鸡卵黄抗体的制备以及金磁微粒为载体去除人血浆部分高丰度蛋白的研究

目的:以人血浆白蛋白(HSA)和IgG为免疫原,制备特异性鸡卵黄抗体IgY(Egg yolk immunoglobulin),并将其固定于金磁微粒表面,用于HSA和IgG的去除研究.方法:用HSA、IgG以及混合成分分别作免疫原免疫Roman母鸡.制备抗HSA和IgG鸡卵黄抗体IgY,并对IgY的分离提取条件进行优化.SDS-PAGE和间接ELISA检测IgY的纯度和效价.将高效价IgY固定于金磁颗粒表面进行血浆高丰度蛋白去除研究.结果:免疫后60～120 d内,鸡血清抗体效价可达1∶15 000～1∶25 000;收获鸡蛋,提取得到的卵黄抗体IgY效价可达1∶10000～1∶25000,纯度98%以上;采用金磁微粒载体固定IgY,可对血浆中的HSA,IgG进行特异性的去除.结论:人血浆中的高丰度蛋白成分HSA和IgG免疫产蛋母鸡后,可从鸡卵黄中分离提取到高效价、高纯度的卵黄抗体IgY;IgY偶联于金磁微粒表面可特异性的去除人血浆中的HSA和IgG,作为血浆蛋白质组学研究的一种新方法,有较好的应用前景.     

扩增阻滞突变系统用于ABO血型基因分型研究

目的建立一种快速、低成本的ABO血型基因分型方法。方法设计6对引物,建立扩增阻滞突变系统(ARMS),对30例中国汉族无关个体外周血样本的ABO基因型进行鉴定,并与血清学方法和直接测序结果进行比较。结果 ARMS技术检测30例样本结果同血清学方法、直接测序结果吻合率达到100%。结论该研究建立的ABO血型基因型鉴定方法可快速检测出28种ABO基因型,具有一定的临床应用价值。     

做好学校卫生工作 增强学生保健意识

开展学校卫生工作,向学生传授卫生保健知识,增强学生的保健意识,全面提高学生的综合素质,使学生成长为身体健康、心理素质健全的合格人才。     

基于金磁微粒标记技术的可目视化蛋白质芯片检测方法的建立

目的：应用金磁微粒标记蛋白质技术,建立可目视化蛋白质芯片检测体系,比较金磁微粒和胶体金标记蛋白质技术应用于蛋白质芯片检测效果的优劣。方法：将人IgG点制于环氧基修饰的玻片上,分别与金磁微粒和胶体金标记的羊抗人IgG温育,银染显色,肉眼观察并用普通扫描仪记录结果。结果：基于金磁微粒的蛋白质芯片人IgG最佳点样浓度为0．2mg／ml,37℃温育2h,银染10～15min,检测结果信噪比高;基于胶体金的蛋白质芯片人IgG最佳点样浓度为0．1mg／ml,37℃温育1h,银染15～20min．检测结果信噪比高。结论：金磁微粒标记蛋白质技术应用于蛋白质芯片的检测,具有和胶体金一致的可目视化检测效果。且其标记技术简单,标记的蛋白质可定量。     

Times管理方案在心内科护士多参数心电监护仪警报疲劳中的应用

探讨Times管理方案在心内科护士多参数心电监护仪警报疲劳中的应用效果，以提高护士临床警报知识水平，改善警报管理态度和行为，减轻护士的警报疲劳，降低心电监护仪错误警报发生率。     

颜面皮疹，四肢肌力减退，盆腔肿块─—查房选录（152）

颜面皮疹，四肢肌力减退，盆腔肿块─—查房选录（１５２）南通医学院附属医院肾内科崔亚丽，范亚平，支剑笙，蒋季杰病历摘要患者女，５９岁，农民。因颜面皮疹、四肢肌无力５个月，咳嗽、咳痰１０天于１９９３年６月３日入院。患者于５个月前开始出现双上肢上举无力，继...     

clpE缺陷对肺炎球菌蛋白表达的影响

目的 了解ClpE对肺炎球菌蛋白表达的影响.方法 用长臂同源多聚酶链式反应(LFH-PCR)方法失活clpE基因,用PCR、测序鉴定缺陷菌株;通过固相pH梯度双向凝胶电泳(2D-PAGE)分别分离野生菌和clpE缺陷菌的总蛋白质;经凝胶银染色、PDQuest 2DE软件分析获得 2个菌株的蛋白质表达谱;选取差异蛋白质点进行MEDLI-TOF质谱分析,查询数据库,获取有意义的蛋白点.结果 以肺炎链球菌D39的图谱为参考,△clpE与其匹配率为61%.挑选17个有明显差异表达的蛋白点进行MALDI-TOF-MS分析,获得了17张肽质量指纹图,经数据库查询后,4个蛋白点获得了有意义的结果,分别为:次黄嘌呤鸟嘌呤核糖核酸转移酶(hypoxanthine-guanine phosphoribosyltransferase),吡咯烷羧酸肽酶(pyrrolidone-carboxylate peptidasel),甲酸四氢叶酸连接酶(formate-tetrahydrofolate ligase)和双功能蛋白pyrR (bifunctional protein pyrR).结论 野生菌表达蛋白的种类和数量均高于突变菌株,提示clpE可通过影响某些特殊蛋白质的表达,帮助细菌适应宿主的不同环境,使宿主致病.

