吸入布地奈德对哮喘大鼠IL-4、IL-10、IFN-γ水平的影响

目的探讨哮喘大鼠IL-4、IL-10、IFNγ-水平以及布地奈德的干预作用。方法将30只W istar大鼠随机分组(n=10):模型组(A组)采用卵白蛋白致敏与激发;空白对照组(C组),以生理盐水代替OVA;布地奈德组(B组),第六次诱发哮喘结束后30 m in采用布地奈德混悬液雾化吸入2周。模型组和空白对照组以等量生理盐水代替。检测细胞因子IL-4、IL-10、IFNγ-的水平。结果 A组大鼠单核细胞培养上清中IL-4的水平明显高于C组(P<0.05),IL-10、IFNγ-水平明显低于C组(P<0.05);B组大鼠单个核细胞培养上清中IL-4的水平明显低于A组(P<0.05),IL-10、IFNγ-水平明显高于A组(P<0.05)。结论细胞因子IL-4、IL-10、IFNγ-参与哮喘发病的病理生理过程,吸入布地奈德能够有效改善Th1/Th2动态平衡,减轻哮喘的发作。     

丙泊酚预处理减轻大鼠心肌缺血/再灌注损伤与其抑制线粒体通透性转换的关系

目的 观察丙泊酚预处理减轻大鼠心肌缺血／再灌注损伤与其抑制线粒体通透性转换的关系。方法建立大鼠在体心脏局部缺血／再灌注模型,成年雄性SD大鼠随机进入4组（n=8）：假手术组（Sham组）;缺血再灌注组（IR组）,结扎LADCA（1eftanterior descending coronaryartery,LADCA）60min后放松120min;二甲亚砜组（DMSO组）和丙泊酚预处理组（PP组）,结扎LADCA前20min经股静脉分别注射注射20μmol·L^-1二甲基亚砜和丙泊酚1mg·kg^-1·min^-1共20min。结果再灌注120min后,PP组凋亡指数（24．35±2．35）％明显低于IR组（33．38±3．47）％（P〈0．05）;DMSO组心肌细胞凋亡指数与IR组无明显差异（P〉0．05）。电镜下IR组线粒体微观结构损伤严重,膜电位较Sham组显著降低（0．25±0．06vs0．91±0．24,P〈0．05）。PP组线粒体形态学改变明显减轻,膜电位（0．67±0．13）显著高于IR组（P〈0．05）。DMSO组则没有线粒体保护作用。结论丙泊酚预处理可减轻大鼠心肌缺血／再灌注损伤,其机制与抑制线粒体通透性转换有关。     

右美托咪定通过lncRNA H19介导香烟提取物诱导的肺泡巨噬细胞效应研究

目的探索右美托咪定(Dexmedetomidine,DEX)通过长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)H19对香烟烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE)诱导的RAW264.7巨噬细胞活力、凋亡和自噬的影响。方法制备CSE及CSE干预巨噬细胞模型,运用体外细胞培养,DEX以不同浓度(2、4和8μmol/L)作用于CSE诱导的巨噬细胞,采用MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测模型细胞的凋亡率,采用蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞中凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2及自噬相关蛋白LC3Ⅱ和ATG7表达情况,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测H19表达水平;为了进一步验证DEX对CSE诱导的巨噬细胞增殖、凋亡和自噬影响,运用双酶切法构建pcDNA3.1-H19表达载体。结果一定剂量的DEX可明显拮抗CSE诱导的巨噬细胞活力下降作用(P<0.05),具有浓度依赖性;DEX抑制CSE诱导的巨噬细胞凋亡,且细胞中凋亡蛋白Bax明显下调(P<0.05),抗凋亡蛋白Bcl-2上调(P<0.05),自噬相关蛋白LC3Ⅱ和ATG7表达上调(P<0.05),H19表达下调(P<0.05);成功构建pcDNA3.1-H19表达载体,DEX作用于CSE诱导的巨噬细胞,细胞活力明显降低(P<0.05),且细胞中凋亡蛋白Bax上调(P<0.05),抗凋亡蛋白Bcl-2下调(P<0.05),自噬相关蛋白LC3Ⅱ和ATG7表达下调(P<0.05)。结论DEX抑制H19表达,增强CSE诱导的巨噬细胞活力,抑制细胞凋亡和自噬。     

吸入布地奈德对哮喘大鼠肺组织嗜酸粒细胞趋化因子及受体表达水平的影响

目的观察吸入布地奈德对哮喘大鼠肺组织嗜酸粒细胞趋化因子及受体表达水平的影响。方法将30只Wistar大鼠随机分组(n=10):模型组(A组)采用OVA致敏与激发;空白对照组(C组),以生理盐水代替OVA;布地奈德组(B组),第6次诱发哮喘结束后30 min采用BUD混悬液雾化吸入2周。模型组和空白对照组以等量生理盐水代替。肺组织嗜酸性粒细胞(EOS)计数,测定肺组织Eotaxin蛋白、CCR3蛋白表达水平。结果布地奈德组大鼠肺组织EOS计数明显低于模型组[(8.87±3.21)vs(11.53±4.50),P0.05]。哮喘大鼠肺组织中有大量的Eotaxin蛋白、CCR3蛋白表达,布地奈德组大鼠肺组织Eotaxin蛋白、CCR3蛋白表达明显减少。空白对照组在上述部位仅少量表达或不表达。结论 Eotaxin及其受体CCR3参与哮喘的发病机制,布地奈德雾化吸入治疗哮喘与其抑制Eotaxin及其受体CCR3表达有关。     

