藏药湿生扁蕾提取物通过NF-κB通路诱导结肠癌细胞凋亡的机制研究

目的：探讨藏药湿生扁蕾提取物通过 NF －κB 信号通路诱导结肠癌 SW480细胞凋亡的作用及其机制。方法本研究用不同浓度的藏药湿生扁蕾提取物处理结肠癌 SW480细胞,通过 JC －1染色检测 SW480细胞线粒体膜电位的变化,通过 Hoechst 染色以判断藏药湿生扁蕾提取物是否具有诱导结肠癌细胞 SW480细胞凋亡效应。同时检测 NF －κB 蛋白的表达,用以明确 NF －κB 信号通路在结肠癌发生中的作用机制。结果经一定浓度的湿生扁蕾提取物处理后的 SW480细胞内,NF －κB 的表达明显下调,染色现象揭示湿生扁蕾提取物具有促进肿瘤细胞凋亡的作用。结论湿生扁蕾提取物可以在体外诱导肿瘤细胞凋亡,其抗肿瘤机制是通过 NF －κB 信号通路介导的。     

湿生扁蕾对结肠癌微环境中HMSCs恶性增殖以及CD34、CD90的影响

目的:探究湿生扁蕾乙酸乙酯部位对结肠癌微环境中人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,HMSCs)恶性增殖及表面标志分子CD34、CD90表达的影响。方法:通过MTT法筛选湿生扁蕾乙酸乙酯部位作用于SW480细胞和HMSCs的最佳给药剂量。建立SW480和HMSCs细胞Transwell非接触共培养模型,将试验分为正常对照组、肿瘤细胞对照组、共培养组和湿生扁蕾给药组,分别采用细胞计数试验、流式细胞术FCM观察各组细胞的增殖、周期及HMSCs表面标志分子CD34和CD90的表达情况。结果:湿生扁蕾乙酸乙酯部位最佳给药剂量为200μg/ml,100μl。与正常对照组相比,共培养组HMSCs增殖能力增强,G1期细胞比例明显降低,S期和G2/M期细胞比例明显升高,且HMSCs表面标志分子CD34阳性表达率升高,CD90阳性表达率降低。与共培养组相比,湿生扁蕾给药组HMSCs增殖能力降低,G1期细胞比例明显升高,S期和G2/M期细胞比例明显降低,且HMSCs表面标志分子CD34阳性表达率降低,CD90阳性表达率升高。结论:结肠癌微环境中HMSCs增殖能力增强,且HMSCs表面标志分子阳性表达率发生显著改变,提示HMSCs发生恶性增殖,且湿生扁蕾乙酸乙酯部位可抑制结肠癌微环境中HMSCs的恶性转变。     

基于Qrt-RNA技术筛选藏药湿生扁蕾抗溃疡性结肠炎肠纤维化活性成分的研究

目的：研究藏药湿生扁蕾抗溃疡性结肠炎肠纤维化的药效物质基础。方法采用2,4,6-三硝基苯磺酸（TNBS）诱导的大鼠溃疡性结肠炎肠纤维化模型,灌胃给予藏药湿生扁蕾用乙酸乙酯萃取的活性提取物,以硅胶色谱分离、薄层定性得到的活性部位,采用荧光定量 RT-PCR 法检测大鼠结肠组织胶原ⅠmRNA、胶原Ⅲ mRNA、α-SMA mRNA、E-cad mRNA 的表达,筛选其活性成分。结果湿生扁蕾乙酸乙酯萃取物分离得到的活性部位经纯化得到4个单体化合物,用光谱分析等鉴定为1-hydroxy-3,7,8-Trimethoxyxanthones、1,8-Dihydroxy-3,7-Dimethoxyx-anthones、1-hydroxy-3,7-Dimethoxyxanthones 和1,7-Dihydroxy-3,8-Dimethoxyxanthones,4种单体化合物对溃疡性结肠炎肠纤维化大鼠模型均有明显的活性。结论湿生扁蕾抗溃疡性结肠炎肠纤维化的物质基础集中在乙酸乙酯部位,活性成分主要体现为4种酮类化合物。     

