肠激酶特点及其基因工程的研究进展

肠激酶是从哺乳动物体内提取的一种丝氨酸蛋白酶,广泛应用于基因T程领域切割融合蛋白。文章对肠激酶的特点及其基因工程研究进展进行了综述。     

基因导向个体化用药的伦理学思考

基因导向的个体化用药是未来临床用药的必然趋势,但其推广及应用的同时也可能伴随着一系列伦理问题。个体化用药会因人、因病和因药而异,本文从这3个方面并结合具体的临床治疗实例,分别阐述和讨论基因导向个体化用药过程中可能出现的各种相关伦理问题,并提出针对性的解决方案。     

霍乱毒素B亚单位与热休克蛋白65功能表位融合蛋白皮下免疫加剧动脉粥样硬化

目的　研究热休克蛋白65　B细胞表位经皮下免疫高脂膳食动物对动脉粥样硬化（As）斑块生成的影响。方法　利用HSP65上与炎症性自身免疫性疾病相关的两段功能表位P1（179-190）、P2（31-46）,以CTB为载体蛋白构建高效表达载体pET28a-CTB-p117,提取纯化获得可用于动物实验的蛋白,皮下免疫新西兰大白兔,比较抗HSP65抗体、血液总胆固醇含量变化与主动脉粥样硬化斑块的生成情况。结果　能够诱导产生抗HSP65的抗体,血液中总胆固醇含量与对照组比较显著提高,并且能显著增加主动脉As斑块生成（P<0.05）。结论　HSP65相关表位蛋白以CTB为载体蛋白,在弗氏不完全佐剂条件下,经皮下免疫能显著加重As斑块生成,分析是因为抗HSP65抗体生成,促进炎症反应,脂类代谢变化进而促进As斑块的形成。可基于此,利用以上表位,改变免疫方式,设计出可用于降低斑块生成的抑制As斑块生成的免疫调节剂。对于CTB单独皮下免疫也致As斑块加重的结果需进一步实验考察验证。     

重组人甲状旁腺素相关肽Pro-Pro-[Arg11]-hPTH(1-34)-Pro-Pro的制备工艺及活性研究

该研究优化了工程菌pED-4P-[Arg11]hPTH(1-34)/BL21的表达条件,目的蛋白表达量可达50%以上;运用正交设计法,确定包涵体溶解及融合蛋白乙醇沉淀的最佳条件,融合蛋白经酸水解后进行阳离子交换柱层析,最后采用阶段洗脱,回收率约为11 mg/L发酵液.卵巢摘除大鼠模型验证了其药效学活性.该工艺稳定,简便,易于控制,为后期中试及大规模生产提供了思路.     

THE EXPRESSION OF CATHEPSIN－D，C－erbB－2 AND EGFR IN BREAST CANCER AND ITS CORRELATION TO LYMPHATIC ME

ＴＨＥＥＸＰＲＥＳＳＩＯＮＯＦＣＡＴＨＥＰＳＩＮ－Ｄ，Ｃ－ｅｒｂＢ－２ＡＮＤＥＧＦＲＩＮ　ＢＲＥＡＳＴＣＡＮＣＥＲＡＮＤＩＴＳＣＯＲＲＥＬＡＴＩＯＮＴＯＬＹＭＰＨＡＴＩＣＭＥＴＡＳＴＡＳＩＳＸｕＬｉａｎｇｚｈｏｎｇ许良中；ＺｈｕＷｅｉｐｉｎｇ朱伟萍；...     

