载天冬酰胺酶自组装纳米囊的药动学及生物等效性

目的 研究载天冬酰胺酶(Asp)自组装透明质酸-聚乙二醇(HA-g-PEG)/二甲基-β环糊精(DCD)纳米囊(AHDPs)在雄性SD大鼠体内的药代动力学和生物等效性.方法 考察了AHDPs的透射电镜、粒径、zeta电位、包封率,并分别测定大鼠静脉给予AHDPs和游离Asp后,不同时间点大鼠血浆样品中Asp的活性.采用DAS 2.1.1软件计算药动学参数,对AHDPs和游离Asp进行生物等效性评价.结果 AHDPs的平均粒径为(439.63±8.49) nm,zeta电位为(-20.43±2.20) mV,平均包封率为(55.75±4.11)％(n=3).AHDPs和游离Asp的主要药动学参数AUC0-48h分别为(138.93±0.89)U· mL-1·h和(46.38±1.98) U· mL-1·h,AUC0-∞分别为(175.22±13.59)U·mL-1·h和(51.44±3.01)U·mL-1·h,t1/2分别为(4.46±1.04)h和(1.86±0.38)h.与游离Asp比较,AHDPs的AUC0-48 h、AUC0-∞和t1/2分别提高至约游离ASP的3.00、3.40和2.40倍.AUC0-48 h、AUC0-∞和Cmax的90％置信区间分别为76.9％～78.3％、76.9％～78.3％、92.8％～94.4％.结论 AHDPs延长了Asp在大鼠体内的生物半衰期,提高了Asp在大鼠体内的生物利用度,且AHDPs与游离Asp不具有生物等效性.     

N,N-二羟乙基甘氨酸-氢氧化钠缓冲液制备的过氧化氢酶复合纳米脂质体的特性分析及过氧化氢酶的药效学初步研究

目的:研究过氧化氢酶(catalase, CA)/尿酸酶(uricase, UA)复合纳米脂质体(catalase and uricase nanoliposome, CULP)中过氧化氢酶在大鼠体内的药效学。方法:采用逆向蒸发法制备了CULP,用激光粒度仪测定平均粒径。测定CULP及CA的最适温度和最适pH值。大鼠静脉注射过氧化氢建立高过氧化氢大鼠模型,建模后分别静脉注射CULP和CA,测定不同时间点大鼠血清中过氧化氢的浓度。结果:CULP的平均粒径为1 000 nm。CULP和CA最适温度均为40℃,最适pH值分别为为8.0和7.0。在同一温度和pH条件下,CULP中CA的活性高于游离CA;且CULP在大鼠体内降低过氧化氢浓度的能力高于游离CA。结论:CULP在大鼠体内降低过氧化氢水平的能力优于游离CA,为过氧化氢酶的临床应用提供实验依据。     

载门冬酰胺酶的自组装聚乙二醇-透明质酸/二甲基-β-环糊精纳米粒体外稳定性的初步考察

采用聚乙二醇接枝透明质酸和二甲基-β-环糊精制备了含载门冬酰胺酶(1)的自组装纳米粒(THDCD),并比较其与游离1在体外的活性及稳定性.测定了THDCD和1的最适温度、最适pH值,并对比了二者的酸碱稳定性、热稳定性、贮存稳定性、血浆稳定性、抗胰蛋白酶水解能力、抗部分金属离子及有机化合物影响的能力.结果表明,THDCD的最适温度和最适pH值为50℃和pH 6.5,而1为60℃和pH 7.5.THDCD的上述稳定性和抗性均优于1.本试验表明,THDCD在提高了1体外活性的同时,也显著增强了1的体外稳定性.     

硼酸盐缓冲液制备尿酸酶复合脂质体及尿酸酶的特性

目的研究硼酸-硼砂缓冲液制备的尿酸酶-过氧化氢酶脂质体（BUCLP）中尿酸酶的体外特性。方法采用逆向蒸发法制
备BUCLP,并考察其部分理化性质特性。结果BUCLP中尿酸酶最适温度保持在40 ℃,最适pH值由8.5降为8.0,而Km值也
由14.207 μmol/L降为13.623 μmol/L;尿酸酶-过氧化氢酶（UAC）与空白纳米脂质体作用后,再与FITC结合,其荧光强度高于游
离UAC与FITC结合的荧光强度,且BUCLP在280 nm处的荧光强度高于游离UAC。结论尿酸酶和过氧化氢酶联合制备成
BUCLP后尿酸酶的活性增加。
     

尿酸酶多囊脂质体在大鼠体内的药动学和药效学试验

目的 研究大鼠皮下注射尿酸酶多囊脂质体(UMVLs)的药动学过程;用尿酸酶抑制剂氧嗪酸建立高尿酸血症大鼠模型,考察尿酸酶的体内降尿酸作用.方法 将12只健康♂ SD大鼠随机均分为2组,分别皮下注射UMVLs和游离尿酸酶,测定给药后不同时间点大鼠血清中尿酸酶的活性,用DAS 2.1.1软件计算药动学参数;于大鼠皮下注射氧嗪酸钾建立高尿酸血症大鼠模型,分别于建模1h后于皮下注射UMVLs和游离尿酸酶,建模1、2、3、5、7、9、12、24、36、48、60、72、96 h后测定大鼠血清中尿酸水平.结果 UMVLs和尿酸酶的主要药动学参数AUC0-72h分别为179.13±17.76、87.61±10.54 U·h·L-1,Cmax分别为35.03±2.35、38.26±6.03 U·L-1,Tmax分别为4.00±0.88、1.00±0 h,UOMVLs的相对生物利用度为204.46％±20.27％.结论 UMVLs提高了尿酸酶的生物利用度,并可有效降低高尿酸模型大鼠血清中尿酸水平.     

