Twist在胃癌中的表达及其与临床病理学指标关系研究

目的：检测Twist蛋白在胃癌组织中的表达及与临床病理学指标的关系，探讨Twist蛋白在胃癌诊治中的临床应用价值。方法：应用鼠抗人Twist单克隆抗体免疫组织化学方法检测98例不同类型胃癌组织及32例正常胃组织中Twist的表达。结果：在98例胃癌组织中，Twist阳性表达60例（61.2％）；在正常胃组织中其阳性表达5例（15.2％），两者比较，P=0.000（X^2=20.06）；结合临床病理资料统计分析发现，Twist在胃癌组织中表达与肿瘤的分化程度、胃壁浸润、淋巴结转移及远处转移有关（X^2分别为6.577、9.557、9.87、4.88，P值分别为0.01、0.002、0.002、0.027）；而其表达与病人年龄、性别无关（X^2分别为0.226、0.331，P值分别为0.634、0.565）。结论：Twist在胃癌诊断中作用明确，并且在判断肿瘤分化程度、浸润、淋巴结转移等方面均具有较好的辅助诊断价值。     

应用VPA调节组蛋白乙酰化修饰对肿瘤细胞Caspase的影响

目的:探讨应用组蛋白脱乙酰酶抑制剂丙戊酸钠(VPA)调节染色体组蛋白低乙酰化修饰对肿瘤细胞Caspase3、Caspase8、Caspase9蛋白表达及活性的影响,同时通过检测VPA与Caspase3、Caspase8、Caspase9特异性抑制剂协同作用后细胞凋亡的变化加以验证.方法:应用0.75~4.0 mmol/L VPA干预肝癌细胞HepG2、胃癌细胞BGC-823、乳腺癌细胞MCF-7 48小时后,流式细胞术分析细胞凋亡的变化;分光光度法检测Caspase3、Caspase8、Caspase9活性;流式细胞仪间接免疫荧光法定量分析Caspase3、Caspase8、Caspase9蛋白表达.结果:0.75~4.0 mmol/L VPA干预48小时后,FCM分析可见HepG2、BGC-823、MCF-7细胞凋亡率显著增加,与对照组比较差异有显著意义(P<0.001)并且呈剂量依赖趋势;HepG2、BGC-823、MCF-7细胞Caspase3、Caspase9蛋白表达均被明显上调、活性升高,与对照组相比有显著差异(P<0.001);Caspase8活性及蛋白表达在HepG2、MCF-7细胞未见明显改变,BGC-823细胞仅轻度增加.VPA与Caspase3、9相应特异性抑制剂共同作用后,Caspase3、Caspase9活性被抑制,细胞凋亡率较VPA单独干预组显著降低(P<0.005);VPA与Caspase8特异性抑制剂共同作用组细胞凋亡率与VPA单独作用组比较无明显变化(P>0.05).结论:应用VPA干预组蛋白乙酰化修饰对HepG2、BGC-823、MCF-7细胞Caspase3、Caspase9蛋白表达及活性可起明显的调控作用;对Caspase8的调控作用则随肿瘤细胞来源及表型的不同而有所差异,但总体趋势不明显.     

应用VPA调节组蛋白乙酰化修饰抑制乳腺癌细胞增殖的实验研究

目的 观察应用组蛋白脱乙酰酶抑制剂丙戊酸钠(VPA)调节染色体组蛋白低乙酰化水平对乳腺癌细胞增殖的作用,并进一步检测Cyclin A、Cyclin D1、Cyclin E、P21Waf/cipl蛋白及mRNA表达变化来探讨其分子作用机制.方法 乳腺癌细胞系MCF-7细胞经0.75-4.0 mmol/L VPA作用后,MTT法检测细胞生长抑制、PI标记流式细胞术检测细胞周期、间接免疫荧光法分析CyclinA、Cyclin D1、Cyclin E、P21Waf/cipl蛋白表达、RT-PCR检测分析Cyclin A、Cyclin DI、Cyclin E、P21Waf/cipl mRNA表达.结果 经0.75-4.0 mmol/L VPA作用24、48、72、96 h,试验组细胞生长抑制率逐渐升高,且呈时间、剂量依赖趋势;对照组细胞增殖周期G1、S、M期所占比例未见明显改变,而实验组则随药物浓度、作用时间的不同而出现不同程度的细胞增殖周期G1期阻滞,G1期比例由56.7%-78.9%不等,与对照组比较其升高差异有统计学意义(P<0.01).试验组P21Walf/cipl蛋白、mRNA表达被明显上调、Cyclin D1蛋白及mRNA表达被明显下调,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);而CyclinA、CyclinE蛋白和mRNA表达则未见明显变化(P>0.05).结论 通过应用组蛋白特异性脱乙酰酶抑制剂调节组蛋白乙酰化修饰可明显抑制乳腺癌细胞生长、诱导细胞增殖周期阻滞;丙戊酸钠作为组蛋白脱乙酰酶抑制剂可明显抑制乳腺癌细胞增殖,其作用机制是通过上调P21Walf/cipl mBNA、蛋白表达,下调Cyclin D1 mRNA和蛋白表达分别和/或协同实现.     

