雷帕链霉菌次级代谢产物及其生物合成的研究进展

摘要：雷帕链霉菌(Streptomyces rapamycinicus)是一种重要的工业菌株,主要用于生产新型大环内酯类抗生素——雷帕霉 素。该抗生素具有抗真菌、抗肿瘤、免疫抑制和抗衰老等众多生物活性,临床上主要用作器官移植的免疫抑制剂以及抗肿瘤药 物。全基因组测序表明,雷帕链霉菌野生型菌株NRRL5491基因组全长12.7Mb,编码多达48个次级代谢产物生物合成基因簇(共 长达3Mb),证明其具备强大的次级代谢潜力。除雷帕霉素以外,至今已有多种活性天然产物被鉴定,包括放线菌酸、尼日利亚 菌素、洋橄榄叶素、安莎类抗生素和六烯类抗生素等,相关合成基因簇及其生物合成途径已被解析。本文将就雷帕链霉菌中各 种次级代谢产物的生物学功能、生物合成基因簇及其生物合成过程等研究进展进行总结梳理,并就如何更好挖掘雷帕链霉菌中 的活性天然产物进行简单展望与讨论。     

3-硝基-5-(6-溴己酰胺)苯甲酸的合成及其作为头孢菌素酰化酶产生菌筛选指示剂的研究

为筛选头孢菌素Ｃ酰化酶产生菌,由环己酮和３－硝基－５－乙酰胺基苯甲酸出发,合成了一种新的生色物质３－硝基－５－（６－溴己酰胺）苯甲酸（３－Ｎｉｔｒｏ－５－（６－ｂｒｏｍｏｈｅｘａｎｏｙｌａｍｉｎｏ）ｂｅｎｚｏｉｃａｃｉｄ,ＮＢＨＡＢ）。通过红外光谱法、核磁共振法、质谱法鉴定了其结构。ＧＬ－７ＡＣＡ酰化酶和青霉素Ｇ酰化酶（ｐｅｎｉｃｉｌｉｎＧＡｃｙｌａｓｅ,ＰＧＡ）及其产生菌对该化合物的作用表明,该物质能够检测头孢菌素酰化酶活力,用来筛选头孢菌素Ｃ酰化酶产生菌,其灵敏性有待进一步提高。     

雷帕霉素生物合成及其分子调控的研究进展

雷帕霉素是一种 31 元大环内酯类抗生素,由雷帕链霉菌 (Streptomyces rapamycinicus)、游动放线菌 N902-109 (Actinoplanes sp. N902-109)与伊氏链霉菌(Streptomyces iranensis)等放线菌菌株产生,具有广泛的生物活性,包括抗真菌、免疫抑制、 抗肿瘤、神经保护和抗衰老等,市场应用前景非常广阔。目前,其生物合成途径已被清楚解析,研究证实它由一种杂合 I 型聚 酮合酶 (PKS, polyketide synthase)/ 非核糖体肽合成酶 (NRPS, nonribosomal peptide synthetase) 负责合成。基因簇全长约 107.3kb, 共含有 26 个基因,其中 5 个编码调控蛋白,参与调控雷帕霉素的生物合成。鉴于雷帕霉素及其衍生物在临床上的重要用途,其 生物合成及其分子调控一直是大家的关注点,并取得了长足的进展,为雷帕霉素高产菌株的分子育种及新活性衍生物的挖掘奠 定了良好的基础。本文将主要总结雷帕霉素生物合成基因簇、生物合成途径及其分子调控机制方面的研究进展,并将就该重要 抗生素的发现及其衍生物的功能、高产菌株育种等方面的研究进行简单回顾。     

原核生物中的信号传导与次生代谢

在原核生物中有2类蛋白激酶调节细胞的生长及分化,它们是双组份信号传导系统和丝氨酸／苏氨酸激酶,它们以原核生物的次级代谢途径具有全局性的调节作用;这种调节作用突出地表现在对抗生素产生的调节,天蓝色链霉菌中的丝氨酸／苏氨酸激酶afsK,afsR基因中断实验结果表明,afsK,afsR的中断使放线菌素的产量下降;同时双组份信号传导系统afsQ`/afsQ2对放线菌素的产生也具有调控作用,而天蓝色链霉菌中双组份信号传导系统absA1/absA2,及absB则不仅调节放线菌素的产生,而且还调节其它3种抗生素－十一碳灵菌红素,亚甲霉素和钙依赖型抗生素的产生,在假单胞菌中,GacS/GacA通过一系列复杂调节信号的级联作用机制来实现其对一系列抗生素产生的调节。     

