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1.
通过分析GenBank数据库下载序列的种内与种间变异与遗传距离,构建系统发育树,评价序列的鉴定能力。土贝母、老鸭瓣、浙贝母、湖北贝母与川贝母分别代表了不同时期的贝母药材主流品种;贝母道地产区经历了中国北方向南方的迁移过程;不同贝母药材品种存在药效性味的差异获得历史验证。结合基于ITS1与ITS2的分子系统发育关系分析,证实仅从形态学特征无法准确鉴定川贝母与其易混淆品,但能从DNA水平进行有效鉴定。为川贝母药材的质量控制、资源保护及临床用药提供依据,确保了中医临床疗效。  相似文献   
2.
郑辉  李秋娥  陈安琪  邓楷煜  廖海  任瑶瑶  周嘉裕  谭睿 《中草药》2019,50(22):5563-5570
目的 评价以ITS2和matK序列作为DNA条形码对峨眉山区唇形科药用植物的鉴定效果。方法 从峨眉山区采集23种唇形科药用植物样本,提取DNA,PCR扩增ITS2序列,并从Genbank上分别下载54与51条唇形科植物的ITS2及matK序列;使用MEGA 5.0软件计算全部序列的种间、种内遗传距离及序列变异位点,构建Neighbor Joining(NJ)系统进化树,最后开展barcoding gap分析。结果 峨眉山唇形科药用植物的ITS2序列长度为190~237 bp,GC含量为53%~73%,具有较为明显的barcoding gap,对唇形科植物的识别率为94%,而matK序列的barcoding gap不显著,有明显重叠现象,对唇形科植物的识别率为96%。结论 ITS2从种水平上对唇形科植物有更好的鉴定能力,但matK序列对唇形科植物的识别率更高,因此,以ITS2为主,matK序列为辅的鉴定方法能够对唇形科药用植物进行快速、准确的鉴定和识别,准确阐明物种之间的亲缘关系,对峨眉山区唇形科药用植物资源的有效保护和合理开发提供了理论依据。  相似文献   
3.
黄连小檗碱生物合成相关酶类的研究进展   总被引:4,自引:0,他引:4  
周嘉裕  廖海 《时珍国医国药》2005,16(11):1083-1084,1087
综述了近年来黄连小檗碱生物合成途径催化各步反应的酶(尤其是关键反应)及编码这些酶的基因的研究进展。小檗碱零具有双氧桥环状结构的一种重要次生代谢产物,研究小檗碱的生物合成对于通过基因工程手段提高小檗碱的产量具有重要的指导意义。  相似文献   
4.
决明子大黄素和大黄酚的提取与含量测定   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的比较研究提取决明子大黄素和大黄酚的不同方法。方法甲醇超声波、乙醇超声波、甲醇回流和乙醇回流分别提取决明子中的大黄素与大黄酚,高效液相色谱方法测定大黄素与大黄酚含量。结果甲醇超声波提取大黄素和大黄酚的效率最高。结论为决明子大黄素和大黄酚的提取与开发提供了参考价值。  相似文献   
5.
峨眉野连不同部位总生物碱和盐酸小檗碱的含量测定   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的确定峨眉野连不同器官的总生物碱和小檗碱含量。方法采用紫外分光光度法测定总生物碱含量,高效液相色谱方法测定盐酸小檗碱含量。结果峨眉野连根茎、须根、叶片和叶柄中,均含有生物碱和小檗碱。结论野连地上器官含有较高的总生物碱和小檗碱,对濒危植物的组织培养及保护提供理论指导。  相似文献   
6.
目的构建川芎咖啡酸-3-O-甲基转移酶(Ligusticum chuanxiong caffeic acid-3-O-methyltransferase,LCCOMT)的三维模型,并利用定点突变对模型进行验证。方法利用同源建模构建LCCOMT的初始三维模型;对初始三维模型进行动力学优化;将优化后的模型对接咖啡酸,预测LCCOMT的活性位点;对预测的活性位点展开定点突变,检测突变型蛋白的生物活性。结果 LCCOMT的三维模型能够与咖啡酸成功对接,His268残基可能是LCCOMT的活性位点,推测其能够与咖啡酸3-OH形成氢键。H268N与H268Q2种突变酶分别丧失94.85%和95.28%的催促活性。结论同源建模能够准确预测LCCOMT的三维模型。His268为LCCOMT的关键氨基酸残基,其作用可能是作为共轭碱,参与咖啡酸3-OH的去质子化反应。  相似文献   
7.
