人工合成成骨生长肽对辐射损伤小鼠造血功能的保护作用

目的　探讨人工合成成骨生长肽 (sOGP)对辐射损伤小鼠造血功能的保护作用 ,阐明其剂量 效应关系。方法　以 4 .0和 7.5Gy13 7Csγ射线照射小鼠为模型 ,采用皮下注射和肌肉注射 2种给药途径连续 8d给予sOGP ,剂量范围为 0 .0 39～ 6 4 0nmol/(kg·d) ,观察外周血象、骨髓有核细胞数、骨髓粒系造血祖细胞集落形成(CFU G)、骨髓细胞分类和骨髓切片组织学等的变化。结果　sOGP能加快受照小鼠外周血白细胞、骨髓有核细胞数的恢复 ,在一定的剂量范围内呈明显的剂量依赖性 ,并能刺激髓外造血 ;促进 (CFU G)形成作用显著高于重组人粒系集落刺激因子 (rhG CSF)约 2倍 ;骨髓病理学观察显示sOGP能加快受照小鼠骨髓造血组织损伤的恢复 ,刺激骨髓粒系增生。结论　sOGP可明显促进受照射小鼠造血功能的恢复 ,其机制可能是通过作用于早期造血阶段或 (及 )改善微环境进而促进造血。     

C肽对12周STZ大鼠糖尿病肾病的干预作用

目的　应用STZ大鼠模型探讨单独应用C肽对糖尿病肾病的干预作用。方法　大鼠分 4组 :(1)血糖控制接近正常的糖尿病胰岛素强化组 (DM I组 ) ;(2 )维持高血糖状态的糖尿病C肽 (130nmol/kg每天两次皮下注射 )组 (DM C组 ) ;(3)血糖水平与DM C组一致的糖尿病组 (DM组 ) ;(4)同龄正常大鼠为对照组 (N组 )。12周后测定肾重 /体重比值、肾小球体积、细胞外基质 /肾小球截面积比值、肾小球基底膜厚度和尿白蛋白排泄率。结果　DM C组的肾小球体积与细胞外基质 /肾小球截面积比值达到DM I组和N组水平 ,约为DM组相应参数的 5 1%与 74 % (P <0 .0 0 1)。DM C组的肾重 /体重比值与尿白蛋白排泄率接近DM组 (P >0 .0 5 ) ,高于DM I组 (分别为P =0 .0 3与P =0 .0 5 )。各组肾小球基底膜厚度无统计学差异。结论　单独应用C肽 12周可以预防STZ大鼠肾小球细胞外基质积聚导致的系膜扩张和肾小球肥大 ,且不依赖糖代谢紊乱的纠正 ,但对整个肾脏肥大和尿白蛋白漏出没有预防作用。     

C肽联合胰岛素干预治疗对大鼠早期糖尿病肾病的干预

临床试验证实严格控制血糖、血压可减少和延缓糖尿病肾病的发生发展 ,但具体实施困难 ,尚需寻找其他非依赖于血糖血压的防治途径。本研究观察Ｃ肽联合胰岛素治疗对大鼠早期糖尿病肾病的作用。一、材料和方法1.糖尿病大鼠模型的建立 :采用雄性ＳＤ大鼠 ,2月龄 ,体重 2 0 0～ 2 2 0克。留取正常对照组 ,其余大鼠禁食过夜后 ,按 5 0ｍｇ/ｋｇ经尾静脉注射 10 %链脲佐菌素 (ＳＴＺ ,购自Ｓｉｇｍａ公司 )柠檬酸缓冲液 (ｐＨ 4 .5 ) ,7天后用Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ .Ｐ .Ｉ.Ｄ血糖仪 (美国雅培公司 )测尾静脉血糖 ,血糖大于 16 .5ｍｍｏｌ/Ｌ确认为…     

A synthetic oligopeptide of HDV antigen and its diagnostic application in HDV infection

A fragment of hepatitis delta antigen(HDAg),a 27-peptide,was synthesized andused to develop an ELISA for the diagnosis of hepatitis delta virus(HDV)infection.It was foundthat positive anti-HD reaction occurred in the 27-peptide coated microtiter well after a sample ofstored serum known to be anti-HD positive was added. Neutralization test revealed that the pep-tide competed with natural HDAg for anti-HD, indicating the similarity of the antigenicity be-tween the peptide and natural HDAg.The peptide was quite specific in its antigenicity withoutcross reaction with normal human or mouse serum or with human anti-HA,anti-HB or anti-HCpositive serum.When the peptide was used clinically,1 anti-HD positive case among 300 blooddonors and 21 anti-HD positive cases among 211 cases of various forms of hepatitis B were detect-ed with the 27-peptide.     

