四川省9所医院2651株老年患者肺炎克雷伯菌的耐药率分析

目的了解四川省老年患者肺炎克雷伯菌(Klebsiella Pneumoniae,KPN)临床分离菌的检出率和耐药率,为有针对性地对该人群临床合理用药提供科学依据。方法对2015年1月-2017年1月四川省9所三级医院患者的细菌监测数据进行回顾性分析,所有药敏试验参照CLSI2016版纸片扩散法并测定药物MIC值,数据采用WHONET5.6软件统计和χ2检验分析,重点分析老年患者中检出的KPN的耐药率。结果共分离出细菌42 483株,其中KPN检出率为11.38%(4 836/42 483);老年患者中共分离出19 303株细菌,其中检出KPN 2 651株,高于非老年患者(χ2=54.89,P0.001);老年患者中KPN的耐药率排前3位的抗菌素与非老年患者组间比较:对头孢唑林、氨苄西林/舒巴坦相对耐药率较高(χ2值分别为51.05、9.73,P均0.001),对头孢曲松/头孢噻肟耐药率较低(χ2=260.46,P0.001);亚胺培南敏感率相对为低(χ2=26.93,P0.001),阿米卡星、头孢替坦敏感率无统计学差异(χ2=3.84、1.20,P均0.05)。结论四川省9所三级医院KPN检出率低于全国水平,但在老年患者中高于同期非老年患者,在耐药方面也有自身特性。     

虫卵阴性-肠镜检出的一例钩虫病致贫血分析

目的:加深对钩虫病的认识,以降低漏诊及误诊率。方法:回顾分析乐山市人民医院消化内科的一例钩虫病致中度贫血的临床资料。结果:患者老年女性,职业为农民,因"反复心累、头昏3年,加重1月"入院,曾于当地医院治疗,当地诊断为消化道出血、重度贫血,但一直未明确贫血原因,我院入院诊断为贫血待诊,查大便常规虫卵阴性,电子胃十二指肠镜未见明显异常,结肠镜于回肠末端-回盲部见数条寄生虫,修正诊断为钩虫病致缺铁性贫血,予以输血、补铁、驱虫治疗,病情好转后出院。结论:寄生虫所致的贫血在临床表现上无特异性,对于可疑病例,应多次留取粪便送检,检验人员应采用粪便饱和盐水浮聚法以提高虫卵检出率,对于虫卵阴性的患者胃肠镜检查时需耐心仔细探查虫体。     

利用CRISPR/Cas9系统检测同源片段长度对重组效率的影响

目的：在大肠埃希菌中利用CRISPR/Cas9系统对插入失活的mCherry红色荧光报告基因进行靶向切割并重组,以研究同源片段长度对重组修复效率的影响。方法：通过Golden Gate克隆方法构建Cas9表达质粒pKD46-Cas,转化至大肠埃希菌DH5α中,阿拉伯糖诱导表达Cas9蛋白,Western blot检测蛋白表达。用同样的方法,将一段随机靶标序列引入pTac-mCherry-3guid质粒中,造成插入失活,同时在插入序列两侧分别预留0、40、80、120 bp的mCherry编码区overlap序列,构建出含不同长度同源片段的插入失活mCherry荧光报告质粒pQ0、pQ40、pQ80、pQ120,并将其分别转化到表达Cas9蛋白的大肠埃希菌DH5α中,对应的细菌平板分别为pQ0组、pQ40组、pQ80组及pQ120组,每组各9个平板,对每个平板的红、白色菌落进行计数,分别计算出红色菌落数/菌落总数的比值,即为重组修复效率。结果：PCR及测序证实pKD46-Cas质粒及插入失活的mCherry荧光报告载体pQ0、pQ40、pQ80、pQ120构建成功,Western blot鉴定pKD46-Cas在大肠埃希菌DH5α中表达Cas9蛋白;红色菌落计数显示pQ0组为0,其余3组均出现红色菌落,4组重组修复效率的差异有统计学意义（P<0.05）,重组修复效率与同源片段长度呈正相关（r=0.792,P<0.01）。结论：成功建立了基于mCherry红色荧光报告基因和Cas9的同源重组效率检测系统;研究表明不包含同源片段的质粒无法进行有效的重组,当同源片段在0~120 bp时其长度对重组效率有影响。此系统为深入研究原核生物的同源重组提供了一个新的技术平台。     

