重组Pichia pastoris的发酵条件初步研究

在摇瓶中进行重组Pichia pastoris菌株SIBAS 5071发酵条件的研究,考察了碳源、底物、pH、磷酸盐浓度、溶氧量等对该菌细胞生长和产生S-腺苷甲硫氨酸(sAM)的影响,初步确定的优化条件下发酵3 d后,SAM产量可达2.3 g/L(118 mg/g干细胞).     

不同来源壳聚糖的基本特性及红外光谱研究

用同一方法在相同条件下，分别以螯虾壳、河虾壳、对虾壳、海蟹壳和蚕蛹制备了壳聚糖，并对其多项特性进行了比较研究。壳聚糖的收率分别为螯虾１３．６％、海蟹１２．３％、对虾１０．５％、河虾８．７０％、蚕蛹１．８％；灰份含量接近（０．２５～０．４５％）；脱乙酰度相近（７６～８０％）；壳聚糖的粘均分子量分别为：螯虾１２．８×１０６、河虾１．１５×１０６、海蟹１．０６×１０６、对虾０．９６×１０６、蚕蛹０．９１×１０６。五种壳聚糖的红外光谱基本相似，只存在个别峰值、峰位的差异，表明五种壳聚糖的基本结构相同，但其空间构象和结晶度等方面存在差异。     

壳聚糖多孔珠作为亲和吸附剂载体纯化人尿胰蛋白酶抑制剂

ＵＴＩ粗品经壳聚糖多孔珠－胰蛋白酶亲和层析,得到比活为１３５０Ｕ／ｍｇ,收率为４０．２％ＵＴＩ组分,再经Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－１００凝胶过滤,发现存在四种分子形式,其相对分子质量分别为６７０００,４３０００,２３０００,１６０００。其中,１６０００的无ＵＴＩ活性。亲和层析提纯得到的ＵＴＩ的热稳定性比原尿中的ＵＴＩ的热稳定性要差。     

S-腺苷甲硫氨酸的稳定性及其稳定性盐

S—腺苷甲硫氨酸是生物体内重要的中间代谢物质，参与多种生化反应，具有广泛和多样的治疗作用，但其内在的不稳定性在很大程度上限制了它在临床上的应用。文章主要介绍了S—腺苷甲硫氨酸的失活机理、稳定化理论及其新型稳定性盐。     

凝血酶的结构及其变构特性

凝血酶(Thrombin,EC3.4.21.5)是一种多功能丝氨酸蛋白水解酶,具有与胰凝乳蛋白酶相似的序列与结构。它含A、B两条多肽链,由一个链间二硫键相连。B链为功能链,具有典型的丝氨酸蛋白水解酶折叠结构,含有1个位于两个β折叠桶之间的活性中心,2个外结合位点(Exosite Ⅰ、Exosite Ⅱ)。1个Na 离子结合位点,一个自我催化水解环(Autolysis Loop)以及一个W60d环(W60dLoop)。凝血酶具有Na 离子诱导的变构酶特性,在血液中有Na 离子结合型和Na 离子解离型两种构象。这两种构象是可以相互转化的。其相互转化的部分机理是由于效应因子或底物结合到凝血酶的特定位点而引起酶构象发生变化和能量转移,从而改变了Na 离子结合与解离的平衡状态。