Abstract：

Objective To investigate the effect of ClpE on the protein expression profiles of Streptococcus pneumoniae.Methods clpE-deficient Streptococcus pneumoniae strain was constructed by long flanking homology-polymerase chain reaction (LFH-PCR) and identified by PCR and sequencing. The total bacterial proteins were analyzed by two-dimensional gel electrophoresis and imaging analysis, and the differentially expressed protein spots were excised by dot-gel digestion with trypsin. Peptide mass fingerprinting (PMF) was obtained by analysis of the fragment length by matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF-MS). The PMF was analyzed using software to identify the proteins. Results The number of matched protein spots of the two gels was 61%. By sequence database searching, 4 out of the 17 differential protein spots were identified, namely hypoxanthine-guanine, pyrrolidone-carboxylate peptidasel,formate-tetrahydrofolate ligase, and bifunctional protein pyrR. Conclusion clpE gene-deficient Streptococcus pneumoniae expresses fewer kinds of proteins at also lower levels than the wild-type bacteria, suggesting that ClpE allows the bacteria to adapt to different host environments by inducing the expression of special proteins.     

葡聚糖磁性载体在大鼠腹部皮瓣中的靶向性研究

目的：探索外磁场作用下葡聚糖和交联葡聚糖磁性载体在大鼠腹部皮瓣的靶向性,为磁性药物防治同种异体大鼠腹部皮瓣移植后免疫排斥作用做准备。方法：取雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠35只,体重250～350g,随机分为以下7组：①交联葡聚糖磁性载体局部输注,2400GS磁场作用1h组（n=5,此组为标准对照组）;②葡聚糖磁性载体局部输注,2400GS磁场作用1h组（n=5）;③交联葡聚糖磁性载体全身输注,2400GS磁场作用1h组（n=5）;④交联葡聚糖磁性载体局部输注,0GS磁场作用1h组（n=5）;⑤交联葡聚糖磁性载体局部输注,6000GS磁场作用1h组（n=5）;⑥交联葡聚糖磁性载体局部输注,2400GS磁场作用3h组（n=5）;⑦空白对照组（n=5）。取大鼠腹部皮瓣,用原子发射光谱法测定皮瓣内铁元素浓度,间接反映磁性载体在组织中的分布。结果：⑴两种磁性载体比较（第①组与第②组）,在大鼠腹部皮瓣内,交联葡聚糖磁性载体组铁元素浓度245.2±6.84μg/g高于葡聚糖磁粒组168.8±8.70μg/g,P〈0.05。⑵两种输注途径比较（第①组与第③组）,在大鼠腹部皮瓣内,局部输注组铁元素浓度245.2±6.84μg/g高于全身输注组215.2±8.79μg/g,P〈0.05。⑶不同外界磁场强度比较（第①组与第④、⑤组）,在大鼠腹部皮瓣内,6000GS组铁元素浓度388.4±10.99μg/g高于2400GS组245.2±6.84μg/g,P〈0.05,后者又高于0GS组127.8±5.54μg/g,P〈0.05。⑷不同外界磁场作用时间比较（第①组与第⑥组）,在大鼠腹部皮瓣内,3h组铁元素浓度414.4±13.07μg/g高于1h组245.2±6.84μg/g,P〈0.05。结论：在外界磁场作用下,葡聚糖磁性载体可以在大鼠腹部皮瓣内靶向聚集,并且其浓度与磁性载体的性质和输注方式有关,与外界磁场强度及其作用时间呈正相关。     

Studies on the Phase Equilibrium of the System C_6H_(12)O_6-(NH_4)_2SO_4-C_2H_5OH-H_2O(C_2H_5OH/H_2O=0.90 by wt)at 35℃

本文报道了Ｃ６Ｈ１２Ｏ６（ＮＨ４）２ＳＯ４Ｃ２Ｈ５ＯＨＨ２Ｏ（Ｃ２Ｈ５ＯＨ／Ｈ２Ｏ＝０．９０）体系在３５℃时体系溶解度和饱和溶液的折光指数，并绘出了体系相应的溶度图和饱和溶液的折光指数曲线图。结果表明：所研究的体系为四元体系Ｃ６Ｈ１２Ｏ６（ＮＨ４）２ＳＯ４Ｃ２Ｈ５ＯＨＨ２Ｏ中的一部分。当溶液中肌醇饱和时，溶度曲线落在约５０％的等醇水比面上。当（ＮＨ４）２ＳＯ４在溶液中达到饱和时，出现共饱点。其组成为（ＮＨ４）２ＳＯ４：２１０％，Ｃ６Ｈ１２Ｏ６：２．０８％，Ｃ２Ｈ５ＯＨ：４４７５％。同时出现分层，在富醇相随着乙醇浓度的增加，出现肌醇与硫酸铵共饱线。在富水相硫酸铵饱和溶度曲线落在约５％乙醇的等醇水比面上，折光指数曲线由三支组成，其中两条分别与Ｃ６Ｈ１２Ｏ６·Ｈ２Ｏ和（ＮＨ４）２ＳＯ４相对应，另外一条线与（ＮＨ４）２ＳＯ４和Ｃ６Ｈ１２Ｏ６·Ｈ２Ｏ的共饱线相对应