毛细管区带电泳法测定艾塞那肽纯度及在稳定性研究中的应用

目的:建立毛细管区带电泳(CZE)方法测定艾塞那肽纯度,并初步考察其稳定性。方法:采用未涂层熔融石英毛细管(48.5 cm×50μm,有效长度40 cm),考察了运行缓冲液p H及浓度、分离电压、温度、添加剂乙腈浓度对分离效果的影响,最终确立电泳条件:运行缓冲液为200 mmol·L-1磷酸二氢钠-磷酸氢二钠溶液(p H 6.2;含15%乙腈),分离电压为20 k V,温度25℃,检测波长214 nm,压力进样5 k Pa×10 s。结果:艾塞那肽质量浓度在0.05~4.0 mg·m L-1(r=0.999 9)范围内线性关系良好;检测限为3.3μg·m L-1,定量限为8.0μg·m L-1;主峰迁移时间的日内和日间RSD分别为1.07%(n=6)和0.91%(n=9),纯度的日内和日间RSD分别为0.08%(n=6)和0.10%(n=9)。该方法与HPLC法比较,纯度测定结果基本一致,本法分离效果更好,分析时间缩短,能有效检查艾塞那肽的纯度。结论:该方法可用于艾塞那肽的质量控制和稳定性研究。     

毛细管区带电泳方法评价曲妥珠单抗类似物的电荷异质性北大核心CSCD

目的:建立毛细管区带电泳(CZE)方法用于评价曲妥珠单抗类似物的电荷异质性。方法:实验中选用甲基纤维素(MC)和尿素作为缓冲液添加剂以改善曲妥珠单抗类似物电荷变体间的分离;0.1 mol·L-1盐酸溶液与0.1 mol·L-1氢氧化钠溶液前处理冲洗以有效减少单抗吸附。本文考察了运行缓冲液pH及浓度、分离电压、温度、添加剂对主峰与酸、碱变体峰分离度的影响。优化电泳条件为:5 kPa进样10 s,分离温度为15℃,分离电压为20 kV,运行缓冲液为600 mmol·L-1ε-氨基己酸(EACA)pH 5.4,包含0.1%MC和4 mol·L-1尿素溶液。结果:在优化的实验条件下,曲妥珠单抗类似物与其电荷变体能够得到较好分离,并且主成分的相对百分含量与迁移时间的日内精密度均小于2%。结论:本方法操作简单,分离度良好,成本较低,可以满足曲妥珠单抗类似物电荷异质性的分析要求。