基于NF-κB通路的芒果苷干预脂多糖诱导的细胞炎症作用机制研究

目的研究芒果苷对小鼠巨噬细胞RAW 264.7的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法采用脂多糖(LPS)诱导RAW 264.7细胞炎症模型。实验分四步:(1)细胞存活率实验分5组,即:空白组、LPS组、LPS+不同浓度(50、100、150μg/mL)芒果苷组。MTT法检测细胞存活率。(2)一氧化氮(NO)、白介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及白介素6(IL-6)分泌实验分6组,即:空白组、LPS组、LPS和不同浓度芒果苷(50、100、150μg/mL)组、LPS+BAY 11-7082[核因子κB(NF-κB)抑制剂]组。Griess法检测NO分泌量,ELISA法检测IL-1β、TNF-α及IL-6分泌量。(3)诱导型一氧化氮合酶(iNOS)与环氧化酶-2(COX-2)mRNA及蛋白表达实验分组同细胞存活率实验。实时荧光定量PCR检测iNOS及COX-2 mRNA水平变化,Western blot检测iNOS及COX-2蛋白表达水平。(4)细胞质、细胞核中NF-κB表达实验分3组,即:空白组、LPS组、LPS+150μg/mL(终末浓度)芒果苷共处理组, Western blot检测细胞质、细胞核中NF-κB p65蛋白表达量。结果 (1)与空白组比较,LPS组显著降低RAW264.7细胞存活率(P0.05);与LPS组比较,50～150μg/mL芒果苷预处理对RAW264.7细胞增殖无显著影响(P0.05)。(2)与空白组比较,LPS组NO、IL-1β、TNF-α、IL-6分泌量显著升高(P0.05);与LPS组比较,除50μg/mL芒果苷预处理组NO、TNF-α分泌量无显著变化外(P0.05),其余各组NO、IL-1β、TNF-α、IL-6分泌量均显著降低(P0.05)。(3)与空白组比较,LPS组iNOS、COX-2 mRNA及蛋白表达量均显著升高(P0.05);与LPS组比较,50～150μg/mL芒果苷预处理组iNOS、COX-2 mRNA及蛋白表达显著下降(P0.05)。(4)与空白组比较,LPS组细胞质中NF-κB p65蛋白量减少,细胞核中则增多(P0.05);与LPS组比较,150μg/mL芒果苷预处理组细胞质中NF-κB p65蛋白量升高,细胞核中蛋白量减少(P0.05)。结论芒果苷可能通过抑制NF-κB信号通路,而抑制iNOS、COX-2表达及相关炎症因子的分泌,干预LPS诱导的RAW264.7细胞炎症。     

自制金属冷冻板法冷冻人附睾精子的实验研究

目的:研究一种新型人精子冷冻方法对精子复苏率的影响,以探索人附睾精子、睾丸穿刺精子的最佳冷冻方法。方法:选取76例梗阻性无精子症患者的附睾穿刺(PESA)标本,按照自制金属冷冻板法和传统冷冻法分两组冷冻。采用计算机辅助精液分析系统检测冷冻前、后前向运动精子百分率,并对比两种方法对精子膜功能、DNA碎片指数(DFI)、顶体酶活性和精子畸形百分率的影响。结果:复苏后自制金属冷冻板法和传统冷冻法前向运动精子百分率[(12.0±7.5)%vs(8.0±5.1)%,P0.05]和低渗肿胀精子百分率[(22.0±17.5)%vs(18.0±20.5)%]比较有显著性差异(P0.05),均较冷冻前[(20.7±8.8)%和(30.0±13.5)%]显著下降(P0.05)。自制金属冷冻板法复苏后精子顶体酶活性显著高于传统冷冻法[(75.2±9.5)μIU/10~6精子vs(55.7±8.3)μIU/10~6精子,P0.05],均较冷冻前(120.0±10.5)μIU/10~6精子显著下降(P0.05)。两种方法复苏后畸形精子百分率和DFI无显著差异[(98.7±8.8)%vs(98.5±9.2)%,P0.05]和[(38.2±8.5)%vs(39.5±10.2)%,P0.05],并均较冷冻前[(97.2±9.5)%和(30.8±9.7)%]显著升高(P0.05)。自制金属冷冻板法和传统冷冻法冷冻复苏率[(65.2±12.0)%vs(52.3±18.0)%]有显著性差异(P0.05)。结论:自制金属冷冻板法是一种经济高效、操作简单的精子冷冻方法且能最大限度的节约精子;复苏后可以保证较好的精子复苏率、活动力和顶体酶活性。     

