腹腔镜胆囊切除术严重并发症的因素分析及防治

自1987年3月法国的妇科医师Philipe Mouret成功的完成了世界上第一例临床腹腔镜胆囊切除术(laparoscopic cholecystectomy,LC)以来,腹腔镜胆囊切除术(LC)至今已在许多国家得到广泛的应用.随着腹腔镜技术的不断提高,设备和器械的不断更新、改进和完善,使得LC这项技术日益成熟,且因其具有创伤小、痛苦轻、术后恢复快等优点而倍受青睐,目前已成为症状性胆石病的金标准术式[1].但是,由于LC本身具有一定的局限性,其并发症仍然高于开腹胆囊切除术(open cholecystectomy OC),出血、胆道损伤、胆漏是该术式的严重并发症,其中胆道损伤为最主要的严重并发症,并在术后给患者的生活质量带来严重影响[2].有关这些严重并发症的预防及处理亦是各家腹腔镜外科学者探讨的难点和热点.现将此作一综述.     

雷贝拉唑服药频次对缓解反流性食管炎症状的比较研究

目的比较雷贝拉唑两种服药频次对缓解反流性食管炎症状的影响,进一步探讨反流性食管炎的治疗方案。方法 241例胃镜确诊的反流性食管炎患者,随机分为2组,甲组给予雷贝拉唑10 mg每日2次服药,乙组给予雷贝拉唑20 mg每日1次服药。4周后比较各组患者烧心及反流症状的缓解情况。结果甲组121例患者全部有烧心症状,82例有反流症状;乙组120例患者全部有烧心症状,84例有反流症状。治疗后甲组97例患者烧心症状缓解(缓解率80.2%);乙组79例患者烧心症状缓解(缓解率65.8%),2组比较差异有统计学意义(χ2=6.283,P0.05)。甲组70例反流症状缓解(缓解率85.4%);乙组67例反流症状缓解(缓解率79.8%),2组比较差异无统计学意义(χ2=0.904,P0.05)。结论雷贝拉唑10 mg每日2次服药,对烧心症状的缓解优于雷贝拉唑20 mg每日1次服药;2种服药频次对反流症状的疗效无明显差别。     

芹菜素对H2O2诱导人肝细胞L02氧化损伤模型的影响

目的探索芹菜素对H_2O_2致人肝细胞L02损伤模型的保护作用。方法以H_2O_2诱导L02细胞建立氧化损伤模型,CCK-8法检测细胞存活率,DCFH-DA法检测细胞活性氧的生成,试剂盒检测细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)活性,Hoechst染色观察细胞凋亡情况,试剂盒检测caspase-3的活性。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果芹菜素浓度为≥20μmol/L时对L02细胞的增殖有显著抑制作用(P值均001);与空白对照组L02细胞活力相比,500μmol/L及以上的H_2O_2浓度均可使细胞活力极显著降低(P值均0.001),500μmol/L为H_2O_2的建模浓度;模型组细胞活力与空白对照组相比差异显著(P0.01),与模型组相比,芹菜素5、10μmol/L组细胞存活率显著提高(P值均0. 01);空白对照组细胞状态较好,模型组细胞间收缩变圆,细胞破损变形严重,芹菜素5μmol/L组与模型组相比,明显得到改善,变圆破损细胞较少;空白对照组、模型组、芹菜素5μmol/L组3组间相对荧光强度比较差异有统计学意义(1. 00±026 vs 32.94±1. 29 vs 13. 49±1. 23, F=1.10,P0. 001),模型组相对荧光强度较空白对照组明显增强(P0. 001),芹菜素/L组与模型组比较,芹菜素可明显清除H_2O_2诱发的ROS(P0.001);模型组中LDH和MDA水平均明显升高,SOD水平明显降低,与正常对照组相比差异均有统计学意义(F值分别为3.21、2.03、3.32,P值均0. 05),芹菜素(5μmol/L)处理后,与模型组相比,LDH和MDA水平均明显降低,SOD水平明显升高(P值均0. 05);空白对照组、模型组、芹菜素5μmol/L组3组间细胞凋亡率比较差异有统计学意义(7. 54%±0. 52%vs 39. 77%±3. 44%vs 14. 40%±0. 79%,F=9.44,P 0. 01);模型组细胞凋亡率显著高于对照组(P 0. 01);给与芹菜素处理后,相比于模型组凋亡率明显降低(P0. 01);空白对照组、模型组、芹菜素5μmol/L组3组间caspase-3活性比较差异有统计学意义[(4. 38±0. 59)U/mg vs(16. 44±1. 13)U/mg vs(10. 60±1. 04)U/mg,F=1.17,P005],模型组细胞caspase-3活性与对照组相比明显增强(P 005),芹菜素处理后,相比于模型组caspase-3活性明显降低(P005)。结论芹菜素可能通过消除ROS的生成、降低caspase-3活性对H_2O_2诱导的L02细胞损伤产生保护作用。     

