YAP干扰腺病毒载体对宫颈癌增殖、迁移及侵袭的影响

目的 探索YAP蛋白对宫颈癌细胞的恶性增殖、迁移及侵袭性的作用.方法 分别以腺病毒靶向YAP干扰载体(pAd-si-YAP)、重组空载体腺病毒(pAd-mock)或磷酸缓冲盐溶液(PBS)感染CaSki细胞.采用定量聚合酶链反应(qPCR)、蛋白质印迹法(Western blotting)、四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)、流式细胞法、划痕试验以及细胞侵袭试验分别分析感染后CaSki细胞的YAP mRNA表达、YAP蛋白表达、细胞增殖活力、细胞周期及凋亡、细胞迁移能力以及细胞侵袭能力.结果 qPCR结果显示Ad-si-YAP感染CaSki细胞的YAP mRNA表达明显低于pAd-mock感染的CaSki细胞及PBS处理的CaSki细胞[(22.01±0.24)比(80.12±0.31)、(84.18±0.22),P<0.05],表明Ad-si-YAP可以抑制YAP基因转录.蛋白质印迹法结果显示Ad-si-YAP感染CaSki细胞的YAP蛋白表达低于pAd-mock感染的CaSki细胞及PBS处理的CaSki细胞[(0.6±0.018)比(1.5±0.031)、(1.8±0.27),P<0.05].MTT结果显示24 h后pAd-mock感染的CaSki细胞及PBS处理的CaSki细胞增殖明显快于Ad-si-YAP感染CaSki细胞(P<0.05).流式细胞结果显示通过沉默YAP后,CaSki细胞周期停滞于G0/G1期明显增加(P<0.05),同时CaSki细胞增多(P<0.01).划痕试验发现沉默YAP后CaSki细胞的迁移能力下降[(40.01±0.16)比(81.02±0.22)、(86.04±0.31),P<0.05],说明YAP可以促进CaSki细胞迁移.细胞侵袭试验发现沉默YAP后CaSki细胞的侵袭能力下降[(120±4)比(640±3)、(680±4),P<0.05].结论 YAP蛋白的表达可导致宫颈癌细胞的恶性增殖、迁移及侵袭,是应用于宫颈癌综合治疗的一个潜在靶点.     

基于GRADE系统的耳穴贴压治疗原发性失眠系统评价

评价耳穴贴压治疗原发性失眠的临床疗效和安全性。综合检索国内外大型数据库,经过严格筛选后运用Revman 5.2软件对符合标准的随机对照试验(RCTs)结果进行Meta-分析,采用GRADE profiler 3.6软件对结果证据质量进行评级。最终纳入8篇文献,共894例患者。耳穴贴压与假耳穴、耳穴安慰贴压和空白对照:匹兹堡睡眠质量指数量表(PSQI)总分[WMD=-3.48,95%CI(-3.96,-3.00)],睡眠潜伏期[WMD=-10.14,95%CI(-17.16,-3.12)],觉醒次数[WMD=-9.98,95%CI(-1.10,-0.48)];耳穴贴压与西药对照:PSQI总分[WMD=-3.62,95%CI(-4.59,-2.65)]。证据等级:除耳穴与假耳穴、安慰贴压或空白对照的PSQI总分证据为中级,其余均为极低级;所有研究均无不良事件报道。耳穴贴压治疗原发性失眠安全,可有效提高患者的睡眠质量,但该结论的证据质量等级不高,故该研究结论需谨慎对待,需大样本、高质量的临床试验进一步证实。