知母盐炙前后体外降血糖作用的研究

目的利用Caco-2细胞模型比较知母盐炙前后的降血糖作用,并考察其作用机制,为盐知母炮制原理的阐明提供依据。方法建立Caco-2单层细胞模型,采用CCK-8细胞活力试剂盒检测5 000、2 500、500、250、50、25、5、2.5、0.5、0.25μg/m L生、盐知母水煎液细胞毒性,来确定药物最大毒性剂量。以蔗糖酶和麦芽糖酶底物,葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖质量浓度,计算抑制率,比较其对Caco-2单层细胞上蔗糖酶和麦芽糖酶活力的影响。葡萄糖吸收实验测定剩余葡萄糖的质量浓度,比较生、盐知母对Caco-2细胞吸收和转运葡萄糖的影响。结果当生、盐知母质量浓度≤250μg/m L时,Caco-2细胞可进行细胞实验。实验选取了50、250μg/m L两个质量浓度。生、盐知母水煎液50、250μg/m L对蔗糖酶、麦芽糖酶活性均有抑制作用,且盐知母水煎液对蔗糖酶、麦芽糖酶的抑制作用均优于生知母。生、盐知母水煎液均有降低细胞对葡萄糖吸收的趋势,且呈现剂量相关性,但效果不显著。盐知母水煎液对葡萄糖吸收的抑制作用略好于生知母(P0.05)。结论盐知母对Caco-2细胞的降糖作用优于生知母,其降糖机制可能主要体现在α-葡萄糖苷酶上,而对葡萄糖吸收作用影响较小。     

产地加工炮制一体化香薷的解热抗炎作用研究

目的比较产地加工炮制一体化制备香薷与传统切制香薷对脂多糖(LPS)致热大鼠和LPS刺激的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7炎症的作用,为香薷产地加工炮制一体化技术实施及香薷辛温解表的传统功效提供科学依据。方法以香薷(挥发油和水煎液)进行药物干预后,采用ip LPS造大鼠发热模型,观察发热大鼠体温变化情况,检测大鼠血清前列腺素E2(PGE2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、环磷酸腺苷(c AMP)、白细胞介素-1β(IL-1β)和肝组织髓过氧化物酶(MPO)水平,比较产地加工炮制一体化和传统切制香薷对热证大鼠的影响;以不同浓度香薷(挥发油和水煎液)作用于LPS刺激的RAW264.7细胞,测定细胞存活率,ELISA法检测NO分泌量,比较产地加工炮制一体化和传统切制香薷的抗炎作用。结果各给药组能够降低大鼠肛温及PGE2、TNF-α、c AMP、IL-1β、MPO含量,增强细胞免疫作用,且产地加工炮制一体化组比传统切制组作用显著,香薷水煎液作用略优于挥发油。结论香薷产地加工炮制一体化技术可行。     

知母盐制后增量成分对HepG-2细胞葡萄糖消耗的影响

目的：通过探讨知母盐制后增量成分知母皂苷AⅢ、知母皂苷BⅢ、芒果苷对HepG-2细胞葡萄糖消耗的影响,进一步验证知母盐炙后降糖作用增强的炮制原理。方法：将HepG-2细胞分为空白对照组、知母皂苷AⅢ组、知母皂苷BⅢ组、芒果苷组、二甲双胍组,在5% CO₂培养箱中培养24 h,饥饿12 h,再加入不同浓度相应的含药或不含药血清培养基,采用葡萄糖试剂盒检测培养液中的葡萄糖含量,葡萄糖消耗实验之后,加入cck-8试剂培养2 h,用酶标仪测定吸光度（OD）;采用胰岛素诱导建立胰岛素抵抗HepG-2细胞模型,同上法比较知母皂苷AⅢ、知母皂苷BⅢ以及芒果苷对胰岛素抵抗HepG-2细胞葡萄糖消耗的影响。结果：知母皂苷AⅢ、知母皂苷BⅢ、芒果苷对正常组和胰岛素抵抗HepG-2细胞的葡萄糖消耗量和细胞增殖均有显著增加（P<0.05）。结论：知母皂苷AⅢ、知母皂苷BⅢ、芒果苷均具有降糖活性,尤其对胰岛素抵抗的HpeG-2细胞作用明显,是盐知母降糖作用的物质基础。     