FXR调控下Bsep在高脂血症大鼠胆固醇代谢中的作用机制

目的探讨在法尼基衍生物X受体(FXR)调控下胆盐输出泵(Bsep)在高脂血症大鼠胆汁酸及胆固醇代谢中的作用,为高脂血症的预防和治疗提供新的理论基础和治疗靶点。方法使用Wistar大鼠60只,随机分为2组,每组30只,实验组饲养高脂饮食,对照组饲养普通饮食。喂食3个月,定期测定大鼠体质量情况,并取血用自动生化仪检测与脂类相关生化指标,待成功建立高脂血症大鼠模型后,取实验组和对照组肝脏组织,石蜡包埋切片后用免疫组化SP法检测2组大鼠肝脏组织的FXR及Bsep表达强度。结果实验组大鼠各脂类相关生化指标含量高于对照组(P<0.05);免疫组化SP法结果显示,实验组与对照组FXR表达阳性率、Bsep表达阳性率比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论以FXR及Bsep为靶点可为高脂血症及其相关疾病找到新的治疗依据和方向。     

miR-377-5p 通过下调HIF-1α 及其相关VEGF 信号通路抑制肝细胞癌HepG2 细胞的增殖和侵袭

目的：探讨miR-377-5p 与缺氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1,HIF-1α）的靶向关系以及通过控血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor, VEGF）信号通路对肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）细胞增殖、侵袭和EMT的调控作用。方法：qPCR检测35 例人HCC组织及癌旁组织标本中miR-377-5p 的表达水平。将HepG2 细胞分为对照组、mimic NC组、miR-377-5p mimic 组,qPCR 检测转染效率;EdU染色、Transwell 和Western blotting（WB）检测miR-377-5p 过表达对HepG2 细胞增殖、侵袭及其增殖相关蛋白Ki-67、增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）及上皮间质转化（epithelial-mesenchymaltransition,EMT）标志蛋白E-cadherin、N-cadherin 表达的影响;qPCR、WB检测miR-377-5p 过表达对HepG2 细胞中,缺氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α）表达的影响。荧光素酶报告基因实验验证miR-377-5p 与HIF-1α 基因的靶向关系。结果：HCC 组织中miR-377-5p 表达水平较癌旁组织降低（P<0.01）。与对照组相比,miR-377-5p mimic 组HepG2细胞中miR-377-5p 水平明显升高,细胞的增殖、侵袭能力降低（均P<0.01）,EMT、N-cadherin 表达水平降低（均P<0.01）而E-cadherin 表达水平显著升高（P<0.01）;miR-377-5p mimic 组中HIF-1α mRNA 和蛋白表达水平均降低（P<0.01 或P<0.05）。miR-377-5p 靶向抑制HIF-1α 基因表达,并抑制VEGF通路的激活（均P<0.05）。结论：miR-377-5p 通过靶向抑制HIF-1α 基因表达和下调VEGF信号通路从而抑制HepG2 细胞的增殖、侵袭和EMT。     

专业学位研究生临床技能培训模式改革的研究——以腹腔镜手术操作虚拟培训系统为例

目的 探讨腹腔镜手术操作虚拟培训系统在专业学位研究生临床技能培训中应用的效果.方法 随机抽取40名外科学专业学位研究生,随机分为A、B两组.其中A组按传统模式培养,B组采用虚拟培训系统的培训模式培养.经20学时培训后进行考核评分.结果 通过理论培训及腹腔镜手术操作虚拟培训系统培训后,经过虚拟培训系统培训后的研究生对于腹...     

