细胞间粘附分子—1^125I标记及其纯度、免疫活性的鉴定

目的：建立细胞间粘附分子－1（intracellular adhesion molecule-1 ICAM-1)^125I标记方法及鉴定其纯度和免疫活性。方法：用氯胺－T法标记ICAM－1,用Sephadex G-50柱层析分离,用纸层析法鉴定^125I-ICAM-1的纯度,放免法检测其免疫活性,结果：^125I-ICAM-1比活度为77．84uCi/ug蛋白,标记率为65．54％,^125I-Na的放化纯度为97．27％,^125I-ICAM-1能够与ICAM－1－Ab的最大结合为88．64％,并且随ICAM－1－Ab滴度的降低而增高。结论：成功建立^125I标记ICAM－1的方法,并且^125I-ICAM-1具有一定的免疫活性。     

甲状腺球蛋白抗原决定簇基因的克隆及原核表达载体的构建

目的：扩增甲状腺球蛋白抗原决定簇基因，构建可转化人大肠杆菌的重组表达载体。方法：用TRIzol一步法从甲状腺组织中提取总RNA，RT—PCR逆转录出cDNA，PCR扩增出目的基因，与pET102／D—TOPO载体进行拓扑克隆．对重组质粒进行PCR、酶切及测序鉴定。结果：甲状腺球蛋白抗原决定簇基因及其重组表达载体经鉴定准确无误。结论：成功构建了带有目的基因的原核表达载体。     

甲状腺乳头状癌中原癌基因c-fos的低表达

甲状腺乳头状癌是临床常见的肿瘤 ,约占各种甲状腺癌的 80 %。目前认为 ,原癌基因在肿瘤形成过程中起着重要作用 ,其中ｃ ｆｏｓ是核蛋白癌基因 ,它的激活是基因表达最早的变化之一。因此 ,它与细胞癌变之间的关系就更加受到人们的关注。因样品中细胞数量的不同会影响检测结果 ,我们在国内首次引入细胞管家基因 β ａｃｔｉｎ作为多重扩增的内参照物 ,达到资料比较的标准化 ,用于研究ｃ ｆｏｓ在甲状腺乳头状癌中的表达。一、材料与方法1 材料 :(1)乳头状癌组 :14例经病理学检验确诊为甲状腺乳头状癌的组织标本。 (2 )正常对照组 :包括 3例…     

孕期铁营养状况的变化趋势

妊娠期妇女是缺铁性贫血的高发人群,国内在孕期贫血及孕妇铁营养状况方面做了一些工作,多反映横断面的情况。为了解孕期贫血、孕期铁营养状况的变化,我室自1985年1月至1986年1月对天津市和平区两个街道的80名初孕期妇女进行了纵向追踪观察。     

人甲状腺过氧化物酶抗原决定簇基因的序列分析

本实验室已用逆转录-聚合酶链式反应(RTPCR)法扩增了人甲状腺过氧化物酶(hTPO)抗原决定簇基因:1702—2622,并对该段基因进行了亚克隆,获得3个重组质粒,分别定名为PESY1011,PESY1012,PESY1013(重组载体为PUC18)。本实验利用聚合酶链式反应-双链DNA(PCR-dsDNA)测序方法对3个重组质粒进行了测序,以确证我们克隆hTPO抗原决定簇基因是成功的。     

人ICAM-1膜外Ⅰ-Ⅲ功能区基因在原核系统中表达,人血清sICAM-1 RIA建立和临床应用

人细胞间粘附分子-1（intracellular adhesion molecule—1,ICAM—1）是一种细胞表面单链跨膜糖蛋白,参与抗原识别、补体结合、细胞粘附功能。其膜外区脱落人血称为可溶性细胞间粘附分子-1（sICAM—1）,在甲状腺滤泡上皮细胞的异常表达与Graves’disease（GD）的发病相关,其血清水平对判断GD的疗效、停药和复发具有重要意义,目前国内尚无重组sICAM—l和sICAM-1 RIA建立的报道,国外仅有sICAM—1酶免试剂盒,但价格较高．不易推广。     

新生儿先天性甲状腺功能低下的早期诊断和治疗（附20例报告）

1986年7月～1991年12月筛查天津市区新生儿158,032例,查出新生儿先天性甲状腺功能低下(简称甲低)20例。其中3例死于合并症。确诊后即给予甲状腺片治疗,服药2周后血清激素水平基本恢复正常,临床症状消失。骨龄于治疗6～8个月恢复正常。随访1～5 1/2年。17例患儿智力及体格发育均在正常范围。血清甲状腺激素水平正常。药量的调整根据甲状腺激素水平、骨龄及临床表现而定。     

人甲状腺过氧化物酶抗原决定簇基因在大肠杆菌的表达及临床测定应用

目的 表达有抗原活性的人甲状腺过氧化物酶（hTPO）片段，并将表达产物用于临床测试。方法 将hTPO抗原决定簇基因连入pGEX-4T-3，然后转入E.coli BL21，异丙基β－D－硫代半乳糖苷诱导表达。表达产物谷胱甘肽巯基转移酶（GST）－hTPO经亲和层析纯化，并鉴定免疫学活性。以GST－hTPO为抗原建立检测血清TPO抗体（Ab）的ELISA方法。用此方法检测一批自身免疫性甲状腺疾病（AITD）患者血清TPOAb，用病理学方法观察同批患者甲状腺组织吕HLA－DR抗原、树突状细胞及淋巴细胞浸润程度。结果 成功地表达了hTPO抗原决定簇基因，纯化产物GST－hTPO纯度高，有良好的免疫学活性，以此抗原建立的ELISA方法有良好的重复性，CV在5．93％－7．59%之间。ELISA方法与RIA方法比较，检测结果显著相关（n=37,r=0.613,P＜0．001）。血清TROAb水平及HLA－DR抗原、树估状细胞分布随甲状腺组织淋巴细胞浸润程度加重呈逐渐增多趋势。结论 原核表达产物GST－hTPO可用于建立TPOAb常规检测方法；AITD患者血清TPOAb水平与甲状腺组织损伤有密切关系。     

甲状腺乳头状癌患者ret基因重排突变

目的　研究ret基因重排突变与甲状腺乳头状癌(PTC)发生、发展的关系。方法　检测27例PTC,另有其他组织类型甲状腺癌10例、良性甲状腺病变33例及病变旁正常甲状腺组织30例(对照)甲状腺组织标本。首先以多重PCR筛查重排突变基因(ret/PTC)的存在,再以鉴定PCR(ID PCR)确定ret重排突变类型(ret/PTC1, 2, 3),最后通过自动测序证实。结果　(1)有15例标本显示ret/PTC阳性,其中11例为ret/PTC1; 3例为ret/PTC3; 1例为ret/PTC2。ID PCR产物通过直接基因测序得到证实。( 2 )所有15例ret/PTC阳性的组织标本均为PTC,发生率为55. 6% (15 /27)。(3)ret/PTC阳性及阴性的两组PTC患者在性别、年龄、肿瘤大小及颈部淋巴结累及率方面差异无统计学意义。但甲状腺外软组织侵犯率在ret/PTC阳性的患者低于阴性患者(33. 3% vs66. 7%,P<0. 05)。唯一1例有远处肺转移的患者为ret/PTC阴性。结论　ret重排突变特异性发生于PTC中,可能与PTC的发病密切相关。