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1.
目的 为构建生物人工肝进行肝细胞的准备。方法 采用胶原酶半原位灌流法分离单个乳猪肝细胞,并对其活力及单层和聚集培养后的白蛋白、尿素合成功能进行检测。结果 采用本方法从每头乳猪中分离到的单个肝细胞数为(3.1±1.5)×10~(10),活性超过95%。在加入激素和生长因子的培养基中单层培养时,肝细胞功能良好,可维持2周左右。而在未加入激素和生长因子的培养中肝细胞虽能存活1周,但功能于24h后即丧失。球形聚集培养可实现肝细胞的大量培养,且生物学活性较单层培养显著提高。结论 采用胶原酶半原位灌注法所得单个乳猪肝细胞基本能满足构建生物人工肝对肝细胞数量的要求。聚集培养接种密度大,细胞生物学活性高,可用于构建生物人工肝。 相似文献
2.
目的:探讨HBcAg显性失活突变体质粒pCDNA4-C-GFP的构建及体外表达。方法:选择编码乙肝核心抗原C基因片段及绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因片段,利用基因重组技术构建成DNA质粒pCDNA4-C-GFP,并将该质粒转染肝癌细胞株HepG2。结果:通过RT-PCR检测到其RNA的表达,Confocal观察到GFP绿色荧光。结论:HBcAg显性失活突变体质粒pCDNA4-C-GFP的构建成功可以进行对HBV作用的研究。 相似文献
3.
4.
扶正化瘀胶囊干预慢性乙型肝炎肝纤维化作用的多中心临床研究 总被引:28,自引:8,他引:20
目的 研究扶正化瘀胶囊治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的临床疗效及其安全性。方法 多中心、随机、双盲、平行对照的方法 ,入选年龄 18~ 65岁的慢性乙型肝炎肝纤维化患者。试验药 (扶正化瘀胶囊 )和对照药 (和络舒肝胶囊 ) ,均为每次 5粒 ,3次 /d口服 ;疗程 2 4周。疗程结束后进行 12周的随访。观测指标 :(1)于治疗第 0、2 4周观察肝组织病理学、HBV标志物 ,第 0、12、2 4周检测肝纤维化血清指标 (HA、LN、P Ⅲ P、Ⅳ C)、B超肝脾检查 ,第 0、6、12、18、2 4周观察肝功能 (随访期评价肝功能、血清肝纤维化指标 )。 (2 )安全性指标 :治疗前、后检测血、尿常规 ,肾功能 ,心电图。结果 (1)受试者入组情况及人口学资料 :试验组 110例 ,对照组 10 6例 ,两组病例人口学特征、生命体征、病程、药物过敏史、既往治疗史、肝功能、纤维化血清学指标、肝组织病理学 (试验组 99例 ,对照组 96例 )、HBV标志物、肾功能等各项指标比较 ,无显著差异。 (2 )肝组织病理学 :治疗前后作活检肝组织学观察 93例 ,试验组 50例和对照组 43例治疗前纤维化分期 (S)均值分别为 2 .3 3和 2 .11。试验组治疗后S均值为 1.80 ,较治疗前显著下降。对照组治疗后S均值为 2 .14 ,与治疗前比较无显著改善。试验组活检肝组织纤维化分期判断 相似文献
5.
扶正化瘀胶囊治疗慢性乙型肝炎疗效观察 总被引:6,自引:0,他引:6
目的:探讨扶正化瘀胶囊治疗慢性乙型肝炎的效果。方法:慢性乙型肝炎42例随机分为扶正化瘀胶囊治疗组和安慰剂对照组,治疗组28例,对照组15例,两组均每次1.5克,每日3次,连服6个月。动态观察临床表现、生化指标和肝纤维化指标。结果:治疗组治疗3、6个月ALT复常率分别为59.26%(16/27例)和66.67%(18/27例),对照组则分别为33.33%(5/15例)和53.33%(8/15例),治疗组均高于对照组。扶正化瘀胶囊对于血清肝纤维化指标(透明质酸、IV型胶原)也有改善。用药3个月治疗组和对照组血清肝纤维化指标的显效率分别为48.15%、13.33%,用药6个月显效率分别为59.26%、20%,3、6个月两组比较均有显差异(P<0.01)。结论:扶正化瘀胶囊能降低ALT,改善或延缓肝纤维化的进程。 相似文献
6.
