输液泵在改良人源多肽抗生素LL-37表达量的应用和探析

目的改良毕赤酵母发酵条件,提高人源多肽抗生素LL-37表达量。方法用无油气体压缩机供氧,电脑输液泵控速给养料的方法,对毕赤酵母发酵进行改良。结果改良方法提高了毕赤酵母表达量约1.65倍。结论无油气体压缩机对发酵中氧气的供给、电脑输液泵控速给养料的改良方法,提高了LL-37的表达量。     

肝炎患者血清ALT、TBA、CHE的联合检测

目的探讨肝炎患者血清ALT、TBA、CHE联合检测的临床意义。方法采用全自动生化分析仪检测健康者（50例）、急性肝炎患者（50例）、慢性肝炎患者（52例）的血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、总胆汁酸（TBA）、胆碱酯酶（CHE）,并进行比较分析。结果急、慢性肝炎患者血清ALT、TBA、CHE水平与健康者比较,差异有统计学意义（P〈0．05）;急、慢性肝炎患者血清ALT、TBA、CHE水平比较,急性肝炎患者升高更为明显。结论肝炎患者血清ALT、TBA、CHE的联合检测对肝病诊断及分型均有重要的临床意义,值得关注。     

用补体结合法测定弱抗－B1例

用补体结合法测定弱抗－Ｂ１例２２６００６江苏省南通市红十字中心血站姜标，常秋月，刘永馨ＩｇＭ类的抗体与抗原复合物具有很强的激活补体的能力，补体的链式反应使大量的补体成份Ｃ３ｂ结合于红细胞上［１］，此时，在抗－Ｃ３血清的作用下，血球凝集。将此原理应用于...     

5′-非转录区序列改建提高毕赤酵母表达抗菌肽LL-37

目的:探讨5'-非转录区(5'-UTR)序列改建对毕赤酵母表达外源蛋白LL-37的影响.方法:去除毕赤酵母分泌表达质粒pPIC9 5'-UTR内GGATCCAA序列,转化E.coli DH5α,构建改良的毕赤酵母分泌表达载体pPIC9-EDIT;PCR鉴定及测序确认后与酵母偏爱密码子编码的LL-37基因片段连接,构建改良的重组表达载体pPIC9-EDIT-LL-37;原生质球法转化毕赤酵母GS115,PCR扩增鉴定后诱导LL-37表达,筛选最佳表达条件,对表达产物进行凝胶电泳和Western印迹分析;比较转入pPIC9-EDIT-LL-37及pPIC9-LL-37后毕赤酵母表达产物的抑菌活性,间接测定改建前后LL-37蛋白表达量的变化.结果:PCR鉴定及测序证实pPIC9-EDIT改建成功,成功构建重组载体pPIC9-EDIT-LL-37;转化毕赤酵母后表达产物PCR鉴定出LL-37基因,最佳诱导甲醇浓度为0.5%,最佳诱导表达时间为72 h,电泳及Western印迹分析证实表达产物为LL-37;改建后LL-37蛋白表达量提高了约35倍.结论:pPIC9 5'-UTR序列的改建能明显提高毕赤酵母表达LL-37蛋白,值得进一步研究以应用于其他外源蛋白表达.     

胃癌患者输注红细胞前后血清CEA、Hcy和SA水平的变化及临床意义

目的 探讨胃癌患者输注红细胞前后血清癌胚抗原（CEA）、同型半胱氨酸（Hcy）和唾液酸（SA）水平的变化及临床意义.方法 应用放射免疫分析法、酶联法和化学法对33例胃癌患者进行了输注红细胞治疗前后血清CEA、Hcy和SA水平测定,并与35名正常健康人作比较.结果 胃癌患者在输注红细胞前血清CEA、Hcy和SA水平非常显著地高于正常人组（P＜0.01）,经输注红细胞2周后与正常人的比较仍有显著性差异（P＜0.05）.结论 检测胃癌患者输注红细胞前后血清CEA、Hcy和SA水平对其病情的发展和判断预后均具有重要的临床价值.     