丙戊酸钠通过激活内源性凋亡途径诱导乳腺癌细胞凋亡的实验研究

目的探讨丙戊酸钠（VPA）诱导乳腺癌细胞凋亡的作用。方法乳腺癌细胞株MCF-7细胞分为0.75～4.0 mmoL/L VPA实验组、对照组（不加VPA）及VPA与caspase抑制剂共同作用组。Annexin V-PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡,间接免疫荧光法定量分析及分光光度法检测caspase- 3、caspase-8、caspase-9蛋白丰度和活性,探讨VPA诱导凋亡的机制,同时检测VPA与caspase-3、caspase- 8、caspase-9特异性抑制剂协同作用后细胞凋亡的变化来加以验证。结果各浓度VPA干预MCF-7细胞48 h后,细胞凋亡率显著增加,caspase-3、caspase-9活性升高、蛋白表达明显上调,与对照组相比有显著差异（F=552.1、610.9、312.8、222.8、70.3,均P〈0.001）;而caspase-8活性及蛋白表达未见明显改变;1.5、3.0 mmol/L VPA与caspase-3、caspase-9相应特异性抑制剂共同作用组,细胞凋亡率均较VPA组显著降低（t=109.0、28.7、18.7、32.3,均P〈0.005）;VPA与caspase-8特异性抑制剂共同作用组细胞凋亡率与VPA组比较无明显改变（t=1.03、2.32,均P〉0.05）。结论VPA可通过激活caspase-9介导的内源性凋亡途径,明显诱导乳腺癌细胞凋亡,具有较好的临床应用价值。     

Nd∶YAG激光治疗牙本质过敏症500例

资料与方法 :5 0 0例患者中男性 371例 ,女性 12 9例 ;年龄 2 1～ 72岁。因■面牙釉质磨损 ,楔状缺损、酸蚀等造成牙本质暴露。Ｎｄ∶ＹＡＧ激光光纤手术器 ,波长 1 0 6 μｍ ,光斑直径 1 5ｍｍ ,先后分别用输出功率 1、2、3、4Ｗ脉冲照射 ,最大不超过 4Ｗ。先用探针探出牙齿的最敏感点 ,用干棉球拭过敏点 ,采用光纤头直接照射 ,距离 2ｍｍ ,时间 5～ 8ｓ,间隔 3～ 5ｍｉｎ ,对症状较重的可用 4Ｗ的输出功率重复照射2～ 4次。结果 :一次治疗症状完全消失 35 8例 ,其余患者经 2～ 4次治疗后过敏症状明显减轻。Nd∶YAG激光治疗牙本质过敏症5…     

丙戊酸钠调节组蛋白乙酰化对肝癌细胞浸润转移影响的研究

目的:探讨应用组蛋白脱乙酰酶(his-tone deacetylase,HDAC)抑制剂丙戊酸钠(val-proate acid sodium,VPA)调节组蛋白乙酰化水平对肝细胞性肝癌细胞侵袭、迁移能力的影响及其可能作用机制.方法:采用肿瘤细胞体外迁移实验和Transwell小室体外侵袭模型评价HDAC抑制剂VPA对HepG2细胞浸润转移能力的影响.进一步应用间接免疫荧光技术检测HepG2细胞MMP-2、MMP-9蛋白表达来探讨其作用机制.结果:细胞培齐24 h后,对照组迁移细胞数目较多,为(142±16.5)个,而(0.75～4.0)mmol/L VPA试验组细胞迁移数目随药物浓度升高而逐渐由(125±12.4)个减少(42±6.1)个,差异有统计学意义,P<0.001;对照组穿过聚碳酯膜细胞数目(85±7.8)个,明显高于药物实验组(69±6.9～18±3.6)个,差异有统计学意义,P<0.001;与对照组比较,试验组MMP-2、MMp-9蛋白表达被明显下调,并且与肿瘤细胞迁移、侵袭的变化密切相关.结论:应用HDAC抑制剂逆转染色体组蛋白低乙酰化水平可显著抑制肝癌细胞侵袭转移,下调MMP-2和MMP-9表达可能是其发挥作用的主要机制之一.     