五味子不同炮制品对大鼠肾阳虚的改善作用研究

目的通过比较五味子不同炮制品对肾阳虚大鼠的补益作用,为酒五味子"入补药熟用"提供药理学依据。方法采用甲巯咪唑法造肾阳虚大鼠模型,将成模大鼠随机分为模型组、右归丸(3.7 g/kg)组、生五味子(2.8 g/kg)组、酒五味子(2.8 g/kg)组、醋五味子(2.8 g/kg)组,另设对照组,每组10只。各给药组从第16天开始ig相应药液,给药体积均为10mL/kg,连续30 d。试剂盒测定各组大鼠血清中游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离四碘甲状腺原氨酸(FT4)、促甲状腺素(TSH)、一氧化氮(NO)、促甲状腺激素释放激素(TRH)水平;测定血浆中环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)水平,计算cAMP/cGMP;观察各组大鼠甲状腺组织病理形态。结果与模型组比较,五味子各炮制品均能不同程度地提高大鼠血清FT3、FT4、NO及下丘脑TRH水平,降低血清TSH水平,两组比较差异具有统计学意义(P0.05、0.01);均可以提高血浆cAMP水平,降低血浆cGMP水平,两组比较差异具有统计学意义(P0.05、0.01)。其中与生五味子、醋五味子组比较,酒五味子作用最优(P0.01)。五味子各炮制品对甲状腺病理形态均有所改善,其中酒五味子、醋五味子较优。结论五味子的补肾作用与改善下丘脑–垂体–甲状腺(HPT)轴功能抑制有关,酒五味子补肾作用最好。     

星点设计-效应面法优化知母盐制的炮制工艺

目的采用星点设计-效应面法以进一步优化盐制知母的炮制工艺,保证临床疗效。方法以具有降血糖作用的活性成分知母皂苷B-Ⅲ、知母皂苷A-Ⅲ、芒果苷的总含量为指标。以加盐量、炒炙时间、炒炙温度为考察因素,采用星点设计-效应面法(CCD)优选炮制条件,并进行预测分析。结果最优炮制工艺为加盐量3g,炒炙12min,炒炙温度为150℃。结论本次实验使用盐制知母,并采用星点设计-效应面法优化知母的盐炙工艺,并且预测性良好。     

香薷产地加工炮制一体化与传统切制对肺阳虚大鼠作用比较

比较分别通过产地加工炮制一体化与传统切制法炮制的香薷,对复合因素致肺阳虚大鼠的影响,分析其作用机制,为香薷产地加工与炮制一体化技术实施提供现代药理学依据。采用烟熏+冰水游泳+服用冰水三因素复合造成肺阳虚大鼠模型,随机分组,灌胃给药治疗30 d,观测大鼠一般体征,肛温,自主活动情况,取肺组织做病理形态观察并通过免疫组织化学法观察肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的阳性表达,测定血液学指标,并采用ELISA法检测大鼠血清一氧化氮(NO)、免疫球蛋白G(IGG)、丙二醛(MDA)、血栓素B2(TXB2)和白细胞介素-8(IL-8)水平,计算心、肝、脾、肺、肾等脏器系数。结果表明香薷挥发油和水煎液均能改善肺阳虚大鼠一般体征和自主活动情况,提高肺阳虚大鼠体质量、肛温、血清IGG含量,降低大鼠心、肝、脾、肺、肾脏器系数,血清NO,MDA,TXB2,IL-8含量,血白细胞水平和大鼠肺组织中TNF-α平均光密度,差异有统计学意义(P0.01或P0.05),产地加工炮制一体化的香薷挥发油和水煎液作用略有提高。所以香薷对肺阳虚大鼠具有一定治疗作用,且以产地加工炮制一体化后效应显著,其对肺阳虚的治疗作用可能与通过干预TNF-α表达,提高IGG水平,抑制NO,MDA,TXB2,IL-8水平等有关。