静脉注射托烷司琼对椎管内麻醉后感觉、运动神经阻滞的影响

目的探讨静脉注射托烷司琼对椎管内麻醉后感觉、运动神经阻滞的影响。方法椎管内麻醉下行经尿道电切术患者60例,随机均分为实验组和安慰剂组。实验组于麻醉前15 min静脉注射托烷司琼,安慰剂组静脉注射安慰剂。记录麻醉的最高脊髓水平、起效时间、运动神经阻滞水平、消退时间以及术中、术后感觉。同时记录不良反应。结果实验组平均手术时间明显低于安慰剂组。实验组感觉神经阻滞时间明显高于安慰剂组;2组运动神经阻滞时间、麻醉起效时间和运动、感觉恢复时间无统计学差异(P>0.05)。结论静脉注射托烷司琼不影响重比重布比卡因椎管内麻醉的起效时间、麻醉深度及维持时间,能够安全用于预防和处理麻醉相关的恶心、呕吐等不良反应。     

儿泻停颗粒联合蒙脱石散治疗小儿肺炎合并腹泻随机平行对照研究

[目的]观察儿泻停颗粒联合蒙脱石散治疗小儿肺炎合并腹泻疗效。[方法]使用随机平行对照方法,将200例门诊患者按就诊顺序号随机分两组。对照组100例蒙脱石散,1岁1.0g,3次/d;1~2岁,1.5g;3次/d,温开水拌匀冲服。治疗组100例儿泻停颗粒,1~6个月(0.5g/次),7~48个月(1.0g/次),3次/d,开水冲服;蒙脱石散治疗同对照组。连续治疗5d为1疗程。观测临床症状、不良反应。治疗1疗程,判定疗效。[结果]治疗组显效52例,有效38例,无效10例,总有效率90.00%;对照组显效37例,有效42例,无效21例,总有效率79.00%;治疗组疗效优于对照组(P0.05)。[结论]儿泻停颗粒联合蒙脱石散治疗小儿肺炎合并腹泻,疗效满意,无严重不良反应,值得推广。     

静脉泵入特布他林缓解小儿哮喘重度急性发作的疗效观察

目的:观察静脉泵入特布他林缓解小儿哮喘重度急性发作的疗效。方法:将36例哮喘重度急性发作的患儿随机分组(n=18),对照组给予特布他林加异丙托溴铵联合雾化吸入,泼尼松龙静脉注射1~2 mg/(kg·d),年长儿单次不超过60 mg,疗程3~5 d;观察组在以上治疗基础上给予特布他林0.5 mg加入生理盐水100 ml中,以0.002 5 mg/min的速度缓慢静脉泵入。对照组用等量生理盐水静脉泵入。观察两组患儿给药1 h后发作症状和呼吸功能参数,包括喘鸣,用力呼吸、意识模糊、PEF%、Pa O2、PCO2。结果:观察组临床总有效率和肺功能指标明显高于对照组(P<0.05)。结论:静脉泵入特布他林抢救小儿急性重度哮喘,明显改善了患儿的呼吸功能,提高了治疗的总有效率。     

复氧前后抑制线粒体通透性转换对心肌细胞低氧/复氧损伤的影响

目的观察复氧前后抑制线粒体通透性转换（MPT）对心肌细胞低氧/复氧损伤的影响。方法新生SD大鼠心肌细胞原代培养48h后按孔随机分为空白对照组、低氧/复氧组、复氧前处理组和复氧后处理组,分别在复氧前、后10min给予1μmol/L环胞菌素A,复氧50min后用激光共聚焦显微镜观察MPT,复氧120min后采用流式细胞术和western blotting法分别观察心肌细胞凋亡和线粒体Cyt C释放。结果与低氧/复氧组比较,复氧前处理组细胞MPT明显减弱,细胞凋亡程度明显减轻,线粒体Cyt C释放显著减少。而复氧后处理组与低氧/复氧组比较差异无统计学意义。结论复氧前抑制线粒体通透性转换可以减轻心肌细胞低氧/复氧损伤,复氧后抑制线粒体通透性转换不能产生细胞保护作用。     

复灌同时环孢素A处理可减轻大鼠心肌缺血/再灌注损伤

目的观察复灌时线粒体通透性转换（mitoehondria permeability transition,MPT）抑制剂环孢素A（Cyclosporine A,CsA）对心肌缺血／再灌注损伤的影响。方法建立Langendofff逆行灌注离体心脏局部缺血／再灌注模型,成年雄性SD大鼠随机进入4组（n=8）：假手术组（sham组）常规灌注1．5h,缺血／再灌注组（I／R组）,缺血30min,再灌注1h,CsA处理1组（CsA1组）,复灌同时采用1μmol·L^-1 CsA灌注心肌,CsA处理2组（CsA2组）,复灌10min后采用1μmol·L^-1 CsA灌注心肌。结果复灌60min后,I／R组RPP、dp／dtmax、ap／dt min均有明显下降（P〈0．05 vs Sham）,心肌发生了严重的梗死（P〈0．05）,电镜下线粒体微观结构损伤严重,western blotting测定大量cyt C释放到胞浆。CsA1组可以明显减轻上述心肌损害（P〈0．05）CsA2组则没有心肌保护作用。结论复灌同时环孢素A处理可抑制线粒体通透性转换,减轻心肌缺血／再灌注损伤,再灌注后环孢素A处理则无心肌保护作用。     

线粒体通透性转运孔道模型的研究进展

由于很多实验结果不能通过传统的mPTP模型得到圆满的解释,最近人们逐渐接受一些新的假说：线粒体内膜存在两种胛孔道——可调控的胛孔道（regulated PT pores）和不可调控的胛孔道（unregulated PT pores）,兼性蛋白簇集、CYPD及其他未明确的分子伴侣复合体构成可调控的胛孔道,当兼性蛋白簇集大量生成,分子伴侣不足以抑制其开放时,线粒体胛孔道由可调控状态变为不可调控状态。