RP-HPLC法测定山茱萸环烯醚萜总苷中马钱苷和莫诺苷含量

目的建立反相高效液相色谱法测定山茱萸环烯醚萜总苷中马钱苷和莫诺苷含量的方法,为完善山茱萸环烯醚萜总苷的质量评价提供依据。方法色谱柱:Lichrosphere C18柱(4.6mm×150mm,5μm);流动相:乙腈-水梯度洗脱(0~12min,乙腈比例由10%增加到55%);流速1.0mL/min;柱温30℃;检测波长240nm。结果马钱苷和莫诺苷分别在0.088~0.528μg(r=0.999 8)和0.088~0.352μg(r=0.999 5)之间范围内线性关系良好;平均回收率(n=6)分别为98.7%(RSD=1.3%)、98.6%(RSD=0.8%)。结论所建立的方法简便、准确、分离效果好、重复性好,可以用于控制山茱萸环烯醚萜总苷的质量。     

生地-山茱萸对糖尿病大鼠血管的保护作用

目的探讨生地-山茱萸药对干预糖尿病大鼠血管病变的机制。方法高脂饲料喂养,一次性腹腔注射STZ,筛选合格的糖尿病大鼠模型,灌胃给药12 w。12 w末,戊巴比妥钠麻醉后取血,制备血浆和血清。测定血清中一氧化氮(NO)、总-氧化氮合酶(T-NOS)和总超氧化物歧化酶(SOD)活力,放射免疫测定血清中血栓素(TXB2)和前列腺素(6-keto-PGF1α)及血浆中内皮素(ET)含量。结果糖尿病大鼠NO下降,灌胃生地-山茱萸药对组有上升趋势,ET和SOD与之相反。模型组大鼠血清中TXB2升高,用药后,药对组明显下降(P<0.01),6-keto-PGF1α与之相反。结论生地-山茱萸药对可恢复NO/ET和TXA2/PGI2平衡,SOD活力增加,表明清除自由基能力增强,从而保护血管内皮,抑制因糖尿病引起的包括心脏病变、主动脉病变和肾病变在内的多种血管并发症的发生与发展。     

山茱萸最佳配伍组分对高糖致ECV304细胞氧化损伤的保护作用

目的研究山茱萸最佳配伍组分(环烯醚萜苷、三萜酸和多糖以2∶1∶2配伍)对高糖培养的内皮细胞(human um-bilical vein endothelium cells,ECV304)氧化应激的影响。方法体外培养细胞,在细胞板内加入含30 mmol.L-1高糖的10%胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)RPMI 1640培养液,加入空白、山茱萸最佳配伍组分大剂量、小剂量含药血清。同时设10%FBS RPMI 1640培养液作正常对照,川芎嗪作阳性对照。在37℃、5%CO2饱和湿度培养48 h后,取细胞上清液测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)。应用激光共聚焦显微镜检测进入细胞内2',7'-二氯荧光黄双乙酸酯(DCFH-DA)荧光强度来反映细胞内ROS含量。结果高糖组细胞上清液中SOD、GSH-Px活性降低,MDA、ROS含量增加(P<0.01),提示血管内皮细胞受损,抗氧化能力降低。而山茱萸最佳配伍组分能提高SOD、GSH-Px活力,降低ROS、MDA含量,与高糖组比较差异有显著性(P<0.05,0.01)。结论山茱萸最佳配伍组分能够保护血管内皮细胞,具有防治糖尿病血管病变的作用,其作用机制与抑制氧化应激有关。     

生地黄-山茱萸对AGEs致HUVEC细胞损伤的保护作用

目的 观察生地黄、山莱萸对晚期糖基化终产物(AGEs)作用下人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的保护作用.方法 体外培养HUVEC,将细胞分为正常对照组、AGEs组、生地黄组、山茱萸组、生地黄-山茱萸分煎及合煎组,加入终浓度为0.125、0.062 5、0.031 25 g/L的药物预孵lh后,加入200 mg/L的AGEs作为刺激物,继续培养24h后,用CCK-8测定并计算药物对AGEs致HUVEC损伤的保护率;取各组细胞上清液,试剂盒测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、乳酸脱氲酶(LDH),ELISA法测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β.结果 生地黄、山茱萸、生地黄-山茱萸(0.125、0.062 5、0.031 25 g/L)对AGEs致HUVEC损伤均有保护作用.AGEs组细胞上清液中SOD活性、NO含量降低(P＜0.05～0.01),MDA、LDH含量增加(P＜0.05～0.01),TNF-α、IL-1β分泌增加(P＜0.05～0.01).而各给药组能提高SOD活性、NO含量,降低LDH、MDA,减少TNF-α和IL-lβ分泌,与AGEs组比较有显著性差异(P＜0.05～0.01).结论 生地黄、山茱萸、生地黄-山茱萸通过增加内皮细胞NO生成量、抑制氧化应激、调节细胞分泌功能来保护血管肉皮细胞的,尤以生地黄-山茱萸保护HUNEC最为明显.     

山茱萸配伍组分对糖尿病大鼠心血管病变的保护作用

目的通过观察糖尿病大鼠血脂、血管损伤相关因子及病理变化,分析山茱萸配伍组分保护糖尿病心血管病变的作用机制。方法链脲佐菌素(STZ)复合高脂饲料造成糖尿病大鼠模型,取造模成功大鼠按血糖值随机分组,设立模型组、格列美脲(GLMN)组(0.4 mg.kg-1)、山茱萸配伍组分低剂量(PC-L)组(60 mg.kg-1)、高剂量(PC-H)组(120mg.kg-1),灌胃给药12周,另设空白对照组,模型组与空白组大鼠以蒸馏水灌胃。试剂盒测定血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C、NO、T-NOS;放射免疫测定血清中TXB2和6-keto-PGF1α及血浆中ET含量。取大鼠心脏并计算脏器系数,同时观察大鼠心脏和胸主动脉病理组织学变化。结果 PC-L、PC-H组大鼠血清中TC、TG、LDL-C、TXB2含量减少,LDL-C/HDL-C、TXB2/6-keto-PGF1α值降低,与模型组比较差异有显著性(P<0.05,P<0.01)。PC-L组NO、T-NOS含量有增加的趋势,而ET含量减少、NO/ET值升高,与模型组比较差异有显著性(P<0.05);PC-H组NO、T-NOS含量增加、ET含量减少、NO/ET值升高,但与模型组比较差异无显著性。结论山茱萸配伍组分可调节血脂,恢复血管收缩与舒张的动态平衡,改善血液流变性和减轻心脏及胸主动脉病变,具有保护糖尿病大鼠心血管病变的作用。