MTA3在肝细胞癌中的表达及意义

目的探讨肝细胞癌组织及肝癌细胞中MTA3的表达情况及其对肝癌细胞增殖的影响。方法采集临床肝细胞癌样本,应用定量PCR和免疫组织化学方法,检测MTA3的表达,同时在多种人肝癌细胞株中应用定量PCR检测MTA3的表达;使用MTA3的干扰siRNA转染人肝癌细胞株HepG2和Huh7,分别采用CCK-8实验和克隆形成实验检测下调MTA3表达对人肝癌细胞增殖的影响。结果 MTA3在肝细胞癌组织中表达水平显著升高(P<0.05),在肝细胞癌组织中其阳性表达率显著高于癌旁非癌组织(P<0.01),人肝癌细胞株HepG2和Huh7中的MTA3表达水平显著高于正常肝细胞株L02(P<0.01),构建两个MTA3的si RNA干扰效率均在50%左右,转染siRNA-MTA3后,人肝癌细胞株HepG2和Huh7的增殖受到显著抑制(P<0.05)。结论 MTA3作为促癌基因参与了肝细胞癌的发生,成功构建了MTA3的干扰siRNA,干扰MTA3能有效抑制肝癌细胞的增殖,MTA3有望成为肝细胞癌靶向治疗的新靶点。     

经皮黄疸指数与微量血胆红素值的相关研究

８０例足月正常新生儿出生１－１３天采用经皮黄疸指数仪测黄疸指数，足跟采血测胆红素，结果，两者数值呈直线相关。     

白藜芦醇对急性肝损伤小鼠NLRP3炎性体表达的影响

目的观察白藜芦醇对急性肝损伤(acute liver injury,ALI)小鼠Nod样受体家族3(Nod-like receptor 3,NLRP3)炎性体表达的影响,探讨白藜芦醇对ALI的保护作用及其机制。方法本实验采用四氯化碳制作ALI小鼠模型。将雄性ICR小鼠随机分成正常对照组、模型组、白藜芦醇低、中、高剂量组及阳性对照组,每组7只。白藜芦醇低、中、高剂量组及阳性对照组于造模前24 h及1 h分别腹腔注射剂量为10、20及30 mg/kg的白藜芦醇或剂量为100 mg/kg的乙酰半胱氨酸,对照组及模型组在相应时间点腹腔注射等量生理盐水,造模时模型组及各药物干预组采用腹腔注射5%四氯化碳,对照组腹腔注射等量橄榄油。采用蛋白质印迹(Western blot,WB)法测定小鼠肝组织NLRP3、凋亡相关微粒蛋白(apoptosis-associated speck-like protein contain,ASC)、炎性半胱天冬酶-1(caspase-1)蛋白,酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测炎症因子白介素(interleukin,IL)-1β及IL-18,全自动生化分析仪测定小鼠肝功能,病理组织学观察肝脏损伤情况及其程度。结果模型组小鼠谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)及谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)水平高于正常对照组(P<0.01);白藜芦醇各剂量组及阳性对照组小鼠ALT及AST水平均低于模型组(P<0.01)。模型组小鼠肝脏炎症积分及损伤面积均高于正常对照组(P<0.01);白藜芦醇各剂量组及阳性对照组小鼠肝脏炎症积分及损伤面积均低于模型组(P<0.05或P<0.01)。模型组小鼠NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β及IL-18表达高于正常对照组(P<0.01);白藜芦醇各剂量组及阳性对照组小鼠NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β及IL-18表达均低于模型组(P<0.05或P<0.01)。病理组织切片显示,模型组小鼠肝细胞结构表现为胞浆疏松,小叶内坏死灶较多,坏死灶中可见中性粒细胞浸润;白藜芦醇各剂量组及阳性对照组小叶内坏死灶及中性粒细胞浸润等改变较模型组减少,肝细胞的受损面积较小。结论白藜芦醇可以显著减轻四氯化碳诱导的ALI,其机制可能与抑制NLRP3炎性体活化及其下游炎症级联反应有关。     

