蘡Ao中分离的多酚化合物

目的分离鉴定蘡Ao地上部分的化学成分。方法通过硅胶柱色谱，Sephadex LH-20及制备HPLC方法分离，对其进行理化常数和光谱分析确定结构。结果自蘡Ao地上部分分离得到11个多酚化合物，均属首次分离。结论化合物1为新化合物，经鉴定其结构为3，5-二甲氧基-4-羟基苯丙醇-9-氧-β-D-吡喃葡萄糖苷。     

酪氨酸激酶受体EphA5及其配体ephrin-A5在小鼠脊髓发育过程中的表达

目的研究两个Eph家族分子,EphA5受体及其配体ephrin—A5,在脊髓发育过程中的表达方式。方法β-半乳糖苷酶基因敲入小鼠和配体亲和探针分析受体的表达,两种不同的亲和探针分析配体的表达,基因敲除小鼠作为对照。结果在发育过程中,EphA5表达于脊髓腹侧,而ephrin—A5表达于脊髓背侧。结论EphA5和ephrin—A5在多个脊髓发育阶段都有表达,他们可能在脊髓背腹侧组织结构的建立过程中发挥重要作用。     

利用碱性磷酸酶融合表达技术研究神经导向因子netrin-4的功能

目的：采用碱性磷酸酶（AP4）标记技术研究netrin-4的神经导向功能和受体结合特征，并评估碱性磷酸酶作为标签分子在真核基因功能研究中的意义。方法：将netrin-4全长及3个结构域编码区cDNA克隆到碱性磷酸酶表达载体APtag4，成功构建真核表达载体AP4-netrin4、AP4-LNT、AP4-EGFL和AP4-NCT，进而在COS7细胞中表达出含有AP标签的融合蛋白，并通过神经组织块培养技术和神经元原代培养技术对其活性进行鉴定。结果：确认了netrin-4的神经突起导向功能。进一步通过对AP标签进行检测，发现netrin-4全长、LNT和NCT可与原代培养的神经元表面相结合，而EGFL不结合，说明神经元表面舍有netrin-4受体或结合位点，且可能通过LNT和NCT结构域起作用。结论：netrin-4具有明确的神经突起导向功能，在神经元表面舍有结合位点，同时发现碱性磷酸酶标签融合表达技术在真核基因功能研究方面具有一定优势。     

Hetrin基因在大鼠脑发育过程中表达的初步研究

本文目的是 :观察 hetrin基因在大鼠脑发育过程中的表达变化规律 ,藉以探讨 hetrin在神经系统发育过程中的作用。以地高辛 (dig)标记 hetrin基因 3 ' -末端 c RNA为探针 ,采用原位杂交法研究 hetrin m RNA在生后第 10 d(P10 )、P3 0和 P60大鼠脑中的分布状况 ;同时采用半定量 RT-PCR法分析出生前后大鼠脑内 hetrin m RNA表达水平的变化。结果发现 ,hetrin m RNA原位杂交阳性信号定位于神经元胞质内 ,在 P10、P3 0和 P60大鼠的脑组织中均可见明显的杂交信号。 RT-PCR结果显示 ,在胚胎第 9d(E9)大鼠脑内 hetrin m RNA开始表达 ,但表达量很低 ,以后其表达量逐渐升高。出生后大鼠不同脑区 hetrin m RNA的表达量变化趋势不同。本实验结果表明 ,在胚胎期及出生后大鼠脑的多个部位都有 hetrin m RNA表达 ,而且 hetrin m RNA表达量与神经细胞突起生长及新突触连接的建立在时间上有一定的同步性 ,提示 hetrin m RNA的表达与神经突起生长存在着一定的关系 ,进一步支持存在 hetrin基因的神经细胞突起具有诱向生长功能     

蘡薁中分离的多酚化合物

目的　分离鉴定艹婴 艹奥 地上部分的化学成分。方法　通过硅胶柱色谱 ,SephadexLH 2 0及制备HPLC方法分离 ,对其进行理化常数和光谱分析确定结构。结果　自 艹婴 艹奥 地上部分分离得到 11个多酚化合物 ,均属首次分离。结论　化合物 1为新化合物 ,经鉴定其结构为 3,5 二甲氧基 4 羟基苯丙醇 9 氧 β D 吡喃葡萄糖苷。     

β-Netrin mRNA在成年大鼠脑内的表达及其分布

目的 　研究神经细胞突起生长诱向因子 (β Netrin)在大鼠脑内的基因表达。 方法 　以地高辛标记的cR NA探针利用组织原位杂交技术检测β NetrinmRNA在出生后 30d大鼠脑内的表达及其分布。结果　(1)脑内β NetrinmRNA主要定位于神经元 ;(2 )脑内β NetrinmRNA阳性细胞广泛分布于大脑皮层、边缘系统、小脑、脑干等处的神经核团及嗅球中。其中 ,梨状前皮质、杏仁核群、海马各区锥体层、小脑浦肯野细胞、小脑内侧顶核及间置核、斜方体内侧核和嗅球僧帽细胞等部位阳性信号较强 ;中等强度的阳性信号见于额叶皮质、丘脑外侧背核等处。结论　 原位杂交结果显示β NetrinmRNA在成年大鼠脑内神经元中有表达 ,进一步验证了β Netrin对脑内神经细胞突起的生长具有诱向作用。同时 ,由于β Netrin在大鼠嗅觉传导相关通路和海马、大脑皮质内表达量较高 ,提示β Netrin可能参与了嗅觉突触联系的形成及与学习记忆有关突触的建立     

酪氨酸激酶受体EphA5及其配体ephrin-A5在小鼠脊髓发育过程中的表达(英文)

目的研究两个Eph家族分子,EphA5受体及其配体e phrin-A5,在脊髓发育过程中的表达方式。方法β-半乳糖苷酶基因敲入小鼠和配体亲和探针分析受体的表达,两种不同的亲利探针分析配体的表达,基因敲除小鼠作为对照。结果在发育过程中,EphA5表达于脊髓腹侧,而ephrin—A5表达于脊髓背侧。结论EphA5和ephrin-A5在多个脊髓发育阶段都有表达,他们可能在脊髓背腹侧组织结构的建立过程中发挥重要作用。     

利用原代培养神经元研究Netrin-4的受体定位

 目的 利用体外原代培养神经元,研究神经突起诱向因子Netrin-4的受体,分析Netrin-1已知受体DCC和UNC5H1作为Netrin-4受体的可能性。方法 改良Koh法培养出生12h内Wistar乳鼠神经元,免疫细胞化学鉴定纯度;以碱性磷酸酶(AP)标记的Netrin-4为配体,以神经元及转染DCC和UNC5H1的COS7细胞为对象,亲和细胞化学法检测Netrin-4的受体;RT-PCR法分析神经元中Netrin-4、DCC和UNC5H1的表达。结果 成熟神经元胞核大、突起长,交织成网;以抗神经丝蛋白（NF）抗体行免疫细胞化学鉴定,纯度较高;转染DCC和UNC5H1的COS7能与AP4-Netrin-4结合,定位在细胞膜上。 结论 建立起稳定的原代神经元培养法,并研究神经突起诱向因子受体的定位。DCC和UNC5H1可能是Netrin-1与Netrin-4的共受体。