儿童肺炎克雷伯菌感染临床行为研究

目的　分析儿童肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae,KP）感染的临床特征及耐药性,为预防和控制耐药的KP感染提供临床依据。方法　收集枣庄市妇幼保健院2019年1月至12月经细菌培养为KP感染的68例脓毒症儿童临床资料（男28例,女40例）,按照KP耐药表型分为超广谱β-内酰胺酶（extended spectrum β-lactamases,ESBLs）阳性KP感染组、ESBLs阴性KP感染组,比较两组患儿预后、住院时间、治疗中使用抗生素级别、抗生素种类、机械通气等的差别。计数资料采用χ²检验或Fisher确切概率法,计量资料采用Mann-Whitney U检验。结果　ESBLs阳性KP感染组病死率高于ESBLs阴性KP感染组（3/23比0/45）,住院时间长于ESBLs阴性KP感染组,使用抗生素种类多于ESBLs阴性KP感染组,使用碳青酶烯类率高于ESBLs阴性KP感染组,机械通气率高于ESBLs阴性KP感染组（均P<0.05）;两组住院史及抗生素暴露差异均无统计学意义（均P>0.05）。结论　ESBLs阳性KP感染与预后呈负相关性。     

5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷标记大鼠骨髓间充质干细胞的有效性

背景：深入准确地研究骨髓间充质干细胞在体内外增殖、分化的规律,寻找安全、有效、灵敏度高、特异性强、简便的标记活细胞的方法至关重要。目的：探索5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷标记骨髓间充质干细胞的有效性及对其增殖能力的影响。方法：全骨髓贴壁法培养扩增SD大鼠骨髓间充质干细胞至第3代。将细胞以5×107L-1浓度接种于96孔板中,掺入法加入终浓度为0,10,20,50μmol/L5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷,分别在培养24,48和72h检测5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷标记细胞的阳性率、标记后的细胞形态,并绘制标记细胞的生长曲线。结果与结论：各浓度组标记率均随标记时间延长而升高（P〈0.05）;各时间点标记率随标记浓度的升高而增加,但其差别无显著性意义（P〉0.05）。10μmol/L5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶标记骨髓间充质干细胞72h即可获得良好的标记率。标记前后各组间充质干细胞生长曲线均呈＂S＂形。说明在实验浓度范围内应用5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷体外标记骨髓间充质干细胞有效,不影响细胞的增殖,且10μmol/L5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷标记骨髓间充质干细胞72h即可获得良好的标记率。     

骨髓间充质干细胞异体移植对大鼠肝细胞增殖影响的实验研究

目的探讨骨髓间充质干细胞治疗急性肝衰竭的机制。方法全骨髓贴壁法培养扩增原代SD大鼠骨髓干细胞,传代培养,形态学、生长曲线及免疫表型鉴定骨髓间充质干细胞,移植治疗D-氨基半乳糖联合脂多糖致肝衰竭大鼠,观察干预治疗后1d、3d、5d、7d肝组织病理学改变、肝组织PCNA蛋白、CyclinDlmRNA表达量。结果原代培养大鼠骨髓间充质干细胞传代后,形态较均一,为梭形或纺锤形,高表达CD90（94．3％）,CD29（99．4％）,不表达CD11b／c（5．7％）,CD45（3．2％）。骨髓间充质干细胞移植减轻肝脏组织病理损伤（P〈0．05）。BMSCs治疗组PCNA的蛋白表达高于对照组（P〈0．01）。干预后不同时间点治疗组细胞周期蛋白D1的mRNA表达高于对照组（1．182±0．248VS0．468±0．053、0．858±0．114vs0．218±0．178）,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论骨髓间充质干细胞移植减轻肝脏病理损伤,上调细胞周期蛋白DlmRNA的表达,促进肝再生,对急性肝衰竭有治疗作用。     

