焦磷酸测序法检测ALDH2*2和MTHFR 677基因多态性的性能验证

目的对实验室自建焦磷酸测序法检测乙醛脱氢酶2(ALDH2)*2和亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)677基因多态性的方法进行性能评价。方法对不同浓度(10.0、2.0、0.4、0.0ng/μL)的杂合型DNA标本进行检测,评价方法的检出限;采用经焦磷酸测序法验证的DNA标本的PCR产物各20例,与Sanger测序法进行比较,评价方法的准确度;对3种(野生、杂合和突变型)基因型标本重复检测4次,评价方法的重复性。结果焦磷酸测序法检测ALDH2*2和MTHFR 677多态性的检出限为2ng/μL基因组DNA;焦磷酸测序法的分型结果与Sanger测序法一致,准确度为100%;批内重复4次检测结果完全一致。结论焦磷酸测序法检测ALDH2*2和MTHFR 677基因多态性稳定可靠,满足江苏省临床检验中心的要求,可用于临床检测。     

大剂量甲氨蝶呤化疗后消除延迟的影响因素和发生机制的研究进展

大剂量甲氨蝶呤（high-dose methotrexate,HD-MTX）化疗后可能出现消除延迟,并造成骨髓抑制、黏膜损伤、肝肾功能损害等严重不良反应。如何减少消除延迟的发生,并通过预防和解救措施,将患者的身体损害减至最小是HD-MTX化疗的关键问题之一。本文总结文献并结合临床实际,从患者生理状态、药物代谢酶、转运体、药物相互作用等方面,探讨HD-MTX化疗后消除延迟的发生机制和解救方法。     

焦磷酸测序法在幽门螺杆菌克拉霉素耐药基因检测及药物疗效评价中的应用

目的本研究建立了幽门螺杆菌(Hp)克拉霉素耐药基因检测的焦磷酸测序方法,在获知耐药情况的同时根据半定量结果初步评估治疗效果。方法通过考察最合适的扩增引物、体系、退火温度建立最优的PCR扩增体系。分别对方法的灵敏度,特异性及一致性进行了评价。通过对44例临床标本的检测,比较本方法与快速尿素酶试验和13 C呼气试验的检出率。结果最优的PCR扩增体系为HiFi体系,最佳退火温度为59.8℃。本方法特异性良好,灵敏度达到100 copies/μL,与Sanger测序结果100.0%一致。36例标本快速尿素酶和焦测序法的检出率分别为48.7%和81.1%,耐药率为10.81%。8例标本13 C呼气试验和焦测序法的检出率分别为75.0%和87.5%,阳性标本检出一致率为100.0%。结论焦测序检测方法具备灵敏度高、快速、半定量的特点,为临床Hp克拉霉素耐药检测及初步疗效评价提供了一种新的方法。     

MTHFR基因多态性对骨肉瘤患者首次应用大剂量甲氨蝶呤后不良反应的影响

目的 探讨MTHFR基因多态性对骨肉瘤患者首次应用大剂量甲氨蝶呤（HD-MTX）后不良反应的影响。方法 采用前瞻性研究方法。选择东部战区总医院53例首次入院进行HD-MTX治疗的骨肉瘤患者,根据其人口学因素及MTHFR基因中rs1801133位点的基因多态性确定HD-MTX给药剂量并进行全程化药学监护,收集第1个化疗周期后该药的肝、肾、血液毒性和胃肠道反应数据。采用单因素分析和二元Logistic回归分析对MTX给药剂量、24 h血药浓度、rs1801133位点基因型与上述4种不良反应之间的相关性进行分析。结果 CC野生型患者的MTX给药剂量显著高于TT突变型患者（7.97 g/m2 vs. 6.98 g/m2,P=0.030）,但这种差异不影响MTX的0 h和24 h血药浓度。上述4种不良反应与MTX的给药剂量无相关性。二元Logistic回归分析结果显示,每携带一个T等位基因,患者发生血液学毒性的风险会升高4.13倍（95%置信区间为1.35～12.62,P=0.013）。当MTX 24 h血药浓度阈值设定为2.65μmol/L时,肝功能损害预测的灵敏度为53.33%,特异性为86...     

HPV流行病学数据对三种HPV疫苗有效性的初步预测

目的 本研究分析了江苏南京地区门诊和宫颈癌患者HPV感染率及亚型分布情况,评估二价、四价、九价3种HPV疫苗对本地区人群的保护作用,为疫苗的选择提供依据。方法 回顾性地分析2014年至2018年该院妇科门诊进行HPV分型检测的36280例患者和首次入院病理确诊为宫颈癌进行HPV分型检测的69例患者的感染情况。结果 门诊患者感染率为30.3%,其中82.3%为高危型感染。感染率排名前3的亚型分别为52(18%)、16(13.9%)、58(9%)型。宫颈癌患者感染率为81.2%,其中91.5%为高危型感染,主要为16、18、58、31型。门诊患者感染率在＜20岁组和＞60岁组呈现双峰分布的趋势。二价、四价、九价疫苗对门诊患者的保护率分别为17%、20%和54%,对宫颈癌患者的保护率分别为67%、67%和85%。结论 二价和四价疫苗对门诊和宫颈癌患者的保护率相近。九价疫苗因为增加了更多的抗原种类,保护率更高,使门诊患者受益更多。