点突变p53肽诱导肽特异性CTL的研究

目的探索点突变ｐ５３肽诱导细胞免疫应答的可能性,为其作为肽疫苗用于肿瘤免疫治疗提供实验依据。方法人工合成小鼠点突变ｐ５３肽Ｐ１３２Ｆ（ＬＮＫＬＦＦＱＬ,１３２Ｃｙｓ→Ｐｈｅ突变）,与不完全弗氏佐剂（ＩＦＡ）或ＲＩＢＩ佐剂（ＲＡＳ）混合,皮下免疫Ｃ５７ＢＬ／６小鼠,分离脾细胞体外用肽再刺激,诱导细胞毒Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）,并以５１Ｃｒ释放法检测其杀伤活性。结果Ｐ１３２Ｆ肽加上ＩＦＡ或ＲＡＳ免疫小鼠,均能诱导肽特异性ＣＤ８＋ＣＴＬ;低剂量重组白细胞介素２（ｒＩＬ－２）能增强肽免疫效果。结论所用突变的ｐ５３蛋白具有免疫原性,提示来源于突变ｐ５３的抗原肽有可能作为肽疫苗用于临床肿瘤免疫治疗     

高活力人降钙素类似物vhCT的免疫原性研究

本研究用固相多肽合成法合成人降钙素类似物vhCT ,产物纯度达到等电聚焦均一 ,质谱测定分子量精确。生物活性为天然人降钙素的 2 0～ 2 5倍。用放射免疫法测定vhCT能与识别天然人降钙素的抗体起反应 ,产生IgG抗体的免疫原性随偶联的不同载体而有差异。但在BALB/C5 7小鼠体内不引起IgE增高。提示vhCT不产生IgE介导的过敏反应 ,具有药物应用前景。     

成骨生长肽的合成及药效学的实验研究

作者利用固相法合成了成骨生长肽 (ＯＧＰ)。并在体外观察了ＯＧＰ在低剂量范围对原代成骨细胞的促增殖作用 ,以及成骨活性标志蛋白ＡＫＰ的表达水平[1] 。在ＳＤ大鼠体内观察了ＯＧＰ对低钙饮食造成的骨质疏松的药效作用。现报道如下。一、材料和方法1 材料 :(1)试剂 :所有Ｂｏｃ 氨基酸、Ｂｏｃ Ｇｌｙ ＰＡＭ树脂购自美国ＡＢＩ公司 ;Ｅ ＭＥＭ培养基、胰蛋白酶 ＥＤＴＡ(依地酸 ) [0 .5 % (ｗ/ｖ)胰蛋白酶 ,5 .3ｍｍｏｌ/ＬＥＤＴＡ 4Ｎａ]为ＧＩＢＣＯＢＲＬ公司产品 ;Ⅱ型胶原酶为日本和光纯药工业株式会社产品 ;ＭＴＴ为Ｆｌｕｋａ…     

成骨生长肽对不同血清浓度下OPG-/-小鼠骨髓基质细胞增殖和分化作用

 目的 研究合成成骨生长肽（synthetic osteogenic growth peptide,sOGP） 对在不同血清浓度条件下OPG-/-小鼠骨髓基质细胞（bone marrow derived stroma cells,BMSCs）的增殖和分化作用。方法 取OPG-/-小鼠股骨,分离骨髓基质细胞进行体外培养。在各自培养条件下分为实验组（OGP组）、空白对照组（CON组）和阳性对照组（bone morphogenetic protein-2 group,BMP-2组）,倒置相差显微镜下观察细胞形态变化、MTT法测定细胞增殖率、PNPP法测定碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）的表达。结果 OGP在含10%胎牛血清（fetal bovine serum,FBS）的LG-DMEM和矿化液的培养条件下,对OPG-/-小鼠BMSCs 起到增殖作用,在第3、5天均高于CON组和BMP-2组（P<0.05）;OGP组对ALP表达的影响与CON组相似,而与BMP-2组存在较大差异,BMP-2组在所有不同血清浓度条件下的第3、5天ALP活性均高于CON组和OGP组（P<0.05）。结论 OGP组对OPG-/-小鼠BMSCs的增殖作用要求较高血清浓度的体外培养条件,但在ALP的分化活性方面弱于BMP-2组。     

合成成骨生长肽对大鼠骨髓基质干细胞的促成骨作用

目的研究合成成骨生长肽（sOGP）对体外培养的大鼠骨髓基质干细胞（BMSCs）的作用，并与经典的成骨诱导剂地塞米松相对比。方法取大鼠股骨骨髓，贴壁法分离骨髓基质干细胞进行体外培养，加入不同浓度的sOGP，观察细胞形态变化，细胞增殖率，细胞内碱性磷酸酶（ALP）的表达，RT—PCR法检测3种主要成骨标志物（ALP、Ⅰ型胶原、骨钙素）的表达，组织化学染色检测碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原的表达及钙质的沉积并进行图像分析。结果sOGP对BMSCs增殖的影响随浓度不同呈现双向作用。sOGP和地塞米松在mRNA和蛋白水平均能促进各成骨标志物的表达，定量分析结果显示，sOGP在10^-9mol／L浓度组促成骨的作用最强，明显高于对照组和地塞米松组。结论sOGP能明显促进大鼠BMSCs向成骨方向转化。这种促成骨能力与其浓度密切相关，以10^-9mol／L浓度下促成骨能力最强。     

胃动素受体多克隆抗体的制备及其受体在人胃的表达

目的制备胃动素受体多克隆抗体和研究该受体在人胃中的组织定位。方法通过合成肽耦联钥孔戚血蓝蛋白(keyholelimpethemocyanin,KLH)制备抗体,以ELISA方法测定效价。用含有GPR38基因(胃动素受体)的质粒转染293细胞株,以RT-PCR方法鉴定。Westernblot和免疫组织化学法检测转染的293细胞和组织中胃动素受体的表达。结果制备的兔抗人的多抗效价达1∶500000,有较好的特异性。成功转染293细胞,该细胞能够瞬时表达胃动素受体,而该受体在人胃窦胃体的黏膜腺上皮中表达。结论应用合成肽-KLH成功地制备了胃动素受体的兔抗人多克隆抗体,用该抗体检测到人胃窦胃体黏膜上皮细胞存在胃动素受体的表达。