9型腺相关病毒转染乳鼠心肌细胞的可行性及安全性

背景：9型腺相关病毒对心肌细胞具有更好的靶向转染,是目前研究基因治疗心脏疾病的理想载体。目的：探索9型腺相关病毒体外转染乳鼠心肌细胞的可行性及对乳鼠心肌细胞的毒性评估。方法：分离培养原代乳鼠心肌细胞,以携带荧光蛋白基因的9型腺相关病毒为载体,将分离纯化的乳鼠心肌细胞分为正常培养组、无病毒转染组、病毒转染组。结果与结论：第1周细胞搏动频率及百分率正常培养组和病毒转染组与无病毒转染组比较,差异无显著性意义（P〉0.05）,但正常培养组高于病毒转染组（P〈0.05）;3周后各组比较,差异无显著性意义（P〉0.05）。经9型腺相关病毒转染的心肌细胞24h开始有表达,4~6d荧光最强,3组细胞72h内不同时间点还原比率均接近于1.0。说明9型腺相关病毒能成功有效地转染乳鼠心肌细胞,对乳鼠心肌细胞无明显毒性作用。     

尼可地尔预防经皮冠状动脉介入治疗患者造影剂相关急性肾损伤的研究进展

随着影像学和经皮冠状动脉介入治疗的快速发展, 造影剂的应用也越来越广泛, 造影剂相关急性肾损伤也成为临床最常见的急性肾损伤病因之一。造影剂相关急性肾损伤严重威胁患者的健康以及会给患者带来更大的经济负担, 因此预防造影剂相关急性肾损伤的发生尤为重要。尼可地尔是一种临床中常见的血管舒张药物, 广泛应用于心绞痛的治疗, 具有对抗氧化应激、抗细胞凋亡、抗炎症和扩张血管等作用, 被认为能有效预防造影剂相关急性肾损伤。但目前关于尼可地尔预防造影剂相关急性肾损伤的疗效研究仍缺少更深入的研究。     

9型腺相关病毒转染乳鼠心肌细胞的可行性及安全性

背景:9型腺相关病毒对心肌细胞具有更好的靶向转染,是目前研究基因治疗心脏疾病的理想载体。目的:探索9型腺相关病毒体外转染乳鼠心肌细胞的可行性及对乳鼠心肌细胞的毒性评估。方法:分离培养原代乳鼠心肌细胞,以携带荧光蛋白基因的9型腺相关病毒为载体,将分离纯化的乳鼠心肌细胞分为正常培养组、无病毒转染组、病毒转染组。结果与结论:第1周细胞搏动频率及百分率正常培养组和病毒转染组与无病毒转染组比较,差异无显著性意义(P>0.05),但正常培养组高于病毒转染组(P<0.05);3周后各组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。经9型腺相关病毒转染的心肌细胞24h开始有表达,4~6d荧光最强,3组细胞72h内不同时间点还原比率均接近于1.0。说明9型腺相关病毒能成功有效地转染乳鼠心肌细胞,对乳鼠心肌细胞无明显毒性作用。     

9型腺相关病毒转染乳鼠心肌细胞的可行性及安全性**☆

背景：9型腺相关病毒对心肌细胞具有更好的靶向转染,是目前研究基因治疗心脏疾病的理想载体。 目的：探索9型腺相关病毒体外转染乳鼠心肌细胞的可行性及对乳鼠心肌细胞的毒性评估。 方法：分离培养原代乳鼠心肌细胞,以携带荧光蛋白基因的9型腺相关病毒为载体,将分离纯化的乳鼠心肌细胞分为正常培养组、无病毒转染组、病毒转染组。 结果与结论：第1周细胞搏动频率及百分率正常培养组和病毒转染组与无病毒转染组比较,差异无显著性意义(P > 0.05),但正常培养组高于病毒转染组(P < 0.05);3周后各组比较,差异无显著性意义(P > 0.05)。经9型腺相关病毒转染的心肌细胞24 h开始有表达,4~6 d荧光最强,3组细胞72 h内不同时间点还原比率均接近于1.0。说明9型腺相关病毒能成功有效地转染乳鼠心肌细胞,对乳鼠心肌细胞无明显毒性作用。     

