实时定量RT-PCR的原理及方法

实时定量RT-PCR广泛应用于定量检测mRAN表达水平,为基础研究、分子药物学和生物技术研究提供了一种有力的方法。该法具有易操作、高通量、敏感性高和特异性强的特点,随着新酶、新探针和新仪器的发展而得到快速的发展。本文将对实时定量RT-PCR的定量原理、仪器应用、探针种类的研究进展以及细胞因子mRNA表达水平检测上的应用作一综述。     

金属硫蛋白对仔猪抗氧化功能及SOD基因表达的影响

目的：用仔猪作模型,研究经锌元素诱导的外源性金属硫蛋白（Zn—MT）对机体抗氧化功能和超氧化物歧化酶（SOD）基因表达的影响．方法：选用杜长大杂交仔猪18头,随机分为3组（1,2和3）．分别肌肉注射经生理盐水溶解的猪肝Zn—MT0mg／kg（1组）,0．8mg／kg（2组）,1．6mg／kg（3组）,让仔猪运动产生应激．注射MT后3h和6h,分别从每组取3头仔猪屠宰取肝脏,测定肝脏中与抗氧化有关的生化指标,检测肝脏SOD基因表达水平．结果：在应激条件下,补充外源性Zn—MT一段时间后,仔猪肝脏SOD,GSH—PX活性显著升高（P〈0．05）,MDA含量显著降低（P〈0．05）,肝脏抗活性氧和抗超氧阴离子水平也有提高的趋势．在注射Zn—MT后6h,0．8mg／kg．1．6mg／kg组仔猪肝脏SOD基因表达水平比对照组显著提高（P〈0．05）．0．8ms／kg组和1．6ms／kg组6hSOD基因表达水平比3h显著增加,表明MT对SOD基因表达的诱导与时间和剂量关系密切．结论：补充外源性Zn—MT可提高应激机体的抗氧化物酶活性,从而提高机体的抗应激能力．     

以游离脂肪酸为结合配体的GPCRs的研究进展

食物营养成分在肠道中可被分解产生游离脂肪酸.游离脂肪酸除了被吸收氧化分解产生能量供机体利用外,还能通过结合脂肪酸受体激活信号通路,参与多种生理功能的调节,如维持能量平衡、代谢稳态、调节脂质形成与分解、影响机体免疫、结识流动消化成分间接监测菌群数量等.被确认的游离脂肪酸受体包括结合长链脂肪酸的G蛋白偶联受体(GPR)12...     

仔猪肠道微生物研究进展

肠道菌群在哺乳动物及人类健康的作用正日益受到重视。仔猪的健康生长需要一个动态平衡的肠道微生态环境。然而,在猪的生命周期中,从食管到直肠的微生物分布与组成存在时间和空间的变化。健康的肠道菌群具有促进猪的营养代谢,维持肠黏膜屏障,调节免疫应答,抑制病原菌感染等功能。多种因素对猪肠道菌群的形成与稳定具有重要的作用,包括分娩方式（经过产道或剖宫产）、幼龄时期饮食（母乳或配方饲料）、抗生素或抗生素样分子的使用等。本文主要从仔猪肠道微生物组成与定植、功能、影响肠道微生物的因素等方面论述了仔猪肠道微生物与仔猪肠道健康的关系,从而加深肠道微生物对维护仔猪肠道健康作用的认识。     

质谱技术在代谢组学研究中的应用

代谢组学(metabonomics)概念首先由Nicholson等[1]在1999年提出,将其定义为:对病理(生理)刺激或基因改变时生物体系的动态代谢响应的多参数定量分析.即代谢组学是关于生物内源代谢物整体及其变化规律的科学,它的中心任务就是检测、量化和绘制生物代谢组的动态变化规律,并将该变化规律和所发生的生物化学反应过程联系起来[2].     