1例盖尔森基兴诺卡菌血流感染病原学诊断报告

目的 加强对诺卡菌病的认识,以提升其临床诊疗水平。方法 回顾分析乐山市人民医院肾病内科的1例盖尔森基兴诺卡菌血流感染的临床资料,包括临床表现、实验室检查、影像学检查、诊疗情况等。结果 此病人的临床表现及影像学检查缺乏特异性,检验人员镜检发现其革兰氏染色涂片结果为革兰阳性、分枝状长杆菌,细菌的16S rRNA测序分析证实为盖尔森基兴诺卡菌。结论 诺卡菌病多发生于机体免疫受损及合并慢性基础疾病的人群,临床表现和影像学缺乏特异性,诊断需依赖于病原学检查,合格标本的采集和革兰氏染色对诺卡菌病是早期诊断及正确治疗的重要步骤。     

乐山市不同年龄段女性泌尿生殖道支原体检出情况及耐药性分析

目的 分析四川省乐山市不同年龄段女性患者泌尿生殖道支原体检出情况及其对抗菌药物的耐药性,为该地区女性泌尿生殖道支原体感染的诊断和治疗提供依据。方法 回顾性分析2020年9月—2022年10月四川省乐山人民医院妇科和皮肤科诊治疑似为女性泌尿生殖道感染的1064例标本的支原体培养和药敏结果。结果 1064例标本中支原体培养阳性率为53.75%(572/1 064),主要集中在21～30岁及31～40岁两个年龄段,分别占20.21%(215/1 064)和17.48%(186/1 064),各年龄阶段的阳性检出率有统计学意义(P<0.01)。在阳性检出例数中,单纯解脲脲原体(Uu)阳性检出率44.36%(472/1 064),单纯人型支原体(Mh)阳性检出率0.56%(6/1 064),Uu和Mh混合检出率为8.83%(94/1 064)。单纯Uu对交沙霉素、多西环素、米诺环素和四环素敏感率达到94.07%以上,对氧氟沙星、环丙沙星、左氧氟沙星和司帕沙星敏感率低于12.92%;单纯Mh对多西环素、米诺环素、交沙霉素和四环素敏感率均达到100.0%,对其余药物敏感率低于33.33%;Uu...     

机能学科综合实验室的改革与建设

本就我校机能学科综合实验室顺利通过省高校基础实验室的评估，所进行改革与建设的经验，介绍给大家以供探讨。     

滇东南26种中草药体外抗菌活性研究

目的 测定26种采自滇东南红河州原始森林中草药的80%乙醇提取物体外抗菌活性及对MRSA活性,筛选出抑菌效果好的药材进一步提取分离并追踪其有效成分.方法 制备26种云南中草药乙醇提物,采用常规琼脂扩散法对金黄色葡萄球菌,大肠埃希菌,白假丝酵母菌,钢绿假单胞菌以及临床分离得到的MRSA菌株进行体外抑菌试验,倍比稀释法测定MIC(最小抑菌浓度)、MBC(最低杀菌浓度).结果 26种云南中草药的醇提物中有16种对标准金黄色葡萄球菌标准菌株(ATCC 25923)、大肠埃希菌标准菌株(ATCC 25922)、铜绿假单胞菌标准菌株(ATCC27853)、白假丝酵母菌标准菌株(ATCC Y0109)均有不同程度的抑制活性;其中野梧桐,乔木茵芋等8种中草药对标准金黄色葡萄球菌的抑制作用较好,对标准金黄色葡萄球菌的抑菌圈大小在11～24mm之间,对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)菌株抑菌活性在9—26mm之间,MIC在8～512μg/mL之间.结论 野梧桐,乔木茵芋等8种中药具有广谱的抗菌活性,且对MRSA菌株也有一定的抑制作用.     

滇东南26种中草药体外抗菌活性研究

目的测定26种采自滇东南红河州原始森林中草药的80%乙醇提取物体外抗菌活性及对MRSA活性,筛选出抑菌效果好的药材进一步提取分离并追踪其有效成分。方法制备26种云南中草药乙醇提物,采用常规琼脂扩散法对金黄色葡萄球菌,大肠埃希菌,白假丝酵母菌,铜绿假单胞菌以及临床分离得到的MRSA菌株进行体外抑菌试验,倍比稀释法测定MIC（最小抑菌浓度）、MBC（最低杀菌浓度）。结果 26种云南中草药的醇提物中有16种对标准金黄色葡萄球菌标准菌株（ATCC 25923）、大肠埃希菌标准菌株（ATCC 25922）、铜绿假单胞菌标准菌株（ATCC27853）、白假丝酵母菌标准菌株（ATCC Y0109）均有不同程度的抑制活性;其中野梧桐,乔木茵芋等8种中草药对标准金黄色葡萄球菌的抑制作用较好,对标准金黄色葡萄球菌的抑菌圈大小在11～24mm之间,对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）菌株抑菌活性在9～26mm之间,MIC在8～512μg/mL之间。结论野梧桐,乔木茵芋等8种中药具有广谱的抗菌活性,且对MRSA菌株也有一定的抑制作用。