组织蛋白酶D、c－erbB－2和表皮生长因子受体在乳腺癌组织中的表达及其与淋巴结转移的关系

应用免疫组织化学的方法，对２７７例乳腺癌的组织蛋白酶Ｄ（Ｃａｔｈ－Ｄ）、ｃ－ｅｒｂＢ－２和表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）癌基因蛋白的表达及其与淋巴结转移的关系进行了研究。结果发现，Ｃａｔｈ－Ｄ表达阳性者１０７例（３８．６２％），阴性者１７０例（６１．３８％）。Ｃａｔｈ－Ｄ阳性的乳腺癌有淋巴结转移的占８３．１７％，Ｃａｔｈ－Ｄ阴性的乳腺癌有淋巴结转移的占３７．６４％，两者的差别极为显著（Ｘ￣２＝５５．０５，Ｐ＜０．０００１）。Ｃａｔｈ－Ｄ阳性的乳腺癌中，ｃ－ｅｒｂＢ－２阳性者５６例（５２．３４％）；Ｃａｔｈ－Ｄ阴性的乳腺癌中，ｃ－ｅｒｂＢ－２阳性者２７例（１５．８８％），两者有明显的差别（Ｘ￣２＝４１．５８，Ｐ＜０．０００１）。Ｃａｔｈ－Ｄ阳性的乳腺癌中，ＥＧＦＲ阳性的有４９例（４５．７９％）；Ｃａｔｈ－Ｄ阴性的乳腺癌中，ＥＧＦＲ阳性的仅２４例（１４．１２％），两者的差别亦极为显著（Ｘ￣２＝３３．９５，Ｐ＜０．０００１）。上述结果提示，Ｃａｔｈ－Ｄ阳性的乳腺癌恶性程度高，易转移、预后差。临床对上述病人应提供特别的治疗方案并抓紧随访工作。     

P-糖蛋白在肺癌中的表达及其临床意义

目的　探讨肺癌组织P糖蛋白(Pgp)的关系,以及复发肺癌与化疗效果的关系。　方法　采用免疫组织化学方法检测51例肺癌标本中的Pgp表达水平。　结果　51例肺癌组织中有20例Pgp表达阳性,阳性率为392%。Pgp表达与肺癌组织学类型无关,而在吸烟者与不吸烟者之间,有显著差异,但与吸烟史长、短无关。29例肺癌患者5年无瘤生存率与Pgp表达无关。15例复发肺癌患者接受联合化疗,Pgp阳性病例疗效较阴性者为差。　结论　Pgp表达与肺癌患者吸烟史有关;Pgp阳性患者化疗效果较差     

胃癌P-糖蛋白表达及其临床意义

采用免疫组织化学ABC法检测78例胃癌组织中多药材药基因产物P-糖蛋白。探讨胃癌组织中P-糖蛋白表达水平及其临床意义。结果表明,P-糖蛋白在胃癌组织中表达阳性率为42．3％（33／78）。P-糖蛋白表达在胄癌各临床分期、大体形态及组织学类型之间无显著性差异。胃癌组织中P-糖蛋白表达提示胃癌与多药耐药表型有关化疗药物的先天性耐药有关,可能是胃癌临床化疗疗效较低的重要原因。     

一种新型速效人胰岛素类似物的构建、制备及性质研究

目的：构建和制备出一种新型速效人胰岛素类似物（PIns）,进行其性质研究。方法：采用加端PCR的方法,扩增出在天然人胰岛素原N端添加精氨酸、脯氨酸、赖氨酸、脯氨酸4个氨基酸残基的重构胰岛素原基因片段,将其插入通用表达载体pET28 a后,再将经过改构后的硫氧还蛋白（1-20 aa）的基因片段与重构胰岛素原基因的5′端通过赖氨酸连接,成功构建了速效人胰岛素原类似物融合蛋白（FKPPIns）的表达载体（pET28 a-FKPPIns）。此融合蛋白在大肠杆菌BL-21（DE3）中以包涵体的形式表达,经包涵体洗涤和DEAE阴离子交换树脂纯化后进行复性、酶切。酶切产物经RP-HPLC纯化后,质谱法测定其分子量;等电聚焦法测定此蛋白的等电点;凝胶过滤法测定其自身的缔合性质。对新西兰大白兔肌肉注射纯化后PIns,进行初步的药效学评价。结果：获得了结构为R-P-K-P-Insu lin的PIns纯品,其等电点为7.3,自身缔合性较标准胰岛素显著下降。结论：PIns与标准人胰岛素相比,起效快、达峰时间及持续时间短。     

襄樊市1996年常规免疫接种率监测分析

对襄樊市１９９６年常规免疫接种率进行评价，分析了报告接种率不可信的原因。认为对现在采用的监测方法需要进一步完善，对报告接种率分析时不能仅凭Ｒ值的大小作结论，而应考虑多方面因素。