通关藤注射液逆转乳腺癌多柔比星耐药的作用机制

目的 探究通关藤注射液（Tongguanteng Injection,TGT）对乳腺癌多柔比星（doxorubicin,DOX）耐药的逆转作用及潜在作用机制。方法 分别用DOX、TGT、DOX＋TGT干预人乳腺癌DOX耐药MCF-7/DOX细胞株,采用CCK-8法、克隆形成实验检测细胞增殖;Combenefit软件定量分析药物联合作用指数;Transwell实验观察细胞迁移能力;TUNEL染色检测细胞凋亡率;利用罗丹明外排实验检测TGT对MCF-7/DOX细胞外排功能的影响;采用生物信息学手段预测TGT逆转乳腺癌DOX耐药的作用机制,并采用Western blotting实验检测TGT对MCF-7/DOX细胞中耐药相关蛋白表达的调控作用。结果 TGT可逆转MCF-7/DOX细胞的耐药性,且能够协同DOX抑制MCF-7/DOX细胞的增殖、迁移,促进细胞凋亡;此外,TGT增加细胞内Rho-123的蓄积（P＜0.001）。TGT成分靶标的基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG）富集分析结果表明其主要参与调控磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B,Akt）、丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase,MAPK）、凋亡等信号通路。GEO数据库筛选得到MCF-7和MCF-7/DOX细胞差异表达基因823个,KEGG富集分析表明乳腺癌DOX耐药主要与PI3K/Akt、Ras相关蛋白1（Ras-proximate-1,Rap1）、凋亡等信号通路相关。TGT联合DOX显著下调MCF-7/DOX细胞中p-PI3K、p-Akt、B细胞淋巴瘤-2（B-cell lymphoma-2,Bcl-2）、三磷酸腺苷结合转运蛋白B1（adenosine triphosphate-binding cassette transporter B1,ABCB1）、ABCG2蛋白表达（P＜0.05、0.01）,且上调Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2 associated X protein,Bax）表达（P＜0.05）。结论 基于生物信息学结合细胞实验验证TGT联合DOX可通过抑制PI3K/Akt介导的凋亡相关信号通路,同时下调ABCB1、ABCG2蛋白表达逆转乳腺癌DOX耐药。为临床TGT与DOX联合用药提供了实验依据,为乳腺癌耐药的治疗提供新的思路。     

当归-川芎药对改善脑缺血再灌注急性损伤的代谢组学机制分析

目的:运用代谢组学方法探究当归-川芎药对抗脑缺血再灌注急性损伤的可能机制。方法:60只雌性SD大鼠随机分成6组,每组10只。DG、CX和GX组按5倍临床剂量给药当归、川芎、当归-川芎药对;NM组按照20 mg/(kg·d)灌胃尼莫地平片混悬液;假手术组和模型组大鼠灌胃等体积生理盐水;连续灌胃7 d。除假手术组,其他5组于第7天采用线栓法制备大脑中动脉栓塞/再灌注(MCAO/R)损伤大鼠模型。再灌注24 h后,采集血清和脑组织标本,采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-QTOF/MS)技术进行非靶向代谢组学检测,利用非监督主成分分析(PCA)、有监督型偏最小二乘-判别分析(PLS-DA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)筛选差异代谢物,并进行代谢通路注释。结果:假手术组和模型组血清和脑组织代谢轮廓存在明显差异(P<0.05),共筛选出与MCAO/R相关的嘌呤类、磷脂类、脂肪酸类等19个潜在生物标志物,其中血清生物标志物5个,脑组织生物标志物14个。与当归-川芎药对治疗MCAO/R损伤密切相关的生物标志物有11个,主要与抗坏血酸与醛酸代谢、烟酸和烟酰胺代谢、甘油...     

甘草干姜汤古今组方用药规律分析

目的 对甘草干姜汤在古代中医典籍和现代中医临床处方中的组方用药配伍规律进行分析并比较其异同。方法 分别从《中医方剂大辞典》和河南中医药大学第一附属医院 2017—2019 年医生开具的住院处方中,筛选含有甘草-干姜、炙甘草-干姜、甘草-炮姜或炙甘草-炮姜药对的所有方剂,组方统一标准化后,运用 SPSS v18.0 和 Cytoscape 等软件,对提取的数据进行用药频次、剂量、配伍比例、疾病科属等统计和比较分析。结果 分别从《中医方剂大辞典》和临床处方中筛选出2743 首和 24354 首符合要求的组方,其中含炙甘草-干姜的方剂出现频次最多,分别占比 59.8% 和 48.0%;且在筛选所得的组方中,以 1∶1 配比出现的频次最高。《中医方剂大辞典》中含有甘草-干姜、炙甘草-干姜所治疾病科属以脾胃病为主,甘草-炮姜和炙甘草-炮姜所治疾病科属以妇科病为主;现代中医临床处方中,甘草-干姜、甘草-炮姜和炙甘草-干姜所治疾病科属以脾胃肝胆科为主,炙甘草-炮姜所治疾病科属以产科为主。结论 甘草干姜汤古今应用以炙甘草-干姜 1∶1 配比最为常用,所治疾病以脾胃病为主,为该药对的现代临床应用及科学研究的开展提供依据。     

丹参配方颗粒实行国家标准前后样品多成分UPLC含量测定及比较分析

目的 对中药配方颗粒施行国家标准前后多厂家、多批次丹参配方颗粒（Danshen Formula Granules,DFG）进行多成分含量测定和比较分析。方法 收集DFG实行国家标准前4个厂家31批样品和实行国家标准后3个厂家19批样品，采用UPLC法对DFG实行国家标准前、后不同厂家、不同批次样品中丹参素、原儿茶醛、咖啡酸、丹酚酸D、丹酚酸E、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、丹酚酸A和丹参酮IIA共10个成分进行含量测定和比较分析。结果 DFG中10种成分线性关系良好（r≥0.999 2），平均加样回收率为92.64%～103.28%,RSD为0.66%～2.60%。DFG施行国家标准前4个厂家样品中10种成分含量均存在显著性差异，而实行国家标准后样品中仅丹参素、丹酚酸A和丹参酮IIA在个别厂家间存在显著性差异。同一厂家DFG中10种成分在实行国家标准后样品中含量普遍高于实行国家标准前样品中成分含量，且有的厂家中成分含量差异倍数在2倍甚至3倍及以上。结论 该方法稳定可行，可用于DFG的质量控制；实行国标后的DFG质量优于实行国标前样品；且不同厂家DFG中丹酚酸B的含量均符合最新国家药品标准...