宫颈癌患者外周血树突状细胞的体外扩增和鉴定

 目的 探索体外扩增宫颈癌患者外周血来源的成熟树突状细胞(denelritic cell，DC)的方法，并鉴定DC的形态、结构、表型及生物学活性。方法 淋巴细胞分离液分离宫颈癌患者外周血，得到DC前体细胞(PBMC)，以(3M-CSF、IL-4、TNF-α诱导培养。用光镜和透射电镜观察形态结构，流式细胞仪检测细胞表面特异性分子，MTT法测定DC刺激T细胞增殖的活性。结果 联合应用细胞因子可诱导扩增出源自宫颈癌患者外周血的成熟DC，具有典型形态特征，较高表达HLA-DR、CD1a、CD80，能强烈激发同种异体T细胞增殖反应。结论 宫颈癌患者外周血体外培养可成功获得成熟的DC，为开展宫颈癌临床免疫治疗奠定了基础。     

31卷4期疑难病案

<正>患者27岁,因发现宫腔内占位1+年,月经周期延长3月于2014年10月13日入院。2013年9月6日曾因"阴道流血1+月,扪及下腹包块半月"至我院,妇科B超检查提示:子宫大小140 mm×99 mm×83 mm,宫内见大小约79 mm×43 mm异常回声,内以无回声为主,其间有大小不等的蜂窝状无回声。彩色多普勒血流成像(CDFI)检查示其内见血流信号,RI 0.55。     

阿司匹林对卵巢癌SKOV3细胞株的增殖和凋亡研究

目的观察阿司匹林（acetylsalicylic acid,ASA）对卵巢癌细胞SKOV3增殖和凋亡的影响。方法采用免疫组化法观察ASA对人卵巢癌细胞系SKOV3中COX-2基因蛋白和癌基因C-erbB-2的表达,流式细胞仪检测ASA对SKOV3细胞周期的影响,透射电镜观察ASA作用SKOV3细胞中凋亡情况。结果ASA,可以明显降低癌基因C-erbB-2在SKOV3细胞中的表达,流式细胞仪结果显示：ASA对SKOV3细胞周期改变有影响,透射电镜发现在ASA作用下的SKOV3细胞有凋亡小体和坏死细胞形成。结论ASA对卵巢癌SKOV3细胞株具有抑制作用,能够对卵巢癌的防治发挥作用。     

全反式维甲酸对异位子宫内膜间质细胞GJIC功能的调节作用

0 引言 间隙连接细胞间通讯（gap junctional intercellular communication,GJIC）是多细胞生物体内最普遍的通讯方式．人子宫内膜异位症（endometriosis,EMs）异位内膜间质细胞的GJIC功能缺陷,与EMs的发病密切相关．已有研究发现全反式维甲酸（all—trans retinoi cacid,ATRA）可上调某些肿瘤细胞的GJIC功能,但有关ATRA调节异位内膜间质细胞GJIC功能的报道较少．我们建立异位内膜间质细胞的体外模型,采用荧光漂白后恢复技术检测ATRA对异位子宫内膜间质细胞GJIC功能的调节作用,以探讨ATRA用于EMs治疗的可能性．     

子宫内膜样癌组织中HGF/c-Met的表达及其与细胞增殖、血管生成的关系

目的:研究肝细胞生成因子HGF及其受体c- Met在子宫内膜样癌组织中的表达及其与肿瘤细胞增殖、血管生成的关系。方法:应用免疫组化S- P法,检测52例子宫内膜样癌、22例正常子宫内膜组织中HGF、c -Met表达,并结合肿瘤的增殖细胞指数、微血管密度,对结果进行统计学分析。结果: 1.子宫内膜样癌组织中HGF及c- Met表达较正常子宫内膜组织明显增高(P<0 .05); 2.c Met表达越强,子宫内膜样癌的期别越晚、分化越低; 3.子宫内膜样癌组织中,HGF和c -Met表达阴性、阳性、强阳性组中,PCNA指数、微血管密度依次升高,差异有显著性(P<0. 05)。结论:HGF、c- Met过度表达与子宫内膜样癌的发生发展有关;c Met可作为子宫内膜样癌的预后指标之一;HGF/c -Met可促进肿瘤细胞增殖及血管生成。     

