检测百日咳黏着素的酶联免疫吸附法的建立及初步应用

 目的  建立定量检测白喉-破伤风-无细胞百日咳疫苗生产过程中黏着素（pertactin, Prn）的方法。 方法   纯化的Prn免疫家兔以制备高效价血清抗Prn抗体。辛酸-硫酸铵沉淀法纯化抗Prn多克隆抗体并进行辣根过氧化物酶标记,建立双抗体夹心ELISA法。 结果   建立的方法与丝状血凝素和百日咳毒素无交叉反应,特异性较好。该ELISA法在1.25~80 .00 μg/L Prn测量区间有最佳线性,相关系数＞0.99。实验内和实验间检测64、32、16 μg/L Prn,变异系数为2.6%~7.7%,回收率为84.9%~95.5%,精密度和准确度均符合常规质控要求,因此该法的定量限度为16 μg/L。 结论   建立的ELISA法可有效检测百日咳疫苗纯化过程中的Prn含量,为组分百日咳疫苗质量控制奠定了重要基础。