有机氮源对红霉素发酵影响的具体分析

红色糖多孢菌的摇瓶培养基中使用不同有机氮源时红霉素的效价明显不同。通过对不同有机氮源所含营养成分的逐步回归分析,我们得到有机氮源中的苏氨酸为影响红霉素效价的主要因子。最后向对照培养基中添加苏氨酸,则使红霉素的效价比对照培养基提高了22.85%。     

两阶段控制甘油浓度提高1,3-丙二醇发酵水平

克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)分批发酵生产1,3-丙二醇(1,3-PD),根据菌体生长、产物生成和补料可将发酵过程分成4个阶段.不同阶段控制不同的底物浓度会对菌体生长和产物生成产生不同的影响.研究发现,菌体生长阶段(阶段Ⅱ)底物浓度控制在6.0 g/L最适合菌体生长,产物主要生成阶段(阶段Ⅲ)底物浓度控制在18.9 g/L最适合产物生成,菌浓可达7.83 g/L,最终1,3-PD的浓度为68.5 g/L,摩尔转化率为61%,生产强度为2.21 g/(L·h).     

克雷伯氏肺炎杆菌生产1,3-丙二醇代谢途径中的酶活变化

考察了不同条件下克雷伯氏肺炎杆菌(Klebsiella.pneumoniae)合成1,3-丙二醇(1,3-PD)的3种关键酶(甘油脱氢酶(GDH)、1,3-PD氧化还原酶(PDOR)及甘油脱水酶(GDHz))的表观酶活变化。结果显示:这3种酶的酶活变化与Klebsiella.pneumoniae的1,3-PD代谢不完全相关。用SDS-PAGE电泳分析上述不同发酵条件下酶活变化,结果显示不同于3种酶的蛋白条带,Mr约为4.0×104位置的蛋白条带有明显的变化,这可能与菌体代谢过程相关,结论有待进一步深入研究。     

S-腺苷甲硫氨酸合成酶的可溶性表达

系统考察了pET可溶性表达系统对酵母来源的S腺苷甲硫氨酸(SAM)合成酶基因的表达情况,结果显示：当采用含Nus·Tag融合标签的pET44a为载体,trxB和gor双突变的Origami为宿主时最适合目的蛋白的可溶性表达。进一步考察不同来源（大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌）SAM合成酶的可溶性时,也得到了相似的结论;比较发现酵母来源的SAM合成酶可溶性表达的比活力最高达60.9 U/mg。     

豆油对红霉素生物合成的影响及作用机制分析

在摇瓶培养过程中，培养基中加入豆油可使红霉素的效价从3038U／mL(不加豆油)提高到5221U／mL。但对丙酰辅酶A合成酶及红霉素链霉菌H18丙酸激酶的比活力无显著影响。使用HPLC检测发酵液中α-酮戊二酸(α—KG)的含量，结果发现加豆油后α—KG含量有明显提高。据此推测了豆油经过红霉素链霉菌H18代谢后进入红霉素合成的可能途径是：通过三羧酸循环代谢产生琥珀酰辅酶A，琥珀酰辅酶A异构化产生2一甲基丙二酰辅酶A，2-甲基丙二酰辅酶A作为红霉素的前体最终促进红霉素的合成。     

聚类分析在红霉素摇瓶培养基无机盐分析中的应用

红色糖多孢菌的摇瓶培养基中使用不同有机氮源时红霉素的效价明显不同。通过对培养基中不同有机氮源所含无机盐的聚类分析。发现无机磷为影响红霉素效价的主要因素。培养基中无机磷含量高了会显著抑制红霉素的生物合成。     

以脂肪酶活为指标快速筛选红霉素摇瓶发酵培养基

筛选红霉素链霉菌的摇瓶培养基需要将红霉素链霉菌在摇瓶中培养 6 d,然后测定红霉素链霉菌的效价 ,使用该方法需要至少 6 d的时间。而测定红霉素链霉菌在摇瓶中 d1脂肪酶的活力 ,并与对照样品比较 ,则只使用 1d的时间就能够推测红霉素链霉菌在 6 d后的效价 ,使用这一新方法 ,我们快速筛选出红霉素链霉菌 d1的酶活力比对照培养基高的两组新培养基 ,并且确认了新培养基中 6 d后的最高效价为 9313μg/ ml,比对照培养基提高了 78.38%。     

溶氧控制和pH控制在赖氨酸分批发酵过程中的应用

研究了溶氧和ｐＨ值对赖氨酸产生菌ＦＢ４２发酵的影响，结合发酵过程的动力学分析，得出了分批发酵操作的溶氧和ｐＨ控制模式。结果表明两种控制都使发酵水平得到提高，但以溶氧控制更有效，在溶氧控制模式下，发酵的转化率从３３．６％提高到３８．１％。