新鲜分离的与预培养的成年肝细胞对胆红素代谢和细胞活性的差异比较

目的探讨新鲜分离的成年动物肝细胞(adult animal hepatocytes,AAH)与预培养24h的AAH对人体胆红素代谢活性的差异,为体外生物人工肝支持系统(extracorporeal bioartificial liver support system,EBLSS)寻求最佳的肝细胞材料应用方案。方法福建省龙岩市第二医院采用机械分离法获得3个月龄的雄性小白鼠肝细胞,设新鲜分离组与预培养组,两组培养液均用含20%胎牛血清、5U胰岛素/ml的高糖型DMEM培养基。新鲜分离组在获取肝细胞后即加入胆红素血清作共培养3h后离心取上清液送检,预培养组对肝细胞作预培养24h再加入胆红素血清继续共培养3h后离心取上清液送检;设不含肝细胞的胆红素血清作对照;用贝克曼全自动生化分析仪检测两组总胆红素、直接胆红素、间接胆红素的变化;以相同的方法作3次重复实验后分析评估。结果新鲜分离肝细胞组使总胆红素、间接胆红素分别下降33.91%、39.29%,而直接胆红素变化不大;预培养组使总胆红素、间接胆红素分别下降8.00%、5.40%。两组总胆红素变化的比较P<0.01(t=3.707),间接胆红素变化的比较P<0.01(t=4.734)。以上实验在完全相同的条件下重复3次,实验结果均显示新鲜分离的AAH对胆红素的代谢活性优于预培养的AAH。结论新鲜分离的AAH对胆红素的代谢活性优于预培养的AAH,在EBLSS使用时以新鲜分离的AAH为佳。     

预诱导提高成年动物肝细胞胆红素代谢活性

目的 探讨经苯巴比妥钠(phenobarbital sodium,PBS)体内预诱导的成年动物肝细胞(adult animal hepatocytes,AAH)在体外时能否提高对胆红素的代谢活性,为体外生物人工肝支持系统(extracorporeal bioartificial liver support system,EBLSS)寻求更佳的生物材料.方法 12只成年雄性小白鼠平均体重34g,随机分为预诱导组与对照组各6只,预诱导组每日1次腹腔内注射PBS 45mg/kg,共5次,对照组注射NS,末次给药的24h后取肝脏;从同组的每只实验鼠中各取湿重肝0.5g混合,合并研制为混悬液加入96孔培养板每孔30μl,各孔再加入黄疸血清50μl,最后加培养液20μl,使各孔终体积为100μl,每组设6孔,共两组12孔;同时设无肝细胞的黄疸血清孔做两组的对照,共同在37℃、95%湿度、5%CO2培养箱中静置培养3h后离心,取上清用贝克曼生化分析仪检测两组的胆红素变化.结果 与对照血清比较,预诱导组总胆红素、间接胆红素各下降60%、71.42%,直接胆红素无显著变化;对照组总胆红素、间接胆红素各下降34.78%、54.87%,直接胆红素亦无显著变化;两组总胆红素变化比较P＜0.05(t=2.899),间接胆红素变化比较P＞0.05(t=1.571).结论 体内PBS预诱导可增强AAH在体外对胆红素的代谢活性,预诱导的AAH可能是EBLSS更佳的生物材料.     

家庭病床救治重症肝炎9例分析

我们从 1993年 8月～ 1999年 4月利用中西医结合家庭病床救治重症肝炎患者 9例 ,获 7例成功 2例死亡 ,取得较好的救治效果 ,现汇报如下。1　一般资料本组病人男性 7例 ,女性 2例。 2 0～ 5 0岁 6例 ;5 1～70岁 2例 ;76岁 1例。 2例死亡者 1男 1女 ,男 5 8岁 ,女76岁。2　临床诊断参照 1990年全国第 6次肝炎病学术会议修订标准。其中慢性重症肝炎 5例 ,亚急性重症肝炎 3例 ,急性重症肝炎 1例。除 1例酒精性肝硬化合并急性乙肝病毒感染者外 ,其余 8例均有既往ＨＢｓＡｇ阳性史。中医辨证属湿浊蒙窍者2例 ;湿热毒蕴者 3例 ;热毒炽盛者 3例 ;热…     

肝细胞冻存复苏成活率及胆红素代谢活性的实验评价

目的评价成年异种动物肝细胞液氮冻存复苏后对人重型肝炎胆红素的代谢活性,探讨生物人工肝支持系统（EBLSS）使用冻存复苏异种肝细胞的实际价值.方法采用H-E染色镜检肝细胞形态、锥虫兰染色计数肝细胞成活率、细胞培养检测胆红素代谢活性,实验观察液氮中冻存3个月复苏后的成年小白鼠肝细胞形态、存活率和对重型肝炎胆红素代谢活性,并设刚分离的肝细胞作对照组.结果冻存复苏后肝细胞胞质严重丢失,成活率约为30%,重型肝炎的总胆红素、直接胆红素、间接胆红素分别下降8.63%、8.98%、8.06%;新鲜分离肝细胞形态完整,成活率为90%以上,使重型肝炎总胆红素、间接胆红素、直接胆红素分别下降14.09%、12.95%、20.82%（t=8.932,P＜0.01）.结论冻存复苏的异种肝细胞胞质丢失严重,细胞成活率很低,对胆红素代谢活性很弱,不是EBLSS理想的生物材料.     

