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1.
目的旨在明确肥厚性心肌病(HCM)的突变谱并探讨基因型与表型的关系。方法前瞻性纳入2010年11月至2012年11月在阜外医院确诊为肥厚型心肌病的71例患者,应用半导体靶向二代测序鉴定基因突变,对患者进行全面评估和随访,应用生存分析等明确基因型与短期预后的关系。结果 33例(46%)患者被检出34种突变位点,其中首次报道的突变位点占65%(22/34),MYH7和MYBPC3基因各占35%(12/34),多基因突变占12%(4/33)。与突变阴性患者相比较,突变阳性者的发病年龄早[(40±12)岁vs(49±11)岁,P=0.001];家族史和家族猝死史发生率高(52%vs 13%,P0.001;50%vs 1%,P0.001);非持续性室性心动过速多见(36%vs13%,P=0.022)。随访(36±8)个月,Kaplan-Meier生存分析显示突变阳性者较突变阴性患者心血管死亡发生率高(P=0.019)、心衰住院率高(P=0.037)和心脏性猝死发生率高(P=0.010)。除了年龄≤35岁的患者多见(39%vs 0%,P=0.041),MYH7突变携带者较MYBPC3突变携带者的表型和预后无统计学差异。在4例多基因突变携带者中,2例患者植入埋藏式心脏复律除颤器,其中1例发生适当放电;2例随访为终末期HCM并伴有左室血栓和心衰住院,其中1例列入心脏移植名单。结论囊括几乎所有致病基因的二代测序方法增加了基因突变的检出率。基因突变阳性预测不良预后,但与单个突变基因的类型无关。多基因突变可能预示左室收缩功能障碍。 相似文献
2.
目的探讨PGF2α对葡萄糖刺激性胰岛素分泌和[Ca2+]i变化的影响。方法运用放免方法检测不同浓度的PGF2α在不同情况下对NIT-1β细胞葡萄糖刺激性胰岛素分泌量的变化,并以F luo-3AM为探针,利用激光共聚焦显微镜检测细胞内钙的改变。结果在16.5 mmol.L-1葡萄糖刺激下,0.1、1、5μmol.L-1的PGF2α剂量依赖性的促进了NIT-1β细胞葡萄糖刺激性胰岛素分泌,其中5μmol.L-1时作用最强(P<0.01),而在10μmol.L-1时,PGF2α却抑制了葡萄糖刺激的胰岛素分泌(P<0.05);预先加入0.5 mmol.L-1EGTA后,5μmol.L-1的PGF2α不能促进胰岛素分泌,同样在预先加入n ifed ip ine或EGTA+n ifed ip ine后,PGF2α也无促进胰岛素分泌(P>0.05)。在0、5.5 mmol.L-1葡萄糖刺激下,5μmol.L-1的PGF2α无促进胰岛素分泌作用(P>0.05)。另外,应用5μmol.L-1的PGF2α能够引起β细胞内钙升高(P<0.01),在无钙环境下,PGF2α只引起缓慢的幅度较小的细胞内钙升高,恢复细胞外钙浓度时,β细胞内钙升高(P<0.01)。结论在NIT-1β细胞,一定范围浓度的PGF2α能够促进高浓度葡萄糖刺激下的胰岛素分泌,可能与PGF2α增加细胞外钙内流有关。 相似文献
3.
目的:研究紫杉醇(TAX)对NCI-H520细胞系单层细胞和细胞球体Survivin表达的影响以及与TAX细胞周期阻滞的关系.方法:用3000、300、30、3和O.3ng/mL的TAX溶液处理NCI-H520的单层细胞和细胞球体,分别用CCK-8试剂盒进行细胞毒性分析、流式细胞仪进行细胞周期分析、半定量RT-PCR检测Survivin mRNA水平的表达以及用Western blot检测蛋白水平的表达.结果:TAX能显著抑制NCI-H520单层细胞和细胞球体的生长,TAX对细胞球体的半数抑制浓度为(2118.51±93.76)ng/mL,对单层细胞的半数抑制浓度为(1708.24±58.95)ng/mL;300ng/mL的TAX作用4h后细胞周期开始向G2/M期阻滞,而且随着作用时间的延长,阻滞作用越明显;TAX作用4h后上调细胞内Survivin蛋白的表达,而对Survivin mRNA的表达无明显影响.结论:TAX通过影响单层细胞和细胞球体的细胞周期而产生生长抑制作用,这种抑制作用具有浓度依赖性;TAX可影响单层细胞和细胞球体的Survivin蛋白水平的表达,这种表达上调作用可能是依赖于TAX的细胞周期阻滞作用的.而对mRNA水平无明显影响,说明TAX对NCl-H520细胞内Survivin表达的影响可能不是通过改变Survivin从头合成途径进行的. 相似文献
4.