抗性淀粉对断奶仔猪血糖和激素水平的影响

目的:探讨抗性淀粉(RS)对动物血糖和激素水平的影响。方法:选择(28±2)d断奶的杜×长×大三元杂交仔猪(平均体重8.8kg±1.0kg)12头,随机分为4组,分别饲喂以玉米、早籼稻糙米、糯米和RS为淀粉来源配制的4种等能、等氮、等淀粉试验饲料,饲养25d后,测定不同饲料淀粉来源对断奶仔猪血糖、胰岛素、GH、T3和T4水平的影响。结果:与采食其他饲料组相比,RS组几乎所有时间点的胰岛素和血糖浓度均降低,并且维持在稳定水平,GH、T3和T4的浓度也降低;糯米饲料组采食后1h血糖和胰岛素浓度显著升高(P<0.05)。结论:RS可降低血液中血糖和胰岛素的浓度,减缓体内GH、T3和T4的分泌。     

L-精氨酸对缓解呕吐毒素刺激大鼠损伤作用的研究

目的探讨补充精氨酸对低剂量呕吐毒素应激损伤的保护作用。方法 30只雄性SD大鼠随机分为空白对照组,1.0mg/kg bw呕吐毒素应激组和应激补充350 mg/kg bw精氨酸组。以观察精氨酸对呕吐毒素应激大鼠摄食与生长情况、脏器指数和血液各项指标的影响。结果在21d的试验期内,精氨酸能改善呕吐毒素应激造成的日增重下降,胸腺萎缩以及血清谷草转氨酶和丙二醛浓度升高的状态,达显著水平。结论精氨酸具有的营养及免疫调节双重作用,能在一定程度上缓解呕吐毒素应激损伤。     

果胶对猪血氨的影响

目的　正确评定可溶性纤维———果胶在猪的营养价值。方法　选择体重约2 5kg的健康生长猪4头,在猪的门静脉、颈动脉安装血管插管,采用交叉法,随机分为2组,试验组加入8%果胶,对照组不加果胶,在采食前( 0h)、采食后1、2、3、4、5、6、7h抽取动、静脉血液,测定血氨浓度。结果试验组门静脉血氨浓度低于对照组,在3h时差异有显著意义(P <0 .0 5 ) ;试验组颈动脉血氨浓度与对照组比差异无显著性(P >0 .0 5 ) ;试验组动静脉血氨浓度差在采食后均低于对照组,在1h、3h、4h时差异有显著性(P <0 .0 5 )。结论　在采食后7小时内,果胶有降低猪血氨的作用。     

大豆寡糖对断奶环江香猪小肠发育及SGLT1和GLUT2表达的影响

目的研究大豆寡糖(SBOS)对小肠发育及其吸收功能的影响。方法选用21 d龄断奶的环江香猪12头,随机分为2组,每组6头,分别饲喂添加0.5%SBOS的日粮和基础日粮,试验期14 d。试验结束后采集血液,肝素抗凝,离心分离血浆,测定血糖浓度;放血处死后取空、回肠组织各两份,另一份采用于组织固定,进行形态学观察;一份利用荧光定量RT-PCR法,测定葡萄糖转运载体SGLT1和GLUT2 mRNA的表达。结果与基础日粮组相比,SBOS组葡萄糖转运载体的表达具有肠道空间位置特异性,空肠SGLT1和GLUT2 mRNA的表达量显著高于回肠(P<0.05);并显著高于基础日粮组空肠的表达量(P<0.05);SBOS显著提高了仔猪小肠绒毛高度与隐窝深度的比值(P<0.05)。结论 SBOS能促进小肠发育,提高肠道对营养物质的吸收。     

抗菌肽buforinⅡ的研究进展

抗菌肽buforinⅡ是由亚洲蟾蜍bufo bufo gargarizans胃组织中分离得到一种烈性抗菌肽,具有很强的抗菌活性。它的结构和多数α螺旋抗菌肽相似,但作用机制却有较大的区别。BuforinⅡ利用其特有的结构在不造成膜穿孔的情况下迅速通过细胞膜,与胞内的生物大分子核酸结合,诱发细胞死亡。本文就buforinⅡ的结构,作用机制,研究现状及其应用前景进行阐述。