Caspase-12在D-氨基半乳糖联合脂多糖诱导小鼠急性肝功能衰竭中的表达及作用 总被引:6,自引:0,他引:6
目的探讨Caspase-12在D-氨基半乳糖(D-Gal)/脂多糖(LPS)诱导小鼠急性肝功能衰竭发生发展过程中表达水平的变化及Caspase-12介导的内质网应激肝细胞凋亡途径在急性肝功能衰竭中的作用。方法以D-Gal/LPS联合腹腔注射诱导小鼠急性肝功能衰竭建立实验模型,在不同时间点动态检测血清氨基转移酶水平和观察肝组织病理变化,评估肝细胞凋亡和肝坏死演变过程;应用琼脂糖凝胶电泳检测肝细胞DNA凋亡条带;用半定量逆转录聚合酶链反应检测肝组织中Caspase-12 mRNA表达水平;west- ern blot检测Caspase-12、Bip/GRP78蛋白表达。结果药物诱导5h时肝组织中典型凋亡细胞增多,血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)开始升高,Caspase-12 mRNA表达明显增加, Caspase-12蛋白量表达反而减少;7h镜下出现大量肝细胞凋亡和坏死,ALT、AST水平达高峰,分别为(2564±1384)U/L和(1198±497)U/L,正常对照组为(59±17)U/L和(135±12)U/L,Caspase- 12 mRNA表达仍增加,Caspase-12蛋白表达量继续降低;9h 肝细胞坏死明显,伴散在凋亡细胞,ALT、AST水平明显下降,Caspase-12 mRNA表达较7 h下降。Bip/GRP78蛋自表达从5 h开始,至7 h逐渐增加。结论D-Gal/LPS诱导小鼠急性肝功能衰竭早期Caspase-12 mRNA表达水平逐渐升高,后期(7-9 h)降低,与肝细胞凋亡发生的时相一致;Caspase-12蛋白酶因内质网应激而被大量活化,提示Caspase-12介导的内质网应激肝细胞凋亡参与炎症性急性肝功能衰竭的发生发展,是急性肝功能衰竭中肝细胞损伤的重要机制之一,提示早期干预Caspase-12表达及活化对急性肝功能衰竭可能具有保护作用。 相似文献
7.
血浆置换治疗慢性重型肝炎机制探讨 总被引:4,自引:2,他引:4
近年来,人工肝支持系统(ALSS)的临床应用受到广泛研究。我院引进日本产 PLASAUTO-IQ 中间型人工肝支持系统采用血浆置换疗法,治疗慢性重型肝炎34例,现将结果报告如下。1 临床资料1.1 病例来源 59例慢性重型肝炎(慢重肝)为2001年9月-2002年12月该院住院患者。诊断符合2000年全国病毒性肝炎及肝病学术会议(西安)修订的标准诊断。随机分人工肝治疗组34例(男25例,女9例。年龄19~72 相似文献
8.
肝脏是体内分解及转化各种氨基酸的重要器官。除亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸主要在肌肉内分解外,几乎所有的必需氨基酸都在肝脏内进行氧化分解。因而在肝功能严重损害时,常可引起血清中氨基酸的增减与各种氨基酸之间比例的变化。近年来文献中已有关于急性肝炎、酒精性肝病、慢性活动性肝炎(简称慢活肝) 相似文献
9.
肝活检的临床应用进展 总被引:11,自引:0,他引:11
肝活检是评估肝病性质、病变程度及治疗效果的最特异的手段。本文就肝活检的指征、并发症及其处理的研究进展作一综述 ,对临床医师合理、安全应用肝活检具有一定的指导意义。Ehrlish于 1883年在德国施行了首例经皮肝活检[1] 。 195 8年Menghini报道“一秒钟针刺肝活检”后 ,该操作得到了广泛应用。目前肝活检的方法有 :经皮肝活检、经颈静脉肝活检、腹腔镜肝活检以及在B超或CT引导下细针抽吸活检。活检标本 ,长度为 1~ 3cm ,直径 1 2~ 2mm ,占整个肝组织的 1/ 5 0 0 0 0。 1 5cm长的标本即足以诊断弥漫性肝病 ,但… 相似文献
10.
目的 探讨雄激素和雄激素受体(AR)对肝癌细胞株PEG10表达的调控作用.方法 设计合成针对人ARsiRNA,并转染HepG2和7404肝癌细胞株.用双氢睾丸酮(DHT)干预HepG2细胞.Western Blot检测AR和PEG10表达水平.结果 从3对AR siRNA中筛选到1对siRNA(AR siRNA-3),它在2种肝癌细胞株中均可有效抑制AR的表达,其抑制作用呈剂量依赖关系.2种肝癌细胞株中,浓度为240 nmol/L的AR siRNA-3在转染后24 h,对AR抑制效率可达80%以上,且抑制效果可持续至72 h.AR siRNA-3转染24h后PEG10表达水平降低,转染48 h后,PEG10表达水平降低非常明显,72 h后PEG10表达有所上升.DHT可促进HepG2细胞PEG10的表达,呈剂量依赖关系.DHT对AR表达未见明显作用.结论 雄激素和AR参与了肝癌细胞株PEG10表达的调控.这可能是男性肝细胞癌发病率较高的原因之一. 相似文献