毫米波治疗颞下颌关节紊乱综合征的临床分析

随着科学技术的不断发展 ,毫米波技术在生物医学领域中得到了广泛应用 ,且成为很重要的一个方面。我们从 1 995年开始采用毫米波治疗仪局部照射治疗颞下颌关节紊乱综合征 ( TMJDS)患者 67例 ,取得了令人满意的效果。现将我们的临床应用分析总结如下。1　材料和方法1 .1　病例选择本科自 1 995年开始分别对 97例 TMJDS患者(经摄 X线片检查无颞颌关节器质性病变 )进行治疗 ,临床表现以颞下颌关节区疼痛 ,张口受限、关节弹响为主要症状。其中 67例行毫米波治疗 (实验组 ) :男性 2 7例 ,女性 40例 ;治疗时间最短 1个疗程 ,最长 2个疗程。 3…     

高龄老人人工全髋关节置换术的术中护理

总结了2011-2013年近60例高龄老人行全髋关节置换术的术中手术配合护理。术前做好心理护理,术中密切配合手术医生及麻醉医生,病人输液确保手术顺利、安全完成。     

复方锌洁粘贴片治疗口腔粘膜炎症的临床疗效观察

目的 :观察复方锌洁粘贴片治疗口腔粘膜炎症的效果。方法 :用随机法将 63例门诊口腔粘膜炎症患者分成两组 ,用单盲法给药。实验组用复方锌洁粘贴片 ,对照组用安慰剂。结果 :实验组治疗有效率为 98 4 2 % ,对照组治疗有效率为68 2 5 %。两组比较差异有显著性 (p <0 0 1)。结论 :复方锌洁粘贴片有消炎、止痛及收敛的作用 ,临床观察疗效显著。     

血小板计数和凝血四项检测在肾病综合征患者中的意义

目的:通过对凝血酶原时间(PT),活化部分凝血活酶时间(APTT),血浆纤维蛋白原(FIB)凝血酶时间(TT)四项及血小板数量(PLT)的检测,探讨肾病综合征患者这些指标的变化及其临床意义。方法:选取2013年1月到2015年3月就诊于我院并确定为肾病综合征的83例患者为论文研究组;选取同期到我院进行健康体检的正常人65例作为对照组,并对各项结果与对照组进行比较分析。结果:肾病综合征组与正常对照组比较PT、APTT明显缩短(P0.01),有显著统计学意义;TT缩短(P0.05),无统计学意义;FIB、PLT明显升高(P0.01),有显著统计学意义。结论:肾病综合征(NS)患者在临床中常常伴有高凝状态,因此及早检测凝血与血小板参数可以有效的监测本病,预防肾病综合征患者血栓形成。     

酰亚胺酶法制备普瑞巴林中间体(R)-3-异丁基戊二酸单酰胺

目的 利用重组酰亚胺酶催化3-异丁基戊二酸亚胺(3-isobutylglutaric anhydride, IBI)的去对称化水解，制备普瑞巴林的重要中间体(R)-3-异丁基戊二酸单酰胺[(R)-3-isobutyl glutaric acid monoamide,(R)-IBM]。方法 构建酰亚胺酶BpIH基因工程菌pT67/BL21(DE3),并在摇瓶和3 L发酵罐上进行表达，细胞均质后用于底物IBI的转化反应，提取及精制得到产物(R)-IBM,并测定其色谱纯度、对映体过剩值和相对分子质量。结果与结论酰亚胺酶BpIH得到了较好的表达，3 L发酵罐中的酶活达到了1 880 mU·L^-1,利用该酶液进行IBI的转化，产物(R)-IBM的质量浓度达到了49.11 g·L^-1,转化率和提取收率分别达到了90.9%和68.74%,产物的对映体过量值达到了99.96%,该工艺路线已经具备了替代常规酶拆分路线的基础。