基于网络药理学研究柴胡疏肝散治疗急性胰腺炎的作用机制

目的:基于网络药理学,筛选柴胡疏肝散(CSS)化学成分和潜在作用靶点,探究其治疗急性胰腺炎(AP)可能的作用机制。方法:采用TCMSP数据库检索、筛选CSS中七味中药柴胡、川芎、香附、白芍、枳壳、陈皮、甘草的主要活性成分及对应蛋白靶标。通过Drugbank和TTD数据库收集已知调控AP的蛋白靶标,与成分对应蛋白相对应,筛选出共有基因作为候选预测靶标。采用String数据库对预测靶标进行基因本体(GO)功能分析以及KEGG通路富集分析,Discovery studio 3.0软件对候选活性成分与候选靶标进行虚拟对接。利用Cytoscape 3.7.2绘制“成分-靶标”和“蛋白-通路”网络图。结果:通过口服利用度(OB)、类药性(DL)、药物半衰期(HL)筛选CSS全方成分,共得68个活性成分。网络分析表明,CSS中的柴胡皂苷C、柴胡皂苷D、叶酸、柚皮苷、橙皮苷和甘草苷可能通过癌症、PI3K-Akt、细胞凋亡、AGE-RAGE等信号通路来调控BCL2L1、PTGS2、MCL1、RAF1、IL-6、AKT1等25个靶点治疗急性胰腺炎。结论:建立CSS-AP-靶点互作网络来诠释多成分-多靶点-多途径的复杂机制,为进一步研究CSS治疗AP的作用及分子机制提供了新思路和新方向。     

逍遥散联合恩替卡韦对肝郁脾虚型乙型肝炎肝硬化代偿期患者纤维化及铁代谢的影响

目的 观察逍遥散联合恩替卡韦对肝郁脾虚型乙型肝炎肝硬化代偿期患者的肝纤维化指标、门静脉压力的影响,比较正常人及肝郁脾虚型乙型肝炎肝硬化代偿期患者治疗前后血清中铁代谢相关指标,并初步探讨联合用药的作用机制.方法 采用随机数字表法将72例患者分为两组,各36例,治疗组予逍遥散联合恩替卡韦治疗,对照组仅予恩替卡韦治疗,两组疗...     

白藜芦醇通过调控肝脏生物钟改善CCl4诱导的小鼠肝纤维化

[目的] 观察白藜芦醇（Res）对四氯化碳（CCl4）诱导的小鼠肝纤维化（HF）的干预作用及其对肝脏生物钟的调节效应。[方法] 本实验采用雄性C57BL/6小鼠,将小鼠按体质量随机分成对照组、模型组、白藜芦醇组,每组10只。模型组及白藜芦醇组按2.5mL/kg腹腔注射体积分数为20% CCl₄油剂溶液进行造模,一周两次,连续4周,对照组按同等剂量同等频次给予腹腔注射橄榄油。白藜芦醇以生理盐水稀释呈终浓度为30mg/kg进行腹腔注射干预,每日1次,连续4周,对照组及模型组给予等量生理盐水按同等频次腹腔注射。4周后处死小鼠并收集血清及肝组织样本。采用病理组织切片苏木精-伊红（HE）染色、马松（Masson）染色、天狼星红（Sirius Red）染色观察肝纤维化情况,全自动生化分析仪测定小鼠血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）活性,免疫组织化学检测肝脏α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、I型胶原（COL-1）评估肝纤维化程度,实时聚合酶链反应（RT-PCR）、蛋白质印迹法（Westernblot）检测肝脏生物钟基因Clock、脑和肌肉芳香烃受体核转运样蛋白1（Bmal1）、周期基因1（Per1）周期基因2（Per2）、隐花色素1（Cry1）、隐花色素2（Cry2）的表达。[结果] 模型组与对照组相比,肝功能指标如ALT、AST、LDH等均显著升高;病理切片HE染色提示模型组汇管区纤维组织增生,肝小叶间胆管明显增生,部分分割包绕肝小叶使其结构紊乱,Masson染色及Sirius Red染色提示模型组汇管区胶原沉积显著增多,免疫组化显示α-SMA、COL-1阳性面积显著增多;RT-PCR及Western lot结果显示肝脏生物钟基因Clock、Bmal1、Per1、Per2、Cry1、Cry2的mRNA及蛋白表达均显著下降。白藜芦醇干预后可显著逆转上述指标变化。[结论] 白藜芦醇可显著减轻CCl₄诱导的小鼠肝纤维化,及机制可能与调控肝脏生物钟基因有关。     

