梭曼对体外培养神经细胞的影响

目的　研究梭曼对体培养神经细胞的直接作用 ,为在细胞水平上构建出评价梭曼毒性和抗毒药物救治效果的模型奠定基础。方法　小鼠神经细胞的体外培养方法 ,乙酰胆碱酯酶 (AChE)活性测定法 ,细胞死亡率及LC50 等。结果　梭曼浓度为 0 .96mg·L- 1时 ,对神经细胞的形态变化无明显影响 ,当梭曼浓度增加到 96 0mg·L- 1时 ,神经细胞形态学发生变化 ,表现为突触收缩 ,细胞收缩、变圆、死亡等。梭曼在 2 4h对神经细胞LC50 值为 2 0 .35mg·L- 1。神经细胞培养液中AChE活性随培养时间的延长 ,AChE活性有显著增加的趋势 (P <0 .0 1) ,而梭曼能显著抑制培养液中AChE活性 (P <0 .0 1)。结论梭曼对体外培养的神经细胞AChE活性的影响与整体动物一致 ,提示该细胞可作为快速评价梭曼细胞损伤及抗毒药物筛选的方法之一     

应用SELDI-TOF-MS技术分析SEB染毒小鼠血清蛋白质组学变化

目的:把蛋白质芯片和SELDI质谱技术应用于金黄色葡萄球菌肠毒素B(staphylococcal enterotoxin B,SEB)染毒小鼠血清蛋白质组研究,分析染毒小鼠血清蛋白质组的变化．方法:采用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术和弱阳离子交换蛋白质芯片检测染毒小鼠血清蛋白质的变化,使用PBSⅡ-C 型蛋白质芯片阅读机读取数据,获得的结果采用Ciphergen公司的Biomarker wizard和 Biomarker Patterns System软件进行分析．结果:实验组与对照组血清蛋白质谱相比有 11个蛋白质有显著差异,其中8个蛋白质表达上调,3个表达下调．结论:SEB染毒小鼠血清蛋白质组发生显著变化,可能与SEB的毒理学与病理学作用有密切关系．     

左旋千金藤立定对大鼠血清中催乳素水平的影响(英文)

目的:观察左旋千金藤立定(SPD)对血清催乳素(PRL)水平的影响,研究SPD的药理作用。方法:成熟♀鼠ip多巴胺受体激动剂、拮抗剂或SPD后断头取血,然后用放射免疫法测定血清中的催乳素水平。结果:SPD引起血清PRL水平迅速而显著的增加,效应持续约1h,具有剂量依赖性。SPD的半数有效剂量为3.7mg·kg~(-1)(95％可信限为2.6—4.3mg·kg~(-1))。剂量为20mg·kg~(-1)时产 生最大效应,使血清PRL水平达到448±64μg·L~(-1),0.2mg·kg~(-1)则无效。对于多巴胺受体激动剂培高利特(pergolide)引起的PRL水平低下,SPD5mg·kg~(-1)有部分对抗作用,10mg·kg~(-1)能够完全对抗。结论:SPD是D_2多巴胺受体拮抗剂。     

夹心免疫PCR方法检测蓖麻毒素

目的：建立了双抗夹心免疫PCR的检测技术，检测极微量的抗原，方法：以亲和素作为连接分子连接生物素化抗体和生物素化DNA，应用于免疫PCR中，检测极微量的抗原。结果：建立了双抗夹心免疫PCR的检测技术，检测蓖麻毒素的灵敏度达0．1pg/ml，与夹心ELISA方法比较灵敏度高10^3倍。结论：建立的免疫PCR系统灵敏度高，可用于各种微量抗原的检测。     

重组表达葡萄球菌肠毒素B及其突变体M177的免疫原性

目的 研究重组表达的葡萄球菌肠毒素B（rSEB）及其突变体M177的免疫学活性,探讨rSEB及其突变体M177作为超抗原疫苗的可行性。方法 通过小鼠急性毒性实验、抗原抗体结合实验、主动免疫和被动免疫保护实验来研究rSEB及其突变体M177的免疫学活性。结果 rSEB对BALB/c小鼠的致死作用与野生型SEB的致死作用基本相同,而突变体M177对小鼠的致死作用下降了21倍,M177具有与rSEB和SEB相同的免疫活性。结论 突变体M177有望发展为SEB超抗原疫苗。     

梭曼、沙林对鸭血清丁酰胆碱酯酶的动力学研究

目的从酶反应动力学方面揭示梭曼、沙林对丁酰胆碱酯酶的毒性强弱,比较两者对丁酰胆碱酯酶的抑制强度.方法通过改进的Ellman法验测定了鸭血清丁酰胆碱酯酶的km值,以及梭曼、沙林对该酶抑制反应的解离常数kd、膦酰化常数k2和抑制速率常数ki值.结果虽然梭曼和沙林在可逆的酶-抑制剂反应过程中反应速度相差不大,但梭曼对该酶的亲和力与抑制能力均比沙林强.结论这可能是梭曼毒性大于沙林的一个重要因素.     

二苯氯胂对小白鼠和大鼠的急性毒性研究

目的 评估日本遗弃在华化学武器二苯氯胂(diphenylchlorarsine, DA)对环境和人畜的毒性危害.方法 通过DA对小白鼠灌胃,观察小白鼠的中毒症状,测定DA对小白鼠的LD50值;观察DA对大鼠皮肤和眼睛的刺激作用.结果 DA对小白鼠的LD50为28.07 mg/kg;对大鼠皮肤的最大无作用剂量为8.8 mg/ml(0.44 mg);对眼睛损伤的最大无作用剂量为0.7 mg/ml (0.014 mg).结论 DA可造成小鼠肝、肾、胃和食道器质性的损伤,高浓度的DA可引发大鼠皮肤炎症和眼睛晶状体混浊,严重时引起失明.     

夹心免疫PCR方法检测金葡菌肠毒素B

目的 建立双抗夹心免疫PCR的检测技术，用于检测极微量的抗原。方法 以亲和素作为连接分子，连接生物素化抗体和生物素化DNA，应用于免疫PCR中检测极微量金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)。结果 双抗夹心免疫PCR的检测技术，检测SEB的灵敏度达0．1ng／L，与夹心ELISA方法比较灵敏度高10^3倍。结论 双抗夹心免疫PCR系统灵敏度高，可用于各种微量抗原的检测。     

单克隆抗体亲和层析法纯化SEB及其活性鉴定

目的：采用亲和层析法获取高纯度的金黄色葡萄球菌肠毒素B（Staphylococcal enterotoxin B，SEB），并对其进行活性分析。方法：采用正辛酸沉淀法纯化了一株抗SEB的单克隆抗体（1D2），与CNBr活化的Sepharose4B偶联制成亲和层析柱纯化SEB，并对其超抗原活性和抗原活性进行鉴定。结果：与离子交换纯化法和市售的标准品相比较，亲和层析法纯化的SEB纯度高，纯化的效率为60．71％。同时，纯化后的SEB具有良好的抗原性和超抗原活性。结论：单克隆抗体亲和层析法可以高效率地纯化高纯度的SEB。