目的 研究暗紫贝母Fritillaria unibracteata甲羟戊酸激酶(FUMK)基因的重组表达与定点突变。方法 基于暗紫贝母转录组中FUMK基因的ORF序列,全化学合成FUMK-pET28a重组质粒,在大肠杆菌BL21中表达其重组蛋白,纯化后检测其酶活性。利用定点突变验证关键氨基酸。结果 FUMK基因ORF全长为1158 bp,编码一条长度为385个氨基酸的多肽。FUMK与卷叶贝母的甲羟戊酸激酶(MK)同源性最高,序列相似性可达77.14%。FUMK与百合科贝母属植物的MK聚类形成单系群,具有最近的亲缘关系。在大肠杆菌BL21中成功表达出FUMK重组蛋白,纯化后的重组蛋白能够催化腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)与甲羟戊酸反应,形成甲羟戊酸磷酸。FUMK对ATP的酶促反应最大速度(Vmax)与米氏常数(Km)值分别为1.72μmol·min-1·mg-1、15.84μmol·L-1;对甲羟戊酸的Vmax与Km值分别为0.71μmol...  相似文献   
8.
目的 克隆何首乌苯甲酮合成酶基因并作序列分析.方法 以何首乌Polygonum multiflorum Thunb.为材料,根据其它植物苯甲酮合成酶(Benzalacetone synthase,BAS)基因cDNA序列的保守区域设计引物,利用RT-PCR和3`-RACE,克隆其基因.结果 从何首乌叶cDNA中克隆出了长度为1 049 bp的基因片段.序列分析表明该片段具有典型的CHS基因家族的结构域,为何首乌的BAS基因片段,命名为PmBAS.将得到的序列提交GenBank,序列号为FJ601686.对获得的PmBAS的氨基酸序列进行比较分析,发现PmBAS不含有Phe215,这种差异可能是CHS与BAS催化不同反应的重要原因之一.何首乌BAS与其它植物CHS的氨基酸序列的进化分析表明,其与同为蓼科的虎杖和掌叶大黄的同源性较近.结论 对利用基因工程技术促进何首乌蒽醌合成具有重要意义.  相似文献   
9.
目的 克隆黄连Coptis chinensis N-甲基乌药碱-3'-羟化酶[(S)-N-methylcoclaurine-3'-hydroxylase]基因并做序列分析.方法 采用RT-PCR方法,以新鲜的黄连嫩叶cDNA为模板,克隆出黄连N-甲基乌药碱-3'-羟化酶基因的全部序列.结果 克隆到的基因(命名为CYP8083)全长为1680 bp,编码一个488个氨基酸残基组成的多肽.其氨基酸序列与日本黄连、唐松草、罂粟和花菱草的N-甲基乌药碱-3'一羟化酶的氨基酸序列同源性分别达95%、82%、70%、68%.将得到的序列提交Genbank,序列号为EF492879.通过与日本黄连的氨基酸序列比对,具有相同功能区域,因而可以参与N-甲基乌药碱的3'位羟基化反应.结论 黄连N-甲基乌药碱-3'-羟化酶基因的成功克隆为黄连植物中原小檗碱型苄基异喹啉类生物碱的基因工程等研究打下了良好的基础.  相似文献   
10.
目的建立一种能够检测不同分子大小(尤其是低分子量)蛋白酶抑制剂的电泳方法。方法根据特异蛋白酶抑制剂抑制靶蛋白酶活性的原理,借助明胶-Tricine—SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离样品,胶板经蛋白酶水解后,以考马斯亮蓝染色。结果小分子量的胃蛋白酶抑制剂与较大分子量的BBI均能在该方法中显示出活性带,并且利用该方法检测到山合欢种子中含有一种胰蛋白酶抑制剂。结论该方法能够满足不同分子大小、不同类型蛋白酶抑制剂检测的需要。山合欢胰蛋白酶抑制剂的发现对山合欢进一步的研究和综合开发有重要意义。  相似文献   
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