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[目的]建立阪崎克罗诺杆菌TaqMan—MGB探针实时荧光定量聚合酶链反应(RT.PCR)快速检测方法。[方法]在阪崎克罗诺杆菌保守序列设计一对特异性引物和TaqMan—MGB探针,通过对PCR反应条件和扩增体系的优化,建立阪崎克罗诺杆菌TaqMan—MGB探针实时荧光PCR检测方法;用已知浓度的阪崎克罗诺杆菌验证其敏感性;用阪崎克罗诺杆菌、大肠埃希菌、鸭沙门菌株、柠檬酸杆菌等菌株验证其特异性;用婴幼儿配方粉等食品开展TaqMan—MGB探针实时荧光PCR技术与常规检测方法符合性比较。[结果]本研究建立的阪崎克罗诺杆菌实时荧光PCR检测技术,反应循环(cyclethreshold,CT)值-9模板浓度的对数值具有良好的对应关系[Y=-3.06×log(X)+36.63,R^2=0.999],最低检测浓度为100CFU/mL,经36℃增菌8h最低检测限可达1CFU/mL,敏感性较普通TaqMan探针高10倍;11株阪崎克罗诺杆菌CT值均小于30,而大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌、柠檬酸杆菌等30株菌株CT值大于30或扩增曲线成一平滑直线;隔天连续5次反应CT值变异系数小于5%;140件不同批次不同婴幼儿配方粉、192件婴幼儿谷物辅助食品检测结果与常规分离培养比较,差异无统计学意义(X^2=0.624,P〉0.05)。[结论]阪崎克罗诺杆菌TaqMan—MGB探针实时荧光PCR快速检测技术具有特异性强、敏感性高、易操作等优点,适用于婴儿配方粉等食品开展阪崎克罗诺杆菌快速检测与监测工作。 相似文献
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目的:研究淫羊藿提取工艺。方法:以淫羊藿甙含量作为检测指标,选用L9(34)正交试验表安排试验。结
果:水煎法与醇提法提取效果相近。结论:淫羊藿采用水煎法,工艺简便,成本低,提取效率高,是较理想的生产工
艺。 相似文献
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HPLC法测定延胡索中延胡索乙素的含量 总被引:38,自引:0,他引:38
目的:对延胡索中的延胡索乙素进行含量测定。方法:采用HPLC法,以18-ODS为色谱柱,甲醇-0.1%磷酸(用三乙胺调PH至6.0)(60:40)为流动相,检测波长为280nm。结果:延胡索乙素的量在0.257-2.056μg范围内线性良好,回收率为99.03%,RSD为0.51%,结论:该方法简便、可靠,适合延胡索的质量控制。 相似文献
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薄层扫描法测定菊花中龙脑的含量 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:为了更好的进行菊花的综合利用,有必要对菊花中的各种成分作更为明显的了解。方法:本文采用薄层扫描法测定了菊花中龙脑的含量。结果:菊花中龙脑的含量与挥发油含量高低变化呈一致趋势。结论:在菊花样品量较少时,可用测定龙脑的含量以代替测定挥发油总量,从而来评价菊花中挥发油含量。 相似文献
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金银花提取条件对绿原酸含量的影响 总被引:16,自引:2,他引:16
目的 研究金银花中有效成分绿原酸的最佳提取条件。方法 采用正交实验法以乙醇浓度(A)、溶剂量(B)、提取时间(C)和提取次数(D)4个因素,每个因素选取3个水平进行实验。结果 因素A,因素D对绿原酸的含量有极显著影响。结论 以10倍量70%乙醇为溶剂,85℃提取两次,每次1h为最佳提取条件。 相似文献
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