基于DiR脂质体荧光探针验证柴胡“引药入肝”靶向性研究

目的 制备 DiR(1,1''-dioctadecyl-3,3,3'',3''-tetramethylindotricarbocyanine iodide)脂质体荧光探针(DiR-LP),研究柴胡作为引经药对其在小鼠体内分布的影响,初步验证柴胡引药入肝性能。方法 薄膜分散法制备 DiR-LP,以包封率为主要指标,通过单因素试验确立 DiR-LP 最佳处方与制备工艺,并进行表征。30只SPF级昆明种小鼠随机分为5组:对照组、DiR-LP组和柴胡水提液低、中、高剂量(0.5、1.0、2.0 mg·kg^-1)+DiR-LP组,柴胡水提液+DiR-LP组小鼠预先连续3 d 按10mL·kg^-1体积ig相应的柴胡水提液,对照组和DiR-LP组小鼠 ig 相同体积的生理盐水;除对照组外,各组小鼠以 10 mL·kg^-1尾iv DiR-LP,对照组小鼠尾 iv 相同剂量的生理盐水;利用小动物活体成像仪在不同时间点(4、5、6、8 h)拍照,示踪小鼠体内DiR-LP 的分布情况;8 h 时经解剖取出心、肝、脾、肺、肾等器官进行拍照,观察各器官的荧光强度。结果 DiR-LP 最佳处方与制备工艺:精密称取大豆卵磷脂 120 mg、胆固醇 12 mg、DiR 0.375 mg 于 100 mL 茄形瓶中,加入 10 mL 无水乙醇溶解,于40℃恒温水浴中,30 r·min^-1旋转减压蒸发1h,形成均匀透明薄膜;再加入聚山梨酯80 12mg、溶于纯净水10mL,于150r·min^-1旋转常压水化 1 h 后,置于冰水浴中超声 10 min(功率 100 W),分别过 0.45、0.22 μm 微孔滤膜整粒 3 次,即得 DiRLP。制得的 DiR-LP 包封率为 95.2%,粒径为 254.1 nm,聚合物分散性指数(PDI)为 0.196,Zeta 电位-5.21 mV,14 d 内无沉淀或浑浊现象。DiR-LP 经尾 iv 后主要在肝脏中分布,柴胡水提液+DiR-LP 组肝脏部位荧光信号明显比 DiR-LP 组强,且荧光信号强度与柴胡水提液剂量呈正相关。结论 使用薄膜分散法制备的 DiR-LP 包封率高、粒径适宜、稳定性较好;在小鼠体内,柴胡对 DiR-LP 具有肝脏导引作用,且与剂量相关,初步验证了柴胡"引药入肝"的肝靶向性。