基因修饰干细胞治疗缺血性心脏病的现状与前景

背景：基因技术联合干细胞植入治疗缺血性心脏病是继单纯干细胞治疗后的一大热点.目的：归纳总结基因修饰及干细胞治疗缺血性心脏病的研究现状.方法：计算机检索PubMed数据库中2000-01/2010-12期间相关文献,检索词为 ＂genetic,stem cells,myocardial infarction＂.选择与基因修饰联合干细胞治疗缺血性心脏病密切相关的的29篇文献进行综述.结果与结论：不同功能的基因对干细胞和/或周围环境进行修饰,改善干细胞及相应的性状,以提高移植干细胞的存活能力、促进缺血心肌及周围的血管新生、改善血管顺应性、增加与宿主心肌细胞的耦联、增强干细胞趋化归巢作用等,提高干细胞治疗缺血性心脏病的效果.随着基因技术与干细胞应用的不断发展,可能在缺血性心脏的临床治疗方面得到广泛的应用.     

基因修饰干细胞治疗缺血性心脏病的现状与前景

背景:基因技术联合干细胞植入治疗缺血性心脏病是继单纯干细胞治疗后的一大热点.目的:归纳总结基因修饰及干细胞治疗缺血性心脏病的研究现状.方法:计算机检索PubMed数据库中2000-01/2010-12期间相关文献,检索词为 "genetic,stem cells,myocardial infarction".选择与基因修饰联合干细胞治疗缺血性心脏病密切相关的的29篇文献进行综述.结果与结论:不同功能的基因对干细胞和/或周围环境进行修饰,改善干细胞及相应的性状,以提高移植干细胞的存活能力、促进缺血心肌及周围的血管新生、改善血管顺应性、增加与宿主心肌细胞的耦联、增强干细胞趋化归巢作用等,提高干细胞治疗缺血性心脏病的效果.随着基因技术与干细胞应用的不断发展,可能在缺血性心脏的临床治疗方面得到广泛的应用.     

乳鼠心肌组织中细胞周期素A2的定位及表达

背景：细胞周期素A2是调节细胞周期的关键因子,关于细胞周期素A2在乳鼠心肌中的表达及定位情况还不明确。 目的：探索细胞周期素A2在C57乳鼠中的表达定位及表达,检测心肌细胞中增殖相关蛋白随着细胞周期素A2的表达而呈现的表达趋势。 方法：C57乳鼠分别于出生后0,3,7,14,28 d处死,留取心肌组织,行Western blot检测心肌组织中细胞周期素A2、增殖细胞核抗原及磷酸组蛋白H3的表达情况。免疫组化检测细胞周期素A2在出生后乳鼠中的定位及增殖细胞核抗原在心肌组织中的表达。 结果与结论：C57乳鼠出生后细胞周期素A2表达水平逐渐下调,直至第14天基本消失(P=0.001),且细胞周期素A2在乳鼠出生后0 d定位于细胞核中,在第14天时主要存在于细胞质中,至第28天时,基本消失。增殖细胞核抗原在出生后0 d表达最强,随后表达逐渐减弱。而反映有丝分裂期的特异性蛋白磷酸组蛋白H3随时间表达逐渐减少,且表达强度基本与细胞周期素A2表达减弱相一致。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程全文链接：     