替比夫定对慢性HBV感染孕妇CD4＋CD25＋调节性T细胞的影响

目的 通过替比夫定对慢性HBV（Hepatitis B Virus）感染妊娠妇女外周血细胞CD4＋CD25＋调节性T细胞（CD4＋CD25＋ regulatory T cells）细胞率影响,探讨乙肝病毒宫内感染的可能作用机制.方法 选取慢性HBV感染孕妇100例,分为治疗组和对照组,治疗前及治疗后1月、3月、分娩前流式细胞术检测孕产妇Tregs比率,新生儿出生后检测乙肝五项及HBVDNA定量,酶联免疫吸附法检测乙肝五项,实时荧光定量PCR检测孕妇及新生儿HBVDNA定量,全自动生化分析仪检测孕妇肝功能.结果 对照组孕妇所生49例新生儿中,有5例HBsAg阳性,阳性率为11.2％,治疗组孕妇所生50例新生儿中有0例HBsAg阳性,阳性率为0％,两组相比差异具有统计学意义（x2=5.373,P＜0.05）.治疗组孕妇外周血Tregs比率治疗前、治疗后1月、3月、分娩前Tregs分别为（4.85±1.83）％、（3.26±1.39）％、（2.24±1.47）％、（1.78±0.56）％,对照组妇外周血Tregs比率治疗前、治疗后1月、3月、分娩前外周血Tregs比例分别为：（4.62±2.01）％、（4.59±2.51）％、（3.42±2.90）％、（1.99±1.64）％.妊娠时间与替比夫定抗病毒治疗之间有交互作用（F=3.88,P＜0.05）,治疗组与对照组CD4＋CD25＋调节性T细胞的差异有统计学意义（F=10.56,P＜0.05）.治疗前后不同时间的CD4＋CD25＋调节性T细胞的差异有统计学意义（F=42.39,P＜ 0.001）.结论 替比夫定能降低乙肝母婴垂直传播,降低妊娠妇女Tregs细胞比率.     

肝纤维化大鼠肝脏血管紧张素Ⅱ受体1型的表达及其与α-平滑肌肌动蛋白表达相关性研究

目的 了解血管紧张素Ⅱ受体1型(angiotensinⅡ type 1 receptor,AT1R)在肝纤维化大鼠肝脏的表达及其与胶原纤维含量和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的关系.方法 将30只SD大鼠随机分成正常组(n=10)和肝纤维化组(n=20).正常组正常饲养,肝纤维化组给予40% 四氯化碳(CCL4)橄榄油0.4 mL/100 g体质量背部皮下注射,每3 d注射1次,第5 w末处死两组大鼠,肝组织制备成石蜡切片后进行Masson三色染色、AT1R和α-SMA免疫组织化学染色,采集图片后用image pro plus 6.0软件对阳性表达进行累计光密度测定.对所得数据进行相关和回归分析.结果 AT1R在正常组大鼠肝脏不表达或血管周围弱表达,在肝纤维化组肝脏汇管区周围和纤维间隔周围大量表达,其主要在肝细胞浆和(或)膜表达,肝星状细胞未见表达;半定量测定及相关分析结果 显示,α-SMA与胶原纤维、AT1R与胶原纤维、AT1R与α-SMA的相关系数分别为0.958、0.971、0.990(P＜0.01).结论 AT1R在肝纤维化大鼠肝细胞大量表达,在肝星状细胞不表达,AT1R的含量与胶原纤维含量、α-SMA表达量存在正相关性.     

5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷标记大鼠骨髓间充质干细胞的有效性

背景:深入准确地研究骨髓间充质干细胞在体内外增殖、分化的规律,寻找安全、有效、灵敏度高、特异性强、简便的标记活细胞的方法至关重要.目的:探索5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷标记骨髓间充质干细胞的有效性及对其增殖能力的影响.方法:全骨髓贴壁法培养扩增SD大鼠骨髓间充质干细胞至第3代.将细胞以5×107 L-1浓度接种于96孔板中,掺入法加入终浓度为0,10,20,50 μmol/L 5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷,分别在培养24,48和72 h检测5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷标记细胞的阳性率、标记后的细胞形态,并绘制标记细胞的生长曲线.结果与结论:各浓度组标记率均随标记时间延长而升高(P < 0.05);各时间点标记率随标记浓度的升高而增加,但其差别无显著性意义(P > 0.05).10 μmol/L 5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶标记骨髓间充质干细胞72 h即可获得良好的标记率.标记前后各组间充质干细胞生长曲线均呈"S"形.说明在实验浓度范围内应用5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷体外标记骨髓间充质干细胞有效,不影响细胞的增殖,且10 μmol/L 5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷标记骨髓间充质干细胞72 h即可获得良好的标记率.