滋肾益肝方联合多烯磷脂酰胆碱治疗抗结核药物所致急性肝损伤的有效性与安全性研究

目的:探讨滋肾益肝方联合多烯磷脂酰胆碱治疗抗结核药物所致急性肝损伤的有效性与安全性。方法:经抗结核药物致急性肝损伤患者92例,按随机数字表法分组,对照组46例予以多烯磷酯酰胆碱治疗,研究组46例予以滋肾益肝方联合多烯磷脂酰胆碱治疗,对比两组间临床症状和血清学指标,同时记录不良反应状况。结果:与治疗前比,两组治疗后中医症状积分降低,治疗后SOD、GSH水平升高,MDA水平降低,治疗后ALT、AST、TBIL、GGT和ALP水平降低,治疗后前白蛋白及IL~(-1)6、IL~(-1)9水平降低,具有统计学差异(P0.05);与对照组比较,研究组治疗后中医症状积分较低,治疗后SOD、GSH水平较高,MDA水平较低,治疗后ALT、AST、TBIL、GGT和ALP水平较低,治疗后前白蛋白、总蛋白较高,IL~(-1)6、IL~(-1)9水平较低,具有统计学差异(P0.05);两组均无病例脱落现象,仅见轻微不良反应,两组间不良率对比,差异无统计学意义(P0.05)。结论:滋肾益肝方联合多烯磷脂酰胆碱治疗抗结核药物致急性肝损伤疗效确切,不良反应低,值得推广。     

长期肝酶正常HBV感染者肝组织病理分析

目的 明确长期肝酶正常乙型肝炎病毒(HBV)感染者肝组织病理特点.方法 长期肝酶正常HBV感染者与确诊为慢性乙型肝炎病人行肝组织病理结果比较,两组结果中各种程度的病理改变占各组的比例行小样本x2检验.结果 两组各种程度的病理改变占各组的比例比较,P＞0.05,结果 无显著性差异.结论 长期肝酶正常的HBV感染者存在隐匿性肝病进展可能,干预治疗很有必要.     

中医辨证治疗慢性活动型肝炎

笔者自１９８４年以中医辨证与辨病相结合治疗１２８例慢性活动性肝炎,取得较为理想的效果。１一般资料本组１２８例中男１１３例,女１５例,男性明显多于女性;２０岁以下者２例,２０～４０岁者８８例,４０～６０岁者３２例,６１岁以上者６例。诊断标准符合１９９０...     

中西医结合治疗重型肝炎72例

重型肝炎 (以下简称重肝 )病势凶险 ,并发症多 ,死亡率高。我们多年来强调中西医结合综合救治 ,并采取在辨证施治基础上重用大黄治疗重肝 ,其相关并发症明显减少 ,从而使患者的存活率得到明显的提高 ,现将我们近 5 a来较为完整的病例资料 72例整理报告如下。1　临床资料 :治疗组 72例 ,均为我科 1998年 1月～ 2 0 0 2年12月的住院病人 ,其中男 6 3例 ,女 7例 ;年龄最小 2 1岁 ,最大 6 1岁 ,平均 4 2 .5岁。排除合并恶性肿瘤的病例 ,全部病例乙肝血清标志物均阳性。临床诊断符合 1995年北京全国病毒性肝炎防治方案的诊断标准 ,其中急性重型肝…     

不同固定方式对头颈部肿瘤放疗摆位误差的影响

目的 通过比较头颈部肿瘤放疗采用不同体位固定技术对摆位误差的影响,探讨最优体位固定方式。方法 选取2021年6月—2022年11月南通大学附属医院收治的接受头颈部肿瘤放疗的患者共120例进行前瞻性研究,采用随机数表法分为头颈肩热塑膜+个性化大塑形枕固定组（A组）、头颈肩热塑膜+个性化小塑形枕固定组（B组）、头颈肩热塑膜+标准化塑料枕固定组（C组）,每组40名。所有入组患者放疗前行锥形束CT(cone-beam CT,CBCT)进行位置引导验证并记录摆位误差,对摆位误差结果进行统计学分析。结果 A、B两组平移误差在X、Y、Z方向上均小于C组（P<0.05）;A组平移误差在X方向上小于B组（P<0.05）,Y、Z方向上差异无统计学意义（P>0.05）。旋转误差比较A组在X、Y方向小于B组（P<0.05）,A组在X、Y、Z方向都小于C组（P<0.05）;B组在X轴方向小于C组（P<0.05）,Y、Z方向上差异无统计学意义（P>0.05）。结论 在头颈部肿瘤放疗患者固定方式选择时,头颈肩热塑膜+个性化头颈肩大塑形垫固定最优,头颈肩热塑膜+个性化头颈小塑...     