溴新斯的明多囊脂质体的制备及其体外释放行为的初步研究

目的:制备溴新斯的明多囊脂质体(NB-MVL),并对其体外药物释放行为进行考察。方法:采用复乳法制备载药多囊脂质体,并用单因素试验优化处方,以动态透析技术与ƒ₂相似因子评价法对NB-MVL与溴新斯的明在体外不同释放介质中的释放行为进行研究,计算其药物释放度与相似因子。结果:NB-MVL的包封率受投料比、药物浓度等因素影响;NB-MVL在不同的释放介质中所获得的释放模型均符合Weibull模型,同时与溴新斯的明溶液在不同释放介质中所得累积释放曲线间的相似因子小于50。结论:本试验制备所得NB-MVL包封率较高,且体外药物释放行为与溴新斯的明存在显著性差异,表现出良好的缓释作用。     

尿酸酶-过氧化氢酶复合纳米脂质体对高尿酸血症小鼠的治疗作用

目的 考察硼酸-硼砂缓冲液制备的尿酸酶(UA)-过氧化氢酶(CA)复合纳米脂质体(UCLP)对高尿酸血症小鼠的治疗作用.方法 采用pH8.5的硼酸-硼砂缓冲液,运用逆向蒸发法制备UCLP,并考察测定UCLP中UA的最适温度和最适pH;建立小鼠高尿酸血症模型后,给予UCLP治疗,用相应试剂盒测定小鼠体内尿酸和过氧化氢的浓度.结果 UCLP中UA的最适温度为40℃,最适pH为8.0;UCLP组小鼠体内尿酸和过氧化氢的浓度均较UA组低.结论 UCLP能有效降低高尿酸血症小鼠体内的尿酸水平,同时降低体内过氧化氢的浓度.     

聚乙二醇化尿酸酶脂质体的稳定性研究

目的 制备聚乙二醇化尿酸酶脂质体(PULPs)并考察其活性与稳定性.方法 采用逆向蒸发法制备PULPs,并考察其最适温度、最适pH、热稳定性、贮存稳定性及其抗胰蛋白酶水解的能力、抗部分金属离子及有机化合物影响的能力.结果 PULPs的最适温度为40℃,最适pH为8.5;PULPs的热稳定性、贮存稳定性、抗胰蛋白酶水解能力、抗部分金属离子及有机化合物影响的能力均优于尿酸酶.结论 PULPs在增强聚乙二醇化尿酸酶活性的同时增强了稳定性.     

阿奇霉素泡囊体外释放与体内吸收的相关性

目的 评价阿奇霉素泡囊的体外释放和体内吸收之间的相关性。方法 采用激光粒度仪测定阿奇霉素泡囊的粒径和zeta电位。建立UV法进行体外分析测定其体外释放度,高效液相色谱法进行体内分析测定大鼠口服后的血药浓度,然后分别以Loo-Riegelman法和反卷积分法计算体内吸收分数Fa和输入函数R。结果 阿奇霉素泡囊的粒径为（907.4±0.10）nm,zeta电位为（14.6 ± 0.02）mV。其体内阿奇霉素与内标峰面积之比（A）和阿奇霉素浓度（C）标准曲线回归方程为：A= 19.26C-52.69,r=0.999 0（n=3）;体外482 nm波长处光密度（D）与浓度（C）标准曲线回归方程为：D=0.014 4C-0.070 1,r=0.999 6（n=3）,回收率均符合要求。以体外累计释放度Y与Fa和R建立的回归方程分别为：Fa=0.981 8Y + 1.083 1,r=0.956 5、R=0.763 5Y-15.699,r=0.862 7。结论 阿奇霉素泡囊体外释放与体内吸收之间没有相关性。     

透明质酸修饰的尿酸酶脂质体的制备及特性

目的 制备透明质酸修饰的尿酸酶脂质体(hyaluronic acid-uricase liposomes,UHLP),并对尿酸酶(uricase,UC)和UHLP的体外活性及稳定性进行研究.方法 采用逆向蒸发法制备UHLP,测定UHLP的包封率、粒径与zeta电位,用透射电镜对UHLP进行观察.考察游离UC和UHLP中UC的最适温度和最适pH,还考察了其热稳定性、贮存稳定性、酸碱稳定性、抗胰蛋白酶水解能力以及抗部分金属离子和有机化合物能力,并对UHLP提高UC活性的机制进行了初步研究.结果 UHLP的平均包封率为(57.27±3.93)％(n=3),平均粒径为(322.6±8.2) nm(n=3),zeta电位为(-19.4±1.7)mV(n=3).透射电镜下UHLP呈分布均匀的圆形或椭圆形.游离UC和UHLP中UC最适温度均为40℃;游离UC最适pH为8.5,UHLP中UC最适pH为8.0.稳定性结果显示,UHLP中UC的热稳定性、贮存稳定性、酸碱稳定性、抗胰蛋白酶水解能力以及抗部分金属离子和有机化合物能力均优于游离UC.UHLP提高UC活性机制初步研究结果表明,UC经UHLP包裹后其活性发生改变,和UC与UHLP脂质膜的相互作用有关,它们在相互作用的过程中使UC的构象发生翻转,构效发生改变,UC活性中心暴露,从而导致其活性增强.结论 UHLP不仅能提高UC在体外的活性,还能提高UC在体外的稳定性.