目的 检测一个临床诊断为"先天性升主动脉狭窄"家系患者的基因组拷贝数变异,明确其发病的遗传学基础.方法 以一个先天性升主动脉狭窄家系为研究对象,收集患儿及其患病父亲、正常母亲外周血标本,常规提取基因组DNA.应用Affymetrix人类全基因组SNP 6.0芯片对患儿及1例正常健康对照个体进行检测,应用实时定量PCR(real-time quantitative polymerase-chain-reaction,qPCR)方法对芯片分析结果进行验证.结果 经Affymetrix SNP 6.0 芯片分析显示患儿染色体7q11.23区域内弹力蛋白基因(elastin,ELN)5′端大部分及基因上游区域共约80 kb发生杂合性缺失.在ELN基因内设计4对qPCR引物,在家系内进行验证,结果显示ELN的缺失向下游至少累及至第22外显子,且患儿父亲携带与患儿相同的杂合性缺失.结论 ELN 基因部分杂合性缺失为该患儿及其父亲发病的原因,二者之先天异常为主动脉瓣上狭窄(supravalvular aortic stenosis,SVAS).Abstract: Objective To detect the copy number variations(CNVs)in a family with congenital narrowing of the ascending aorta,and to explore the underlying genetic causes of the disease.Methods Peripheral blood samples were collected from an affected boy,his affected father and his apparently normal mother.Genomic DNA Was extracted and genotyped using Affymetrix Genome-Wide Human SNP Array 6.0.CNVs were confirmed by real-time quantitative PCR(qPCR).Results Our SNP Array 6.0analysis showed in the boy an about 80kb heterozygous deletion affecting part of the elastin gene(ELN).Further qPCR assays for four confirmed the presence of the deletion in the boy and his father,and indieated that the deletion involved at least the first 22 ELN exons.Conclusion A heterozygous deletion affecting part of the ELN gene has been identified in the boy and his father, A diagnosis of supravalvular aortic stenosis(SVAS)could he made based on the molecular finding. 相似文献
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目的:使用 Ion AmliSeq 多重 PCR 定制序列捕获系统及 Ion Torrent PGM 高通量测序平台对散发肌张力障碍患者进行肌张力障碍致病基因变异检测,以优化检测流程,探讨应用靶序列捕获结合高通量测序进行遗传病遗传诊断辅助临床干预的可能性。方法对95例确诊的肌张力障碍患者的外周血白细胞 DNA 使用 Ion AmliSeq 多重 PCR 进行靶序列捕获, Ion Torrent PGM 平台进行高通量测序,并对所得结果进行 Sanger 测序验证。结果本研究使用芯片12张,测序深度为134±44,覆盖度96.12%±0.71%。单张芯片测序周期为6小时(上机测序),单张芯片最高通量可达到900 Mb 以上。在95例肌张力患者中检出罕见变异71个,经 Sanger 验证准确率为41.04%,假阳性率58.96%。影响测序筛查质量主要原因在于 DNA 特殊序列如序列中存在同聚物。结论 Ion Torrent PGM 高通量测序平台的使用,具有测序通量高,操作简便,速度快,成本低的优点,可以提高基因突变筛查水平,在合理范围内扩增基因筛选数目,可以协助临床对肌张力障碍的鉴别诊断提供指导作用。 相似文献
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肾上腺皮质癌患儿TP53基因的一个新生殖系突变 总被引:1,自引:1,他引:0
