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目的:采用高效液相色谱和薄层色谱技术,分别测定重楼中薯蓣皂苷元的含量。方法:采用HPLC法,选用ODS柱,流动相:乙腈-水(90:10),检测波长:203nm,柱温:35℃;TLC法选用硅胶G板,展开剂:环已烷-乙酸乙酯(4“1),测定波长:610nm,参比波长:420nm。结果:线性范围分别为1.2-7.2μg(r=0.9998),0.2-1.0μg(r=0.9957)。平均回收率分别为102.2%,RSD=3.39%(n=6);100.9%,RSD=2.68%(n=6)。结论:两种方法均可用于重楼中薯蓣苷元的质量控制。 相似文献
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成簇的规律间隔的短回文重复序列(CRISPR)及CRISPR相关蛋白9(Cas9)的发现深刻影响了基因编辑技术的发展,在疾病的治疗中也展现了非凡的潜力。非病毒递送系统特别是智能刺激响应型非病毒递送系统因其具有生物相容性好、易于物理或化学修饰、易于大规模生产等优势,近年来受到越来越多的关注。智能刺激响应型递送系统可通过感知和响应特定的内源性或外源性的信号来控制CRISPR-Cas9的基因组编辑,使之更加精准和高效,同时降低脱靶效应。综述了智能刺激响应型的纳米递送系统应用于CRISPR-Cas9递送的最新研究进展,并讨论了其面临的问题和挑战。 相似文献
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CRISPR/Cas系统是现阶段应用最广泛的基因组编辑工具,但由于其激活同源重组进行DNA修复的效率低且存在脱靶效应,严重限制了该工具在基因治疗方面的应用。碱基编辑是一种基于CRISPR/Cas系统的基因编辑新策略,其工作原理是利用其结合的碱基脱氨酶精确编辑目标DNA或RNA上一小段窗口内的核苷酸。碱基编辑系统包括胞嘧啶碱基编辑系统(CBEs)和腺嘌呤碱基编辑系统(ABEs),可以分别实现碱基对C·G到T·A和A·T到G·C的转换。碱基编辑系统作用过程中不依赖于DNA双链断裂的发生,无需引入供体DNA,并因其高效性及特异性已被广泛应用于遗传性疾病治疗的研究中。本文综述了近年来碱基编辑系统的发展历程和在遗传性疾病治疗中的潜力,并对其作为基因治疗药物的发展前景进行了展望。 相似文献
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本文研究了葡聚糖-精胺阳离子聚合物(DSP)基因载体的性能及其对体外细胞基因的转染效率。氧化葡聚糖与精胺通过还原胺化法反应制得DSP,所得DSP与质粒pEGFP通过静电吸附形成复合物;当DSP/DNA质量比在4∶1至20∶1,能形成稳定的复合物,复合物粒径为162.6~187.9 nm,zeta电位则从+8.45 mV增至+39.6 mV;DSP能有效保护DNA不受核酸酶I降解,同时在一定pH范围内载体具有较强的缓冲能力;复合物在质量比为8∶1时对SMMC-7721肝癌细胞、BHK-21细胞的转染率分别达到最高,其效果均与Lipofectamine 2000相当。该研究表明葡聚糖-精胺阳离子聚合物是一种高效的基因载体。 相似文献
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目的:研究非病毒基因载体葡聚糖-精胺阳离子聚合物(DSP)的合成及其与DNA所形成复合物的物理性能.方法:葡聚糖氧化后,通过还原胺法与精胺反应制得DSP,与质粒pEGFP在室温孵育后形成复合物;激光粒度仪测定复合物粒径和Zeta电位;透射电镜观察复合物形态;琼脂糖凝胶电泳观察DSP对DNA的阻滞能力.结果:DSP与DNA在质量比大于4:1时,能形成稳定的复合物;复合物平均粒径为173.6nm,平均电位为23.2 mV;所形成的复合物呈圆球状;DSP能阻滞DNA不受电场的影响而迁移.结论:葡聚糖-精胺阳离子聚合物是一种制备工艺简单、有应用前景的非病毒基因载体. 相似文献
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高效液相色谱法和薄层色谱法测定重楼中薯蓣皂苷元的含量 总被引:19,自引:0,他引:19
目的:采用高效液相色谱和薄层色谱技术,分别测定重楼中薯蓣皂苷元的含量。方法:采用HPLC法,选用ODS柱,流动相:乙腈-水(90:10),检测波长:203nm,柱温:35℃;TLC法选用硅胶G板,展开剂:环已烷-乙酸乙酯(4“1),测定波长:610nm,参比波长:420nm。结果:线性范围分别为1.2-7.2μg(r=0.9998),0.2-1.0μg(r=0.9957)。平均回收率分别为102.2%,RSD=3.39%(n=6);100.9%,RSD=2.68%(n=6)。结论:两种方法均可用于重楼中薯蓣苷元的质量控制。 相似文献
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