罗格双胍对2型糖尿病大鼠的降糖作用及机制研究

目的 探讨罗格双胍(RZM)对链脲佐菌素(STZ)诱导的2型糖尿病大鼠的降糖作用及降糖机制。方法 高脂高糖饲料喂养加一次性腹腔注射35 mg·kg^-1链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型。普通饲料喂养大鼠作为正常组(生理盐水),建模成功的糖尿病大鼠分为模型组(生理盐水)、对照组(罗格列酮0.8 mg·kg^-1+二甲双胍0.4 mg·kg^-1)、RZM低剂量组(0.4 mg·kg^-1)和RZM高剂量组(1.2 mg·kg^-1),每组5只,灌胃给药,每天1次,连续给药6周。检测大鼠空腹血糖(FBG)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL)和糖化血红蛋白(HbA1c)。检测肝和肾组织重量,计算肝指数和肾指数。以蛋白质印迹法检测肝和胰腺组织中AMPK、p-AMPK及TXNIP蛋白表达,以实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测肝和胰腺组织中的TXNIP mRNA表达,以苏木精-伊红(HE)染色观察肝组织病理学改变,以酶联免疫吸附(ELISA)法检测肝糖原和胰腺胰岛素含量。结果...     

法舒地尔对人骨髓间充质干细胞向表皮细胞分化的影响

 目的探讨HA-1077(fasudil,法舒地尔)对人骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为表皮细胞的影响.方法采用直接贴壁法培养并扩增人胚胎股骨骨髓干细胞,免疫细胞化学及流式细胞仪进行表面标志的检测.设对照组、诱导组、HA-1077诱导组1、HA-1077诱导组2,采用免疫细胞化学及流式细胞仪对各组细胞角质蛋白表达变化进行检测,观察其对MSCs分化为表皮细胞的影响.结果采用直接贴壁法可以获得大量高纯度的人骨髓MSCs,分组培养后第2天开始出现少量细胞角质蛋白阳性表达细胞,随着时间延长,阳性率逐渐提高.7天后流式细胞仪显示单纯诱导组及HA-1077诱导组CK5/8、CK10/13、CK19阳性率均远高于诱导组(P＜0.01).结论HA-1077可能通过抑制Rho-ROCK途径的激活从而促进MSCs体外培养中角蛋白表达的显著提升,Rho-ROCK途径可能在促进MSCs分化为表皮细胞过程中起着重要调控作用.     

屎肠球菌致败血症并发心内膜炎1例

1　病历报告患者 ,男 ,4 5岁。因持续咽痛伴畏寒、发热 6d ,于 2 0 0 3年2月 17日以发热待查入院。起病前有腹泻病史。入院时查体 :T 39℃ ,P 90 /min ,R 2 5 /min ,BP 10 5 /6 7mmHg。消瘦 ,神志清 ,急性病容 ,平卧 ,自主体位。浅表淋巴结未触及 ,右侧下睑结膜外眦处可见出血点。咽稍红 ,双侧扁桃体一度肿大。颈抵抗 (- ) ,心肺体征未见异常。腹平软 ,无压痛反跳痛及肌抵抗。脾脏肋下一横指处触及 ,质中 ,无触痛。肝脏肋下未触及 ,肠鸣音不亢进。四肢关节活动自如 ,肌力正常。神经系统检查正常。实验室及器械检查 :血常规 :WBC 2 .1× …     

耐万古霉素肠球菌检测基因芯片方法的建立和验证

目的：基于基因芯片技术建立一种能快速甄别粪肠球菌、屎肠球菌及万古霉素耐药基因的检测方法。方法根据GenBank中查找的2种常见肠球菌特异性基因序列（ ddl）及万古霉素耐药基因（ vanA,vanB）序列,设计与合成用于检测肠球菌的特异性基因及耐药基因的引物和探针,制备耐万古霉素肠球菌（VRE）检测基因芯片。利用多重不对称PCR法扩增样品中的特异性基因与耐药基因片段,标记产物与基因芯片上的探针杂交,经清洗、化学发光法显色后进行结果分析。在优化的多重PCR体系、杂交反应和化学发光法检测条件下,评价芯片的特异性、灵敏性和重复性。结果共筛选出1对通用引物、4对特异性引物和1条细菌通用探针、4条特异性检测探针。该芯片具有良好的特异性和重复性,灵敏性可达103 CFU／ml。10例临床分离株样本的芯片检测结果与药敏实验基本一致（8／10）。结论初步建立了检测VRE的基因芯片方法,利用此方法可以甄别2种VRE种类并检测其耐药基因。     

天抗(TK)对脂多糖诱导小鼠炎症模型的抗炎作用及其机制

目的研究天抗(TK)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠炎症模型的抗炎作用及机制研究。方法将42只昆明小鼠随机分为正常对照(NC)组、模型对照(LPS)组、地塞米松(DXM)组、天抗低(TK-L)、中(TK-M)和高(TK-H)剂量组(0.2,0.8和3.2 g/kg)。各组分别灌胃给药7 d后,腹腔注射30 mg/kg的LPS诱导小鼠急性炎性模型,6 h后处死小鼠,检测小鼠脾脏指数,ELISA测定小鼠血清中IL-1β、IL-6和TNF-α的表达水平;生化法检测小鼠血清中SOD和MDA的表达;qRT-PCR检测小鼠脾脏TLR4、MyD88、TRAF6、p65、IL-1β、IL-6和TNF-αmRNA的表达水平;Western blot检测小鼠脾脏TLR4、MyD88、TRAF6、p-p65和p65蛋白表达水平。结果与LPS组相比,TK组小鼠的脾脏指数明显降低,血清和脾脏组织中IL-1β、IL-6、TNF-α和MDA水平显著下降,SOD水平明显升高,小鼠脾脏组织的TLR4、MyD88、TRAF6和p-p65等蛋白及mRNA表达水平均明显降低。结论天抗对LPS诱导的小鼠急性炎症模型具有抗炎作用,其作用机制可能是通过TLR4/MyD88/NF-κB(p-65)信号通路抑制炎症因子的释放。     

圣草酚调控MAPK和Nrf2/HO-1信号通路缓解非酒精性脂肪肝的作用及机制

目的 研究圣草酚缓解非酒精性脂肪肝（NAFLD）的作用及可能机制。方法 将16只C57BL/6J小鼠按体重随机分为对照组、NAFLD模型组和圣草酚低、高剂量组（50、100 mg/kg），每组4只。除对照组外，其余各组均使用高脂饲料诱导NAFLD模型。在预处理4周后，采取腹腔注射方式（0.01 mL/g）进行给药，每日1次，连续6周。测定小鼠体重、肝脏质量，观察小鼠肝组织病理损伤情况，测定小鼠血清中天冬氨酸转氨酶（AST）、丙氨酸转氨酶（ALT）和甘油三酯（TG）水平及肝组织中核转录因子红系2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)蛋白表达。使用0.5 mmol/L油酸诱导HepG2细胞建立体外NAFLD模型，实验设置正常对照组、NAFLD模型组和圣草酚低、中、高浓度组（50、100、150μmol/L）；给药组在诱导模型的同时加入圣草酚，培养24 h。观察细胞中脂质沉积情况，检测细胞中TG、丙二醛（MDA）、活性氧（ROS）水平以及丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路相关蛋白[细胞外信号调节激酶（ERK）、c-Jun氨基末端激酶（JNK）]磷酸化水平和Nrf2、HO-1蛋...