乙型肝炎病毒基因型、基础核心启动子和C区变异与干扰素疗效的观察

目的 探讨HBV基因型、基础核心启动子(BCP)和C区变异与IFNα抗病毒疗效的相关性.方法 选择IFNα-1b治疗6个月的HBeAg阳性慢性乙型肝炎(CHB)患者,随访6个月.应用限制性片段长度多态性(RFLP)法检测HBV基因型,PCR测定BCP、前C/C区核苷酸序列.计量资料采用t检验、方差分析,计数资料采用卡方检验、Fisher确切概率法,并进行多因素条件Logistic回归分析.结果 共39例CHB患者完成观察,治疗结束时,应答16例,占41.0%;随访结束时,应答者中持续应答12例,占30.8%,复发4例,占10.3%.其中B基因型29例,占74.4%,C基因型10例,占25.6%.基因型型别差异与IFNα-1b疗效无关.8例患者BCP区T1762/A1764双变异,占20.5%,与IFNα-1b疗效无相关.8例患者检出A1896变异,占20.5%,随访结束时获得疗效的3例A1896变异株感染者均复发.C区非淋巴细胞表位测序发现,15例患者L60V变异,占38.5%,14例为I97L变异,占35.9%.与60V比较,表现为60L的患者在随访结束时的HBeAg血清学转换率和HBV DNA阴转率明显低(Fisher确切概率法,P=0.0126、0.0069).与97L比较,表现为97I的患者在治疗结束时和随访结束时的HBV DNA阴转率明显低(Fisher确切概率法,P=0.0484、0.0024).Logistic回归分析显示,基因型、C区变异与IFNα-1b疗效无相关.结论 HBV基因型、BCP双变异与IFNα的疗效无关,C区非淋巴细胞表位L60V及I97L变异可能有利于IFNα的治疗.

Abstract：

Objective To investigate the association between hepatitis B virus (HBV)genotype, the mutations in HBV basic core gene promoter(BCP), pre C/C gene region and treatment response to interferon (IFN)α-1b. Methods Hepatitis B e antigen (HBeAg)-positive chronic hepatitis B (CHB) patients were treated with IFNα-Ib for 6 months and were followed up for 6 months after the end of treatment. Restriction Fragment Length Polymorphism (RFLP) was used for determining HBV genotype. HBV DNA was amplified by polymerase chain reaction (PCR) and analyzed for BCP and pre C/C gene region by sequencing. Measurement data were compared using t test and analysis of variance. Enumeration data were compared using chi-square test, Fisher exact probability test.Logistic regression analysis was utilized for multi-factor analysis. Results There were 39 patients who completed the treatment and follow up in this study. At the end of treatment, 16(41.0%) patients showed response to the IFNα-lb treatment. At the end of follow-up, four out of 16 patients who achieved on treatment response relapsed. Among 3a patients, 29 (74.4 %) were infected with genotype B and 10 (25. 6%) with genotype C. The treatment response rates were not significant different between the groups with different genotypes. The double mutation pattern (T1762/A1764) was found in eight (20. 5%) patients. The response rates to IFNα-lb treatment were not significant different between the group with and without double mutation pattern. A1896 mutation was detected in eight patients at baseline. Three of them became HBeAg negative at the end of treatment and returned to HBeAg positive during follow-up. The non-lyphocyte epitope mutations, L60V and I97L, were found in 15 patients (38. 5%) and 14 patients (35.9%), respectively. At the end of follow-up, the patients with 60V had a significantly lower HBeAg seroconversion rate and HBV DNA undetectable rate compared to the patients with 60L (Fisher exact probability test; P = 0.0126 and 0.0069,respectively). The HBV DNA undetectable rates in the patients with 97I were significantly lower than those in patients with 97L both at the end of treatment and the end of follow-up (Fisher exact probability test; P= 0.0484 and 0. 0024, respectively). Logistic regression analysis results showed that there was no association between the above viral mutations and the treatment response to IFNαlb. Conclusions There is no association between HBV genotype, BCP double mutation pattern and IFN-α treatment response. The non-lyphocyte epitope mutations, L60V and I97L, may have impact on IFN-α treatment response.