维甲酸调变早幼粒白血病细胞株NB4中G-CSF及其受体表达

目的：进一步研究G－CSF在维甲酸致高白细胞症中的作用。方法：用RT－PCR、Northernblotting方法检测NB4细胞经全反式维甲酸（ATRA）作用后G－CSF mRNA表达的变化，同时用ELISA方法检测细胞培养上清液中G－CSF蛋白水平的变化；采用流式细胞技术检测NB4细胞经ATRA作用后G－CSF受体蛋白表达的变化。结果：ATRA可从基因水平上调NB4细胞中G－CSF表达，并可增加NB4细胞表面G－CSF受体的表达，G－CSF受体表达增加出现的时间虽然稍晚于G－CSF表达增加出现的时间，但仍然在较早期阶段，此时，细胞形态学和NBT实验均证实BN4细胞处于部分分化阶段。结论：在ATRA治疗APL过程中，G－CSF及其受体表达增加可能协同参与了高白细胞症的发生。     

急性白血病患者自身抗体和免疫复合物测定及意义

应用定量ELISA检测44例急性白血病患者自身免疫状态,发现初发患者SS-DNA抗体阳性率升高(P<0.05),ds-DNA抗体阳性率正常(p>0.05);处于活动期和缓解期两组患者的ss-DNA和ds-DNA抗体阳性率无明显差别(p>0.05)。初发患者ACA-IgA、IgG或IgM阳性率均近似正常对照(p>0.05),而ACA抗体总阳性率明显高于对照(p<0.05)。14例急性早幼粒细胞白血病患者经维甲酸诱导分化治疗后,ACA总阳性率降低(P<0.05),急性白血病患者CIC水平和CIC增高率均大于正常对照(P<0.01),并且活动期高于缓解期(P<0.05)、但维甲酸治疗对CIC水平和增高率均无明显影响(P>0.05)。     

健脾药对免疫介导再生障碍性贫血小鼠IL-3、IFN-γ影响的实验研究

目的：检测免疫介导再生障碍性贫血(简称再障)小鼠骨髓造血细胞在含健脾药血清的液体培养体系中IL-3、IFN-γ的浓度，探讨健脾药治疗再障的作用机理。方法：用健脾药灌喂SD大鼠，抽取、制备含中药血清；Balb／C小鼠经^60Co5．5Gyγ射线照射后由尾静脉输入取自DBA／2小鼠胸腺淋巴结混合细胞悬液形成免疫介导再障模型。在含健脾药血清的液体培养体系中培养再障小鼠骨髓造血细胞，检测培养体系中IL-3、IFN-γ的浓度。结果：健脾药对再障小鼠IL-3、IFN-γ的总量无明显影响。结论：健脾药可能通过使局部IFN-γ浓度降低进而影响造血干／祖细胞增殖、分化。     

全反式维甲酸对人脐血CD133+细胞体外短期扩增中生物学特性的影响

维甲酸 (RA)对许多细胞的增殖和分化具有调节作用。全反式维甲酸 (ATRA)在体内外能诱导急性早幼粒细胞白血病 (APL)细胞向成熟粒细胞分化 ,对造血细胞的调节作用尚未完全明了 ,有报道认为RA能促进粒系和红系祖细胞的增殖 ,也有报道认为 ,RA对造血干 /祖细胞 (HSPC)的增殖和分化具有抑制作用[1,2 ] 。近来有研究显示 ,RA在体外能促进小鼠HSPC的自我更新 ,并能延迟HSPC的分化[3 ,4] 。为了解ATRA对人脐血HSPC体外增殖和分化的影响 ,我们观察了ATRA对人脐血CD133 细胞体外增殖和分化的影响。材料和方法1　标本来源和细胞制备…     

高三尖杉酯碱诱导K562和CML细胞凋亡及分化的实验研究

目的 明确三尖杉酯碱（HHT）治疗慢性粒细胞性白血病（CML）的机理。方法 应用细胞长曲线、克隆形成能力、细胞内血红蛋白含量测定、细胞形态,结合DNA凝胶电泳、流式细胞仪等方法,观察HHT对K562细胞株及CML慢性期细胞的作用方式。进一步用RT－PCR方法研究bcr-abl、c-myc 、max基因在转录水平的改变。结果 低浓度HHT抑制K562细胞的克隆形成能力并使K562细胞内血红蛋白含量增加;0.1umol /L 及以上浓度HHT可诱导K562细胞及CML细胞凋亡;细胞周期分析发现细胞阻滞于G1期。c-myc基因在加药24h开始下凋; bcr-abl和max基基的表达未见明显改变。结论 低浓度HHT可抑制K562 细胞增殖并诱导其向红系分化;超过一定“ 阈浓度”HHT可诱导K562细胞和CML慢性期细胞凋亡;HHT可通过抑制c-myc/max 表达来阻 滞细胞周期。     