亮氨酸氨基肽酶在妊娠妇女血清中的水平变化及其意义

目的:探讨血清亮氨酸氨基肽酶(LAP)在妊娠妇女不同时期血清中的变化规律及其临床意义。方法:选取2011年1月~2013年12月在该院产检的正常妊娠妇女180例,根据孕周分为早期组、中期组和晚期组,每组各60例,另选取60例健康未孕妇女为未孕组;同时选取该院收治的妊娠期高血压疾病妇女33例为妊娠期高血压疾病组、早产孕妇22例为早产组,采用速率法分别检测各组孕妇血清LAP水平并进行比较。结果:未孕组、早期组、中期组、晚期组妇女的血清LAP、血清肝胆酸(CG)、碱性磷酸酶(ALP)、α-L-岩藻糖苷酶(AFU)水平比较,差异有统计学意义(P均<0.05)。妊娠期高血压疾病组的CG、ALP、AFU、LAP水平显著高于早期组、中期组和晚期组(P均<0.05);早产组的CG、ALP、AFU、LAP水平显著高于早期组、中期组(P均<0.05),仅CG水平高于晚期组(P<0.05)。结论:随着妊娠周期的增加,妊娠妇女的血清LAP水平逐步升高,在合并妊娠期高血压疾病时LAP升高更加显著,结合CG、ALP、AFU水平的变化能够对妊娠期高血压疾病的发病情况进行动态监测。     

益气化瘀解毒方对MRP、GST-π和Topo Ⅱ基因在Sorafenib获得性耐药人肝癌QGY7702细胞表达的干预研究

目的探讨益气化瘀解毒方干预后对Sorafenib获得性耐药人肝癌QGY7702细胞(QGY7702/Sora)增殖及MRP、GST-π和Topo Ⅱ基因表达的影响。方法培养QGY7702/Sora细胞和QGY7702细胞,利用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法检测Sorafenib对细胞的半数抑制率浓度(IC50值),计算耐药指数RI;观察益气化瘀解毒方对耐药细胞的增殖影响;采用荧光定量PCR检测药物干预前后2种细胞中MRP、GST-π和Topo Ⅱ基因表达水平。结果亲本细胞和耐药细胞Sorafenib的IC50值分别为(7.993±0.522)μmol/L和(19.651±1.216)μmol/L,RI约为2.5。益气化瘀解毒方可抑制耐药细胞的增殖活性。2种细胞的MRP、GST-π、Topo Ⅱ表达量无明显差异(P>0.05)。Sorafenib组可促进耐药细胞MRP 、GST-π基因的过表达(P<0.05),益气化瘀解毒方组可抑制GST-π基因的过表达(P<0.01),且联合Sorafenib可显著提高Topo Ⅱ基因的表达量(P<0.01)。结论 QGY7702/Sora细胞MRP、GST-π和Topo Ⅱ的表达水平与亲本细胞无显著差异。耐药细胞对Sorafenib敏感性降低与MRP、GST-π过表达相关,而益气化瘀解毒方拮抗Sorafenib耐药与抑制GST-π过表达相关。     

TGF-β对眼晶状体上皮细胞影响的实验研究

晶状体后囊混浊是白内障囊外摘除术后常见的并发症,直接影响白内障术后视力恢复,因此研究后囊混浊的病因预防及减少或消除晶状体后囊混浊是提高手术效果的重要课题.本研究通过观察转化生长因子(TGF-β)对一组晶状体上皮细胞的影响,探讨其在后发性白内障形成中的作用,为后发性白内障的预防提供实验依据.     

拔引流管拔出阑尾1例

患者，男，50岁，因反复上腹部疼痛30年，复发1周，加重6小时入院，患者30年前出现上腹隐痛，伴反酸打嗝，1周前上述症状复发，6小时前忽感疼痛加剧，并出现全腹痛。     

眼睑恶性麦克尔（Merkel）细胞瘤

眼睑恶性麦克尔（Ｍｅｒｋｅｌ）细胞瘤山东医科大学附属医院眼科刘石麟，周芳山东医科大学附属医院病理科乔柏生麦克尔（Ｍｅｒｋｅｌ）细胞瘤是近年来被确认的一种皮肤原发性肿瘤，好发部位是暴露的皮肤，以头颈部多见，颜面部皮肤发生最多。发病以老年为主［１］［２］...     

喉癌患者血小板聚集功能的测定

目的 探讨喉癌与血小板聚集功能的关系。方法 采用比浊法，对50例喉癌患进行血小板聚集功能的检测并以良性肿瘤病人、喉慢性炎性疾病病人及正常人作为对照，应用SAS计算机系统进行分析。结果 与其他组病人相比，喉癌组血小板聚集功能增强并且随着临床分期的增高有增强趋势。结论 喉癌病人的血小板聚集功能有一定的增强；测定血小板聚集功能对恶性肿瘤的疗效判定、预后评估及预测转移有一定的意义；血小板抑制剂有望成为治疗肿瘤的新方法。