目的 研究1例肾上腺皮质癌患儿TP53基因突变情况,为该病的基因诊断与遗传咨询提供依据.方法 提取1例肾上腺皮质癌患儿及父母外周血基因组DNA,针对TP53基因设计特异性引物,采用聚合酶链式反应(PCR)扩增基因的全部编码及侧翼序列,对扩增产物进行直接测序.结果 PCR结合DNA测序发现患者TP53基因第5外显子存在异常:第522与523位核苷酸间插入一个鸟嘌呤(c.522-523insG),导致P53蛋白DNA结合域第175位密码子由精氨酸(R)变为丙氨酸(A),并从突变位置起发生移码,产生移码突变(p.R175AfsX6).患者父亲带有相同的突变,而母亲未发现此突变.结论 TP53基因p.R175AfsX6生殖系突变是导致该例患者肾上腺皮质癌的特异突变. 相似文献
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目的 通过分析一汉族马凡综合征家系多名患病成员的心血管系统受累表现与原纤维蛋白-1(FBN1)基因突变位点,提高对马凡综合征临床表现性别差异的认识。方法 收集一马凡综合征家系成员的心血管系统受累资料。在知情同意基础上采集外周血,提取基因组DNA,PCR扩增FBN1基因全部65个外显子及外显子内含子交界区,产物纯化后行Sanger法测序。结果 该家系共13名患者,所有9名存活患者均携带有c.5431G>A (p.Glu1811Lys)突变,而家族中正常个体无此突变。9名男性中4例猝死,另4名存在升主动脉扩张,1名表现为扩张性心肌病;4名女性中因心力衰竭死亡1例,另3名存在严重二尖瓣病变而无升主动脉扩张。结论 FBN1突变所致马凡综合征心血管系统受累即使是在同一家系中亦可表现为显著的差异。 相似文献
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银杏叶提取物对糖尿病大鼠血管功能的影响 总被引:2,自引:1,他引:2
目的:探讨银杏叶提取物对高糖高脂诱导的Ⅱ型糖尿病大鼠血管张力变化的影响及可能的机制.方法:将大鼠随机分为正常对照组(Control)、糖尿病组(DM)、银杏叶提取物高剂量(H)及低剂量(L)组,灌胃5周后检测血清中晚期糖化终产物(AGEs)、血脂的含量和肠系膜上动脉张力变化.结果:H组甘油三酯、胆固醇、AGEs含量明显比DM组降低,高钾激动下,DM组血管的维持相下降明显;去内皮血管苯肾上腺素(PE)激动引起的收缩PD2DM组减少,血管顺应性有下降的趋势.尽管L组变化不明显,但H组对高钾(下降率:22.52±5.48%vs DM:44.19±11.03%,P<0.05)、PE(PD2:6.15±0.22vsDM:6.62±0.13,P<0.05)激动的反应明显优于DM组,血管功能学改善明显.结论:银杏叶提取物能降低糖尿病大鼠血清甘油三酯、胆固醇、AGEs含量,减少自由基对血管的损伤,从而改善血管功能病变. 相似文献
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目的 应用Ion Torrent PGM半导体测序仪和Ion AmpliSeqTMInherited Disease Panel对3例马凡综合征(Marfan syndrome,MFS)进行致病基因突变检测,明确其致病突变,并评价下一代半导体靶向测序诊断复杂单基因遗传病的效果.方法 在知情同意的基础上采集3例MFS患者及1名正常志愿者外周血,提取基因组DNA,经多重PCR扩增富集目的基因片段.每个样本用特异性序列标签进行标记后,应用Ion One Touch系统进行模板制备、乳化PCR及磁珠颗粒富集;最后用318半导体测序芯片进行高通量测序.用Ion Torrent Suite 3.2软件进行序列比对及SNPs和Indels提取,再用dbSNP 137数据库过滤得到SNPs和indels,剩余的可疑突变经Sanger法测序验证.结果 用一张318芯片得到855.80Mb的总数据量,4个样本的平均测序深度均达到100×以上,对目的区域的覆盖度在98%以上.数据经软件分析及数据库过滤后,在3例MFS患者中分别得到3个FBN1基因可疑突变,并经Sanger法测序验证,一个为已报道FBN1基因错义突变(p.E1811K),另外两个为新发现的突变,包括一个无义突变(p.E2264X),1个插入突变(p.L871FfsX23).结论 在3例MFS患者中都成功检出FBN1基因致病突变,表明半导体靶向测序可对复杂单基因遗传病进行高效、准确的基因诊断. 相似文献
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目的制备发病过程类似人类2型糖尿病的动物模型,并观察其肾脏和主动脉的病变特点。方法8周龄SD大鼠高脂、高糖饮食一个月后给予小剂量STZ腹腔注射建立2型糖尿病模型,于成模后4周及8周观察血管功能指标和肾脏功能指标,并对肾脏和血管的病理改变进行观察。结果模型组于成模后4周及8周出现高血糖、高血脂、胰岛素抵抗、肾功能改变和血管功能改变。肾脏光镜下见肾小球内皮及系膜细胞增生;肾小管水肿,管腔内有大量蛋白管型和细胞管型;肾盂区有大量淋巴细胞浸润。动脉血管电镜下见内皮细胞局部损伤严重;内皮细胞与内弹力板连接处空隙增加等。结论用高脂高糖饮食加小剂量STZ腹腔注射可成功制备2型糖尿病大鼠模型,成模后4周及8周后观察肾脏及大血管相继出现病变,是2型糖尿病血管病变研究的理想模型。 相似文献