逍遥散及其功效拆方对慢性铁过载诱导的肝纤维化的影响

目的通过制作慢性铁过载诱导的大鼠肝纤维化模型,观察逍遥散对肝纤维化的改善作用及对体内铁代谢过程的影响,并通过功效拆方研究,探索逍遥散中疏肝药、健脾药、养血药在整方疗效中的作用及地位。方法 通过腹腔注射右旋糖酐铁50 mg/kg/d,连续7周制作慢性铁过载诱导的大鼠肝纤维化模型,药物干预在造模同时每日通过灌胃的方式给予逍遥散全方、逍遥散去疏肝药、逍遥散去健脾药、逍遥散去养血药、去铁胺（DFO）。使用全自动生化分析仪检测血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、血清铁（SI）、铁蛋白（SF）水平;肝组织进行病理组织学检测,包括HE染色、Masson染色、苦味酸-天狼星红染色等;免疫组化检测肝组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA）、I型胶原蛋白（COL-1）的表达水平;采用火焰原子吸收光谱法检测大鼠肝组织铁含量。结果 与对照组比较,模型组大鼠肝功能ALT、AST明显升高,病理切片HE染色符合肝纤维化镜下表现,Ishak纤维化评分显著升高,Masson染色、苦味酸-天狼星红染色可见胶原纤维沉积明显,免疫组化结果提示肝组织内α-SMA、COL-1表达显著上升,血清铁、铁蛋白、肝脏总铁含量均显著升高。与模型组比较,逍遥散全方及各功效拆方组可明显降低大鼠肝功能ALT、AST,改善病理过程如Ishak评分及胶原染色半定量等均显著下降,肝组织α-SMA、COL-1表达显著降低,血清铁、铁蛋白、肝脏总铁含量亦明显下降,阳性对照药物去铁胺结果与逍遥散全方相仿。与逍遥散全方相比,逍遥散各功效拆方组均较整方疗效有显著降低。结论 逍遥散可显著改善慢性铁过载诱导的大鼠肝纤维化,其方中疏肝药、健脾药、养血药均对改善铁过载及纤维化有一定作用。推测逍遥散抑制铁过载维持铁稳态的作用可能是其疏肝、健脾、养血功效的核心机制。     

逍遥散联合恩替卡韦治疗肝郁脾虚型乙肝后肝硬化代偿期30例临床研究

目的：观察逍遥散联合恩替卡韦治疗肝郁脾虚型乙肝后肝硬化代偿期患者30例的临床有效性及安全性。方法：采用随机数字表法将72例患者分为治疗组与对照组,每组各36例,治疗组实际纳入30例,予逍遥散联合恩替卡韦治疗,对照组实际纳入33例,仅予恩替卡韦治疗,2组疗程均为6个月。观察并比较2组患者治疗前后的中医证候积分、肝功能、乙肝病毒载量水平及乙肝五项结果,并计算2组中医证候临床疗效;同时观察并记录2组治疗前后血尿粪三大常规、血肌酐、尿素氮水平和心电图的改变进行安全性评估。结果：治疗组中医证候总有效率96.67%,明显高于对照组的78.79%（P<0.05）;治疗组较对照组能显著改善烦躁抑郁、倦怠乏力、多思多虑、善太息等中医证候（P<0.05）; 2组患者安全性指标检测无统计学差异。结论：逍遥散联合恩替卡韦治疗肝郁脾虚型乙肝后肝硬化代偿期可显著提高临床疗效,改善临床症状,且安全无不良反应,值得临床推广应用和做进一步深入研究。