全反式维A酸诱导分化治疗急性早幼粒细胞白血病的机制研究

198 5年 ,我所于体外研究证明 ,全反式维Ａ酸(ＡＴＲＡ)可以诱导ＨＬ - 6 0及新鲜ＡＰＬ细胞向终末成熟细胞分化。 1986年我所在国际上首先应用ＡＴＲＡ治疗ＡＰＬ 2 4例 ,2 3例取得完全缓解 (ＣＲ)。该结果发表在Ｂｌｏｏｄ(1988,72 :5 6 7) ,并在以后的年代里 ,得到国内外广泛的证实。进一步的临床研究结果指出 ,ＡＰＬ用ＡＴＲＡ与化疗合理组合治疗 ,ＣＲ率可提高到90 %～ 95 % [1] 。我所已在 1999年总结了临床应用的十年经验[2 ] 。ＡＴＲＡ虽可明显提高ＡＰＬ的ＣＲ率 ,但容易产生耐药和复发 ,1994年我所与哈医大合作 ,研究了氧化砷治…     

骨髓基质细胞共培养体系促进人脐血CD133+细胞的体外扩增

目的探讨来自白血病患者骨髓细胞的基质细胞层建立的扩增体系体外扩增人脐带血造血干/祖细胞的可行性。方法应用白血病患者缓解期骨髓基质细胞,结合造血细胞生长因子体外扩增人脐带血CD133 细胞(实验组),对扩增细胞的免疫表型、集落形成能力等生物学特性进行动态观察,并与单独应用造血细胞生长因子的常规扩增(对照组)进行比较。结果基质细胞层上接种的细胞易于收集;实验组在扩增各时间点的有核细胞数(NC)明显高于对照组,而且有核细胞中CD34 细胞、CD133 细胞、CD34 CD38-细胞以及CD34 CD133 细胞的比例也明显高于对照组;实验组扩增各时间点有核细胞各种集落的种植率明显高于对照组,有核细胞、CD34 细胞、CD133 细胞、CD34 CD38-细胞以及细胞集落的扩增倍数明显高于对照组。结论含有基质细胞的扩增培养体系,不仅可以加速人脐带血造血干/祖细胞的体外扩增,而且可以延缓造血干/祖细胞的分化。     

儿童再生障碍性贫血骨髓祖细胞的测定和意义

目的通过对再生障碍性贫血(AA)患儿红系(BFU-E、CFU-E)、粒单核系(CFU-GM)及巨核系(CFU-Meg)祖细胞培养,了解骨髓祖细胞增殖情况.方法抽取47例AA患儿骨髓分别作四类祖细胞培养,在7、14 d测定其集落数.结果 47例AA患儿中,四类集落数均值与对照组比较均有显著下降(P<0.05,P<0.01),且四类集落数均值在AA三种类型中,基本上随病情加重均值逐步下降,其中四类集落数低于对照组下限的患儿分别为BFU-E 36.17%、CFU-E 85.11%、CFU-GM 74.47%、CFU-Meg 91.49%.BFU-E、CFU-GM和CFU-Meg随着患儿疾病的加重,低于对照组下限的患儿百分比同步上升,且三者的表现与外周血三系表现一致,而CFU-E却未见上述现象.结论在部分AA患儿中存在着四类祖细胞培养集落数的下降,且基本上与患儿病情成正比;BFU-E的变化较CFU-E更能代表患儿骨髓红系祖细胞的变化.     

急性早幼粒细胞白血病患者白细胞介素6测定与意义分析

本文用IL-6依赖细胞株MH60-BSF2检测12例患者血清与白血病细胞内IL-6活性。结果发现正常对照血清IL-6平均<10U/ml,白细胞内IL-6活性多数测不到(仅1例为5U/2×10~5)。APL患者治疗前期、中期(白细胞增殖期)及后期(缓解期)血清IL-6活性分别为36.06±15.72U/ml、41.5±/5.0U/ml和22.12±12.02U/ml:治疗中期似有升高(P>0.05),治疗后期下降(P<0.05);外周白细胞内IL-6活性分别为8.98±8.6U/2×10~5细胞、5.36±4.16U/2×10~5细胞和5.95±3.68U/2×19~5细胞,治疗前似较高(P>0.05),治疗后无明显变化。APL瘤细胞在体外比正常白细胞有更高的IL-6活性(P<0.05)。相关分析表明APL患者外周总白细胞数,骨髓L-CFU及GM-CFU均与IL-6活性变化不相关(P<0.05)。