尿液SIgA含量对小儿急性肾炎、肾病综合征的临床意义

近来我们用放射免疫法测定了健康儿童急性肾炎及肾病综合征患者的尿液SIgA(分泌型IgA),结果如下。一、对象及方法1.对象:3～12岁儿童,分三组:急性肾炎组42例;肾病综合征组17例;对照组33例(散居健康儿)。     

丙戊酸钠调节组蛋白乙酰化抑制胃癌细胞增殖的实验研究

目的:探讨应用组蛋白脱乙酰酶抑制剂丙戊酸钠(VPA)逆转染色体组蛋白低乙酰化水平对胃癌细胞增殖的影响及其分子机制.方法:应用0 75 ~4 0 mmol/L VPA作用于胃癌细胞系BGC-823细胞后,MTT法检测细胞生长抑制,PI标记流式细胞术检测细胞周期,间接免疫荧光法分析Cyclin A、Cyclin D1、Cyclin E和p21Waf/cip1蛋白表达,RT-PCR检测分析Cyclin A、Cyclin D1、Cyclin E和p21Waf/cip1 mRNA表达.结果:经0 75~4 0 mmol/L VPA作用24、48、72和96 h,各实验组均出现了时间、剂量依赖趋势的生长抑制,生长抑制率为9%~66%,差异有统计学意义,P<0 001;对照组细胞增殖G1期所占比例为57 8%~60 9%;而实验组则随药物浓度、作用时间的不同而出现不同程度的细胞周期G1期阻滞,G1期比例为58 2%~79 4%,与对照组比较差异有统计学意义,P<0 001.VPA干预BGC-823细胞后, Cyclin A、Cyclin D1蛋白和mRNA表达明显下调而p21Waf/cip1蛋白和mRNA表达明显上调,与对照组比较差异均有统计学意义,P<0 001;Cyclin E蛋白和mRNA表达变化未见明显差异,P>0 05.结论:组蛋白特异性脱乙酰酶抑制剂VPA可明显抑制胃癌细胞增殖、阻滞细胞增殖周期于G1期;其阻滞胃癌细胞增殖的作用通过上调p21Waf/cip1 mRNA、蛋白表达,下调Cyclin D1、Cyclin A mRNA和蛋白表达分别和(或)协同实现.     

687例乳腺肿块的针吸细胞学检查结果分析

1996年2月～2004年12月,我们对1 896例乳腺肿块标本行细针吸取细胞学检查,687例与术后病理检查结果核对.现报告如下.……     

丙戊酸钠诱导胃癌细胞凋亡及其机制

目的观察丙戊酸钠（VPA）对胃癌细胞系BGC-823的生长抑制及诱导凋亡作用．并通过检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（caspase3、caspase8、caspase9）的活性和蛋白表达变化探讨VPA诱导凋亡的可能机制。方法M1Tr法检测细胞生长抑制、Annexin V／PI双染检测细胞凋亡、间接免疫荧光法分析caspase3、caspase8、caspase9蛋白变化，分光光度法检测caspase3、caspase8、caspase9活性改变。结果VPA0．75～4．00mmol／L干预BGC-823细胞24h和48h后，细胞生长被明显抑制，细胞凋亡率显著增加[VPA0．75mmol／L，24h时细胞凋亡率为（7．2±0．5）％，48h时为（9．2±1．0）％；VPA4．00mmol／L，24h时为（16．7±2．2）％，48h时为（20．4±1．6）％]，与对照组[24h时细胞凋亡率为（4．9±0．2）％，48h时为（5．1±0．8）％]比较．差异有统计学意义（P〈0．001），并呈时间、剂量依赖趋势；caspase3、caspase9蛋白表达被明显上调．活性升高．与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．001）。caspase8活性及蛋白表达在VPA作用24h后未见明显改变，48h后仅轻度增加。结论VPA可明显抑制胃癌细胞的生长并诱导其凋亡，而且该作用主要通过激活caspase9介导的内源性凋亡途径实现；caspase8介导的外源性细胞凋亡途径未参与或仅部分参与了该诱导过程。