血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C早期诊断梗阻性黄疸患者肾功能损伤的临床研究

目的：探讨检测血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂（cystatin C,Cys C）对早期诊断梗阻性黄疸患者肾功能损害的意义。方法：测定84例梗阻性黄疸患者的24h肌酐清除率（24h CCr）,血清肌酐（SCr）以及血清Cys C水平,并以CCr〈80mL.min-1.1.73m-2作为肾功能损害诊断标准,采用χ2检验、相关性分析和ROC曲线分析Cys C的诊断价值。结果：84例患者中共31例出现CCr下降,其中Cys C水平有26例上升,而仅有18例SCr出现异常。Cys C对CCr的评估效能优于SCr（P〈0.05）,相关性分析提示在梗阻性黄疸患者中,Cys C与SCr和CCr均有显著负相关性（CysC：r=-0.801,P〈0.001;SCr：r=-0.594,P〈0.001）。ROC曲线分析显示Cys C的曲线下面积（AUC）值明显高于SCr（0.841比0.622）。结论：Cys C较SCr能更为准确和迅速地反映梗阻性黄疸患者的肾功能损害;常规监测该类患者的Cys C水平,对有效防治梗阻性黄疸导致的急性肾功能衰竭具有积极意义。     

缺血预处理对肝缺血再灌注时细胞凋亡及调控基因表达的影响

目的探讨缺血预处理对肝脏细胞凋亡的影响以及与调控基因bcl-2／bax蛋白表达的关系。方法将家兔分为假手术（SO）组、缺血再灌注（IK）组，缺血预处理（IP）组。后2组中再分为4个亚组（IR3h、12h、24h和48h组。IP3h、12h、24h和48h组）。缺血期均为60min。缺血预处理为缺血前采用5min缺血及5min再灌注的方法。分别于再灌注3、12、24和48h后处死动物采取肝脏标本，SO组于手术后24h采取肝标本。检测细胞凋亡及bcl-2／bax蛋白表达水平。结果IR组和IP组与SO组比较，细胞凋亡指数（AI）增加差异有显著性（P〈0.01）；IP组中IP3h、12h和24h较同时间段IR组细胞凋亡指数降低差异有显著性（P〈0.05）；bcl-2蛋白表达：IP组与IR组及SO组比较，增高差异有显著性（P〈0.05）；bax蛋白表达：IR组和IP组与SO组比较增加差异有显著性（P〈0.05）。结论缺血预处理可能通过激活bcl-2蛋白的表达，改变bcl-2／bax表达比例从而抑制肝细胞凋亡。     

缺血预处理影响兔肝缺血再灌注时细胞凋亡及调控基因Bcl-2／Bax表达的研究

摘要目的：探讨缺血预处理对肝脏细胞凋亡的影响以及与调控基因Bcl-2／Bax蛋白表达的关系。方法：90只新西兰兔被随机分为4组：假手术（SO）组、缺血再灌注（IR）组,缺血预处理（IP）组。IR和IP组进行60min的全肝缺血后恢复灌注。而IP组在缺血前采用5min缺血及5min再灌注的方法进行缺血预处理。两组又根据再灌注后处死动物,标本采集时间点分为4个亚组（IR3h,IR12h,IR24h,IR48h和IP3h,IR12h,IR24h,IR48h）,SO组于手术后24h采取肝标本。所有标本进行HE染色后光镜镜检,TUNEL法检测细胞凋亡及免疫组化检测Bcl-2／Bax基因表达水平。结果：HE染色证实,经预处理后肝脏组织损伤明显较IR组减轻。IR组和IP组与SO组比较,细胞凋亡指数（AI）差异有显著统计学意义（P〈0．01）;IP组中IP3h,IR12h,IR24h较同时间段IR组细胞凋亡指数差异有显著性降低（P〈0．05）;IP48h与IR48h相比,凋亡指数无统计学意义（P〉0．05）。Bcl-2蛋白表达：IP组与IR组及SO组比较,差异有显著统计学意R（P〈0．05）;IR组与SO组比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。Bax蛋白表达：IR组和Ip组与SO组比较,差异有显著性增高（P〈0．05）;IP组与IR组比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：缺血预处理可能通过激活Bcl-2蛋白的表达,改变Bcl-2／Bax表达比例从而抑制肝细胞凋亡。