制人大肠癌细胞株增值和凋亡的效果,以确定联合用药是否具有协同效应。方法使用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法,流式细胞仪,Annexin V-PI双标法等多项方法,体外研究伊立替康联合氟尿嘧啶对人大肠癌LOVO细胞生长抑制和促凋亡作用。结果两药联合应用对大肠癌LOVO细胞株的抑制作用要明显强于单用一种药物,差异均具有显著性意义;24 h时流式细胞仪检测LOVO细胞的凋亡情况发现,单用伊立替康、单用5-FU和联合用药均较对照组显著升高（P〈0.01）。结论伊立替康联合氟尿嘧啶对大肠癌LOVO细胞株生长的抑制作用具有协同或者相加作用,并有促凋亡效应。     

熊果酸通过AMPK介导的信号通路激活自噬改善油酸诱导的肝细胞脂肪沉积

[目的]揭示熊果酸改善油酸诱导的肝细胞脂质沉积的作用及其潜在分子机制。[方法] 采用油酸诱导HepG2肝细胞建立脂质沉积模型,给予不同浓度熊果酸(10、20、40μmol·L-1)进行干预,采用酶法检测细胞内甘油三酯含量,Bodipy染色法观察胞内的脂滴,Western blot检测抗微管相关蛋白1轻链3B(microtubule-associated protein 1 light chain 3B,LC3B)蛋白表达及腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)磷酸化水平。[结果] 0.5mmol·L-1油酸干预肝细胞16h可建立肝脂质沉积体外模型;不同浓度熊果酸干预16h可以显著减轻油酸导致的肝细胞脂质沉积(P＜0.05,P＜0.01),且保护作用呈剂量依赖关系。自噬激动剂雷帕霉素可显著降低油酸诱导后肝细胞甘油三酯含量,并抑制胞内脂滴的形成(P＜0.05);而自噬抑制剂氯喹显著加重油酸诱导的肝脂质沉积(P＜0.05)。熊果酸干预可显著上调肝细胞内LC3B的表达(P＜0.05,P＜0.01),从而激活自噬,而抑制自噬可显著阻断熊果酸对肝脂质沉积的减轻作用。熊果酸还可显著激活自噬调控开关AMPK的磷酸化水平(P＜0.05)。[结论] 熊果酸通过激活自噬改善油酸诱导的肝细胞脂质沉积,AMPK可能是熊果酸激活自噬的潜在分子靶点。