基因修饰干细胞治疗缺血性心脏病的现状与前景**

背景：基因技术联合干细胞植入治疗缺血性心脏病是继单纯干细胞治疗后的一大热点。 目的：归纳总结基因修饰及干细胞治疗缺血性心脏病的研究现状。 方法：计算机检索PubMed数据库中2000-01/2010-12期间相关文献,检索词为 “genetic,stem cells,myocardial infarction”。选择与基因修饰联合干细胞治疗缺血性心脏病密切相关的的29篇文献进行综述。 结果与结论：不同功能的基因对干细胞和/或周围环境进行修饰,改善干细胞及相应的性状,以提高移植干细胞的存活能力、促进缺血心肌及周围的血管新生、改善血管顺应性、增加与宿主心肌细胞的耦联、增强干细胞趋化归巢作用等,提高干细胞治疗缺血性心脏病的效果。随着基因技术与干细胞应用的不断发展,可能在缺血性心脏的临床治疗方面得到广泛的应用。     

乳鼠心肌组织中细胞周期素A2的定位及表达

背景：细胞周期素A2是调节细胞周期的关键因子,关于细胞周期素A2在乳鼠心肌中的表达及定位情况还不明确。 目的：探索细胞周期素A2在C57乳鼠中的表达定位及表达,检测心肌细胞中增殖相关蛋白随着细胞周期素A2的表达而呈现的表达趋势。 方法：C57乳鼠分别于出生后0,3,7,14,28 d处死,留取心肌组织,行Western blot检测心肌组织中细胞周期素A2、增殖细胞核抗原及磷酸组蛋白H3的表达情况。免疫组化检测细胞周期素A2在出生后乳鼠中的定位及增殖细胞核抗原在心肌组织中的表达。 结果与结论：C57乳鼠出生后细胞周期素A2表达水平逐渐下调,直至第14天基本消失（P=0.001）,且细胞周期素A2在乳鼠出生后0 d定位于细胞核中,在第14天时主要存在于细胞质中,至第28天时,基本消失。增殖细胞核抗原在出生后0 d表达最强,随后表达逐渐减弱。而反映有丝分裂期的特异性蛋白磷酸组蛋白H3随时间表达逐渐减少,且表达强度基本与细胞周期素A2表达减弱相一致。     

重组9型腺相关病毒介导细胞周期蛋白A2基因转染小鼠心肌的研究

目的探讨重组9型腺相关病毒介导细胞周期蛋白A2基因经尾静脉注射后转染小鼠心肌的可行性及安全性。方法雄性C57BL／]~鼠随机分为病毒基因转染组和单纯生理盐水组。两组小鼠分别通过尾静脉注射病毒稀释液或等体积的生理盐水,分别于注射2周及4周后处死小鼠。Western印迹检测小鼠心脏、肝脏、肺脏和肾脏中细胞周期蛋白A2的表达,以评价腺相关病毒介导目的基因转染的靶向性。免疫组织化学检测细胞周期蛋白A2在心肌细胞中的表达及定位。检测增殖相关蛋白在各器官中的表达,明确转染后是否引起其他器官过度增殖,以评价其安全性。结果细胞周期蛋白A2转染2周后在小鼠心脏开始出现表达,第4周呈稳定表达,而对照组细胞周期蛋白A2的表达则相对较少（2周：0．13％±0．01％比25．97％±2．24％,4周：0．14％±0．02％比73．70％±3．10％）,两组比较差异均有统计学意义（均为P〈0．05）。而两组小鼠肝脏、肺脏、肾脏中细胞周期蛋白A2的表达差异无统计学意义（均为P〉0．05）。细胞周期蛋白A2转染心肌后主要定位于心肌细胞胞质中,胞核中较少表达。转染心肌组织后,增殖细胞核抗原（PCNA）表达增加（2周：13．10％±0．54％比65．80％±3．44％,4周：12．90％±0．34％比71．20％±1．58％）,两组比较差异均有统计学意义（均为P〈0．05）。而有丝分裂特异性蛋白磷酸化组蛋白H3（H3P）在两组中的表达差异无统计学意义（均为P〉0．05）。PCNA在肝脏、肾脏、肺脏中的表达差异无统计学意义（均为P〉0．05）。结论重组9型腺相关病毒介导细胞周期蛋白A2基因可靶向转染小鼠心肌,并能重新启动心肌细胞的细胞周期进程,且转染后不会引起其他器官的过度增殖,具有安全性及可行性。