TPPA法在假阳性梅毒筛查中的应用

梅毒是由梅毒螺旋体（TP）所引起的慢性全身性疾病。该病传染性强,主要传播途径有性接触、母婴传播及输血传播。近年来,我国梅毒的感染率呈大幅度上升趋势。选择简单、快速、高敏感性和特异性诊断方法和试剂,对发现传染源、控制梅毒传播具有重要意义。目前国内临床实验室进行梅毒血清学检测最为常用的方法是ELISA法,但有一定的假阳性率。2012年1～12月,我们对梅毒筛查阳性的献血人员采用梅毒螺旋体抗体颗粒凝集实验（TPPA）法进行复查鉴定,现分析其筛查情况。     

人源抗菌肽LL-37表达载体的构建及其在毕赤酵母中的表达

目的:构建人源抗菌肽LL-37的表达载体pPIC9-LL-37,将其转化毕赤酵母GS115,诱导LL-37表达.方法:根据抗菌肽LL-37氨基酸序列及毕赤酵母偏爱密码子,应用互补延伸PCR技术扩增抗菌肽LL-37基因,定向克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9上,转化E.coli DH5α,构建重组分泌型酵母表达载体pPIC9-LL-37,PCR鉴定并测序;原生质球法转化毕赤酵母GS115,PCR扩增鉴定;甲醇诱导LL-37表达,筛选最高表达株,检测表达产物对大肠杆菌的抑菌活性,并对其进行聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western印迹分析.结果: pPIC9-LL-37载体构建成功;转化毕赤酵母后PCR鉴定出LL-37基因;0.5%甲醇能诱导LL-37高表达,筛选出最高表达株,发酵上清约含LL-37 0.5 μg/ml,对E.coli具有较强的抑菌活性,电泳及Western印迹分析证实表达产物为LL-37.结论:成功构建pPIC9-LL-37载体,转化毕赤酵母后,经甲醇诱导能高表达分泌LL-37,表达的LL-37蛋白具有较强的抑菌活性.     

HBsAg酶联免疫法诊断试剂的质量评价

目的评价HBsAgELISA诊断试剂盒的质量。方法应用ELISA法对HBsAg国家标准品血清盘、临床科研血清盘、临界值质控血清等进行检测,考评HBsAg诊断试剂盒质量。结果6个厂家试剂均符合国家标准品血清盘判读标准,均能检测出1IU／ml定值质控血清,但测出S／CO值却差异较大,用临床科研血清盘检测,其试剂的灵敏度、特异性、总符合率存在差异。结论不同厂家试剂质量仍存在差异,使用前应进行抽检,综合评价,选择具有灵敏度高、特异性强、精密度好的试剂,优选两种匹配较好的试剂,从而提高HBsAg检出率,减少HBsAg漏检率,有利于控制和减少乙型肝炎的输血传播。     

IgG与IgM混合性抗Jk~(b)1例

ＩｇＧ与ＩｇＭ混合性抗Ｊｋｂ１例２２６００６江苏省南通市红十字中心血站常秋月姜标江苏省如皋市血站黄斌１病例简介１９９７年９月，献血者黄某（Ａ型，有怀孕史）与病人Ａ型血作交叉配血时，发生次侧凝集，故送本中心血站检查，该标本为含有ＩｇＭ与ＩｇＧ混合的抗Ｊ...     

酶联免疫法和胶体金法测定HBsAg的比较

目的比较酶联免疫法和胶体金免疫层析法测定乙肝表面抗原的结果,为实验室工作提供参考。方法对我站10493份血清标本分别采用酶联免疫法和胶体金免疫层析法测定乙肝表面抗原,对结果进行比较分析。结果酶联免疫法和胶体金免疫层析法的检测阳性率分别为0.48%、0.40%,两者比较无显著性差异(χ2=0.6987,P0.05);两种方法检测标本符合率为99.81%,胶体金试纸法的灵敏度为72.00%,特异度为99.94%。结论酶联免疫法和胶体金免疫层析法均为测定乙肝表面抗原的可靠方法,但胶体金免疫层析法的灵敏度有待提高。