藏药湿生扁蕾及扁蕾的相关本草考证

就扁蕾和藏药湿生扁蕾两药从文献记载、植物形态、生境分布、化学成分等方面进行考释,以期今后更好地开发应用本种或本属植物资源。     

藏药湿生扁蕾提取物对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用研究

目的研究藏药湿生扁蕾不同溶剂提取物对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法将54只雄性小鼠随机分为空白组、模型组、联苯双酯对照组、湿生扁蕾水提取物组、湿生扁蕾醇提取物组和湿生扁蕾醇水提取物组6组,每组9只。各组分别灌服生理盐水,联苯双酯溶液,湿生扁蕾水提取物、乙醇提取物、乙醇和水提取物,灌胃7 d后,除空白组外,其余各组均灌服1.5%四氯化碳花生油20 mL/kg造模。24 h后经眼眶静脉丛取血,检测小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性及肝组织中丙二醛(MDA)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,并观察小鼠肝脏病理学改变。结果与空白组比较,模型组小鼠血清ALT,AST活性及肝组织中MDA含量明显升高,肝组织中GSH-Px活性明显降低,差异均有统计学意义(P0.01);与模型组比较,湿生扁蕾不同溶剂提取物组及联苯双酯对照组小鼠血清ALT,AST活性及肝组织中MDA含量明显降低,肝组织中GSH-Px活性明显升高,差异均有统计学意义(P0.05或P0.01),其中以湿生扁蕾醇水提取物组作用最为显著(P0.05)。肝脏病理学观察结果显示,造模后模型组肝损伤程度严重,湿生扁蕾不同溶剂提取物组肝脏病理损伤程度明显减轻。结论藏药湿生扁蕾不同溶剂提取物可减轻四氯化碳诱导的小鼠急性肝损伤,改善小鼠肝功能,作用机制可能与其清除自由基、保护肝细胞膜结构和功能的完整性、提高肝细胞内的GSH-Px活性、增强机体抗氧化能力有关。     

基于“肠道菌群调控β-防御素2”探究败酱草对IBD肠纤维化大鼠的作用机制

目的:探究败酱草提取物通过肠道菌群变化调控β-防御素2对炎症性肠病(inflammatory bowel disease, IBD)肠纤维化的治疗作用及可能机制。方法:选取36只雄性SD大鼠随机分为6组,分别为正常对照组(Normal)、模型组(Model)、柳氮磺胺吡啶阳性对照组(SASP)、败酱草高(PS-H,3.2 g·kg^-1)、中(PS-M,2.2 g·kg^-1)、低剂量组(PS-L,1.1 g·kg^-1),除Normal组给予等体积生理盐水灌肠外,其他各组大鼠均给予2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitrobenzene sulfonic acid, TNBS)的50%乙醇溶液灌肠以诱导炎症性肠病肠纤维化发生。造模后次日起连续灌胃给药7 d, 1次·d^-1,Normal组和Model组给予等体积生理盐水。观察大鼠一般行为情况;革兰氏染色观察肠道粪便菌群的变化;HE染色检测结肠组织病理学改变;Masson染色观察结肠组织纤维化情况;免疫组化检测结肠组织α-平滑肌肌动蛋白(α-s...     

益智颗粒联合平衡针灸治疗老年痴呆症25例临床观察

目的观察益智颗粒联合平衡针灸治疗老年痴呆症的临床疗效。方法将50例老年痴呆症患者采用随机数字表法分为对照组和治疗组,各25例。2组均给予平衡针灸治疗,对照组在平衡针灸治疗的基础上口服盐酸多奈哌齐片,治疗组在平衡针灸治疗的基础上口服益智颗粒。连续治疗3月后比较2组的临床疗效,并进行安全性评价。结果治疗组总有效率为84.0%,对照组为76.0%,2组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论益智颗粒联合平衡针灸治疗老年痴呆症疗效确切,且安全性较高,值得临床推广应用。     

HPLC结合响应面分析法优化提取瑞香狼毒中西瑞香素的含量研究

目的:应用响应面分析法优化瑞香狼毒中西瑞香素的提取工艺。方法:以瑞香狼毒的根为原料,在单因素的基础上,应用Box-Behnken设计实验组别,采用超声提取法,选取乙醇浓度、液料比和提取时间3因素,以瑞香狼毒中西瑞香素含量和干浸膏的得率为指标,高效液相色谱法(HPLC)进行检测,确定瑞香狼毒中西瑞香素的最佳提取工艺。结果:瑞香狼毒中西瑞香素提取工艺的最佳条件为:提取时间50 min,乙醇浓度90%,液料比7.5∶1 (mL/g);根中西瑞香素的含量为188.55μg/g,干浸膏得率32%;HPLC最佳检测条件为:检测波长360 nm,柱温:30℃,流动相为乙腈与1%冰乙酸水溶液,色谱柱:InertsustainC18(4.6 mm×260 mm,5μm),梯度洗脱。结论:运用该方法结果稳定、可靠,可为后期瑞香狼毒的开发和利用提供依据。     

溃疡性结肠炎肠纤维化造模时间的选择

目的研究溃疡性结肠炎肠纤维化的造模时间。方法将40只SD大鼠随机分为模型组和空白组,各20只。模型组通过肠腔内注入含2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)(125 mg/kg)的50%乙醇溶液复制溃疡性结肠炎肠纤维化模型,空白组注入等体积0.9%氯化钠溶液,分别在造模后2周末和4周末,采用Masson染色观察结肠组织结构的改变及纤维化程度。结果空白组大鼠结肠壁结构清楚,分为黏膜层、黏膜下层、肌层和外膜4层,在黏膜的固有层内分布有大量腺体,黏膜下层有少量呈蓝色染色的纤维组织,各层结构完整。与空白组比较,模型组造模后2周末与4周末大鼠的肠壁亦分为4层,但肠壁明显增厚,黏膜层上皮细胞有不同程度损伤,黏膜下层纤维组织明显增多,且与肌层界限不清;与模型组造模后2周末比较,造模后4周末上述情况明显改善。结论采用TNBS乙醇溶液复制溃疡性结肠炎肠纤维化模型,建议造模时间设为2周更为合适。