龙胆泻肝汤对大鼠急性肝性脑病的防治作用研究

[目的] 研究龙胆泻肝汤对硫代乙酰胺（TAA）所致大鼠急性肝性脑病的防治作用。[方法] 选择SPF级Wistar大鼠为研究对象,随机分为正常组、模型组、阳性药组（乳果糖）和龙胆泻肝汤组,每组8只。正常组和模型组每日灌胃给予10mL/kg生理盐水,阳性药组灌胃给予6g/kg乳果糖,龙胆泻肝汤组灌胃给予7g/kg龙胆泻肝汤,连续给药7d,每日1次。于第5天给药结束后开始造模,除正常组外,其余各组大鼠均腹腔注射TAA300mg/kg,连续两天。通过脑功能评分和Morris水迷宫评价大鼠的学习和记忆能力;检测血氨和结肠内容物pH值变化;采用肝、脑脏器系数、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、总胆红素（TBiL）的浓度和肝脏病理切片反映组织损伤;采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测大鼠血清中白介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平,脑中γ-氨基丁酸（GABA）、谷氨酸（Glu）和丙二醛（MDA）的含量。[结果] 与模型组相比,龙胆泻肝汤组大鼠的脑功能评分显著增加,逃避潜伏期显著降低,穿环指数显著增加;血氨和结肠内容物pH值显著降低（P<0.001）;其对脑脏器系数降低显著（P<0.001）,对肝脏器系数改善不明显;生化指标ALT、AST、ALP和TBiL显著降低（P<0.001）;血清中炎症因子IL-6和TNF-α显著低于模型组;改善大鼠肝组织病理学损伤及纤维化;大鼠脑中GBAB和MDA显著降低,Glu水平显著升高（P<0.01）。[结论] 龙胆泻肝汤可通过改善模型大鼠的学习和记忆能力,降低体内氨的含量,改善肝脏损伤;减少模型大鼠血清中炎症因子的含量,调节脑内GABA、Glu神经递质及MDA水平,发挥治疗肝性脑病的作用。     

黄芩素衍生物对大鼠急性肝性脑病模型的干预

[目的] 通过构建硫代乙酰胺（TAA）诱导的大鼠急性肝性脑病模型,研究黄芩素衍生物二磺酸基黄芩素（DB）对急性肝性脑病模型大鼠的保护作用。[方法] 选]择Wistar大鼠为研究对象,将其随机分为对照组、模型组、DB低、中、高剂量（6.25、25、100 mg/kg）组和阳性药（乳果糖,6 g/kg）组。各组大鼠灌胃给予相应剂量药物,对照组与模型组给予等量生理盐水。实验过程中通过Morris水迷宫实验检测大鼠行为学变化。DB干预7 d后处死大鼠,收集结肠内容物、肝脏及脑组织。通过快速血氨测定仪检测大鼠血氨含量;采用pH计法测定结肠内容物pH;通过全自动生化仪检测血清中天冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALP）、总胆红素（TBiL）的浓度;通过苏木精-伊红（HE）染色观察肝组织病理变化;采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白介素-6（IL-6）水平,前额叶皮质中γ-氨基丁酸（GABA）和谷氨酸（Glu）含量;通过免疫印迹法检测前额叶皮质中磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）和磷酸化蛋白激酶B（p-AKT）的蛋白表达。[结果] 与模型组相比,DB低、中、高剂量组可降低肝性脑病大鼠死亡率;提高大鼠学习记忆能力;改善大鼠肝组织病理学损伤和纤维化;DB中、高剂量组可显著降低血氨和结肠内容物pH（P<0.01）;显著降低大鼠血清ALT、AST、ALP、TBiL、TNF-α、IL-6水平（P<0.05或P<0.01）;显著降低前额叶皮质中GABA含量（P<0.01）,升高前额叶皮质中Glu的含量。DB中剂量组可显著抑制前额叶皮质中PI3K、p-AKT蛋白表达（P<0.01）。[结论] DB能够改善TAA诱导的急性肝性脑病大鼠的学习记忆能力和肝功能,降低体内氨水平,抑制炎症因子表达,调节前额叶皮质中神经递质（GABA和Glu）水平,其作用机制可能与调控PI3K/AKT信号通路有关。     

基于CYP450酶的补骨脂素及异补骨脂素与黄独乙素的药物相互作用研究

目的 基于细胞色素P450(CYP450)代谢酶探究补骨脂素和异补骨脂素对黄独乙素在大鼠体内代谢的影响。方法 采用大鼠离体循环肝灌流方法,考察大鼠分别给予补骨脂素或异补骨脂素1、3、7 d后,黄独乙素在肝脏中的代谢情况;利用UPLC-MS/MS检测循环灌流液中剩余黄独乙素的含量;通过大鼠眼内眦取血的方法研究大鼠分别给予补骨脂素或异补骨脂素干预1周,再给予黄药子提取物(10 g·kg^-1)后体内黄独乙素的药动学变化,药动学参数采用DAS 2.0软件中的非房室模型法进行计算。结果 大鼠给予补骨脂素或异补骨脂素后,循环灌流液中黄独乙素的含量相对增加,且补骨脂素或异补骨脂素给药时间延长后,对酶的抑制程度更强;当大鼠给予补骨脂素或异补骨脂素干预后,与非干预组(黄药子提取物组)相比,药时曲线下面积(AUC_0~t)和平均驻留时间(MRT_0~t)增加,消除半衰期(t_1/2Z)减小。结论 补骨脂素/异补骨脂素可通过抑制肝脏中CYP450酶的活性降低其对黄独乙素的代谢,使黄独乙素在肝脏中代谢减少,造成蓄积,临床用药应注意含有补骨脂素/异补骨脂素或黄独乙素中药在合用时可能产生的药物相互作用。     

延胡索生熟饮片在复方配伍后药效成分溶出规律研究

[目的]研究延胡索生熟饮片在不同复方中配伍后生物碱类成分的溶出规律。[方法]以金铃子散、元胡止痛片和延胡索汤的组成为依据,将延胡索和醋延胡索分别入3个复方中,采用超高液相色谱法(UPLC)对3个复方配伍后的水提液进行检测,观察生物碱类成分的溶出规律。[结果]无论选用延胡索还是醋延胡索,3个复方配伍组合与未配伍者相比,延胡索乙素溶出量均未显著提高,去氢紫堇碱也呈现相同的规律。[结论]延胡索生熟饮片在这3个复方配伍组合后对其延胡索乙素和去氢紫堇碱溶出量的影响差异较小。