三氧化二砷、顺铂对人卵巢癌细胞株SKOV3黏附、转移能力的影响

目的 体外观察三氧化二坤(As2O3)、顺铂(DDP)单用和合用对SKOV3细胞黏附、转移等生物学行为的影响及相关机制探讨。方法 采用直接计数法检测As2O3、DDP作用于SKOV3细胞48h后对细胞黏附能力的影响，计算相对黏附率。采用免疫细胞化学法观察As2O3、DDP作用48h后，SKOV3细胞CD44V6、E-cad、MMP2表达的改变。结果 (1)As2O3、DDP单用或合用均能明显减弱SKOV3细胞的黏附能力，且具有浓度依赖性。联合组作用强于单用药物组。(2)As2O3能轻微上调SKOV3细胞E-cad蛋白的表达，降低MMP2表达，明显降低CD44V6蛋白的表达，DDP及联合组也能降低CD44V6及MMP2蛋白的表达，但对E-cad蛋白的表达无影响。结论 As2O3、DDP均能明显抑制SKOV3细胞的黏附能力，其抑制机制与二者下调CD44V6、MMP2表达有关，而As2O3还能同时上调E-cad蛋白表达使癌细胞不易脱落播散。     

HPV16 E7和Brn-3a在宫颈癌前病变中的表达及其意义

 目的研究HPV16E7和Brn3a在各级宫颈癌前病变(CIN)中的表达情况以及两者之间的关系,从分子生物学水平探讨其作为宫颈癌前病变的特异性标志物的可能性,以期寻找新的宫颈癌前病变筛查方法。方法对71例患者行宫颈薄层细胞学检查(ThinprepCellTest,TCT),并在阴道镜下组织学活检,其TCT残留标本,用RTPCR法检测各标本中HPV16E7和Brn3a的表达。结果HPV16E7和Brn3a表达按细胞学分级和病理学分级其阳性率呈逐级增高趋势,差异均有显著性(P<0.0001)。两者作为宫颈癌前病变和HPV活化状态的诊断标志物,其结果是一致的(P<0.05)。结论TCT残留标本适合进行RTPCR分析研究。HPV16E7可作为宫颈癌前病变和HPV活化状态的生物标志物。Brn3a可作为可靠的CIN3生物标志物和HPV致癌基因转录活化的标志物。HPV16E7和Brn3a相互作用,可能为宫颈高度癌变发展的原因之一。     

ATRA调节人异位子宫内膜间质细胞GJIC Connexin基因、蛋白的作用及意义

目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)对人异位子宫内膜间质细胞间隙连接细胞间通讯(GJIC)、connexin基因、蛋白的调节作用及意义。方法:取24例子宫内膜异位症患者卵巢处异位内膜标本,分离纯化得到间质细胞,分别用0.1mmol/L、1mmol/L、10mmol/LATRA处理24h、48h、72h、96h、120h,同时设置空白对照组,采用荧光漂白后恢复技术检测异位内膜间质细胞的GJIC功能,并检测与GJIC功能密切相关的Cx43、Cx26、Cx32的基因及蛋白表达。结果:ATRA处理72h内,1mmol/L、10mmol/L组的异位内膜间质细胞荧光恢复功能明显增强;0.1mmol/LATRA组的异位内膜间质细胞荧光恢复功能无明显变化。未经ATRA处理的异位内膜间质细胞中无Cx43、Cx26、Cx32的mRNA及蛋白表达;经1mmol/LATRA处理后,异位内膜间质细胞中检测到Cx43mRNA和蛋白表达,但未见Cx26、Cx32的mRNA及蛋白表达。结论:ATRA能选择性地诱导Cx43基因及蛋白表达,从而有效上调异位内膜间质细胞的GJIC功能;ATRA可能是治疗子宫内膜异位症的潜在药物。     

P63基因与宫颈癌及癌前病变

宫颈癌是妇科最常见的恶性肿瘤之一,其发生发展是多因素综合作用的结果,涉及细胞生长发育和基因改变的复杂过程.目前,对肿瘤发生机制的研究表明,癌基因与抑癌基因对细胞增殖与凋亡调节的平衡失调是细胞癌变的重要因素.P63基因是抑癌基因P53家族的新成员,能激活P53相关靶基因,参与细胞凋亡过程,在肿瘤的发生及细胞生长发育中起重要作用.现将P63基因与宫颈癌及癌前病变的关系综述如下.     

宫颈胚胎性横纹肌肉瘤1例

患者，20岁，学生，未婚，有性生活史半年。因阴道不规则流血1年余，于2006年5月31日入院。患者发病期间前半年在院外长期以月经失调治疗，曾给予雌孕激素周期治疗3个疗程，症状无缓解，之后未予正规诊治，于今日来我院治疗。查体示：T37℃，P82次／min，BP116／78mmHg。发育正常，营养良好，全身浅表淋巴结未扪及肿大，心肺正常，腹部平坦，腹软，无压痛及反跳痛，肝、脾于肋下均未触及。妇科检查示：外阴发育正常，阴道畅，宫颈前唇可见约3cm×2cm×2cm大小葡萄状新生物，色灰红，实性，质脆软，触血，表面组织易脱落。子宫中位，正常大小，活动好，双侧附件区未触及明显异常。B超检查：宫颈异常回声，宫颈外口见23mm×20mm×20mm低回声光团，