寨卡病毒感染人肝癌细胞HepG2后外泌体中差异miRNA分析

目的探索人肝癌细胞HepG2感染寨卡病毒(Zika virus, ZIKV)后的外泌体miRNA的表达差异, 对其靶基因进行预测、分析。方法以感染复数0.5的ZIKV(ZJ03株)感染HepG2, 以超速离心法提取、纯化感染2 d与未感染细胞的外泌体(Exo-ZIKV与Exo-NC)。以透射电镜观察外泌体形态, 纳米粒径分析检测外泌体粒径分布, Western blot检测外泌体标志蛋白质等方法鉴定。提取纯化外泌体小RNA, 进行miRNA测序与分析, 对部分差异表达miRNA采用实时定量PCR验证。生物信息方法分析差异miRNA靶基因。结果在透射电镜下呈杯托状双层膜小囊泡结构;粒径大小分布几乎一致但Exo-ZIKV浓度(5.24×108颗粒/ml )较Exo-NC(3.06×108 paritcle/ml)增多。Western blot检测出Hsp70、CD63和CD9蛋白表达, 测序分析显示共20个差异表达miRNA, 其中12个miRNA表达上调8个miRNA表达下调, 上调miRNA多与抗病毒通路相关, 差异表达miRNA对应的靶基因主要富集在嘧啶与嘌呤代谢等途径中。结论 ZI...     

血清HBVM检测在慢性乙肝、肝硬化及原发性肝癌中的应用价值

目的:探讨血清乙肝病毒标志物(HBVM)检测在原发性肝癌、肝硬化和慢性乙肝中的应用效果。方法:选取佛山市南海经济开发区人民医院接收的HBV感染患者196例为研究对象,其中原发性肝癌9例、肝硬化72例、乙肝115例。采用化学发光法测定所有患者的HBVM,并应用PCR技术对HBV-DNA进行检测。结果:当HBVM呈抗-HBc、HBeAg和HBsAg阳性时,HBVM呈抗-HBc、抗-HBe和HBsAg阳性时,HBVM呈抗-HBc、HBsAg阳性时,分别对比3组患者的HBV-DNA、HBsAg定量,组间数据比较均有显著性差异(P<0.05)。结论:HBV含量随疾病的发展及时间的推移,在HBV感染患者中发生变化,虽然HBV-DNA、HBsAg呈下降趋势,但无法表明已有效控制病情,临床应加强对其重视程度。