人滑膜细胞的分离培养与鉴定

[目的]建立人滑膜细胞体外分离培养的方法，为进一步的实验研究奠定基础。[方法]分别用胶原酶消化法及组织块培养法分离和培养人滑膜细胞，并通过形态学和免疫组化进行鉴定。[结果]培养的滑膜细胞具有成纤维细胞的形态和特征；免疫组化染色显示Vimentin阳性，CD68阴性，滑膜细胞呈长梭形极向生长。[结论]两种方法均成功的培养出了人滑膜细胞，适合做为实验研究的靶细胞。     

四肽化合物CM ST1对大鼠佐剂性关节炎治疗作用的实验研究

类风湿性关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)是一种常见的严重危害人类身体健康的自身免疫性疾病,其治疗药物众多,但临床效果都不甚满意.CMST1是由4个氨基酸组成的多肽化合物.本文以大鼠佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)为动物模型,探讨了CMST1对其的治疗作用,为开发治疗RA的新药提供实验依据.     

糖尿病视网膜病变血清IgG型抗内皮细胞抗体检测

目的：探讨血清IgG型抗内皮细胞抗体（AECA）的阳性表达及其在不同分型糖尿病视网膜病变（DR）间的变化趋势。方法：根据荧光素眼底血管造影（FFA）将糖尿病视网膜病变患者分为增殖型糖尿病视网膜病变（PDR）组、背景型糖尿病视网膜病变（BDR）组、糖尿病无视网膜病变（NDR）组及正常对照组。用体外培养的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）作为抗原，采用间接免疫荧光（IIF）法检测不同分型患者血清IgG型抗内皮细胞抗体阳性率的变化，并与正常对照组进行对比。结果：血清IgG型AECA阳性表达BDR组和PDR组均高于NDR组和正常对照组（P〈0．05），而BDR组和PDR组间阳性率差别无统计学意义（P〉0．05），NDR组和正常对照组间阳性率差别无统计学意义（P〉0．05）。结论：随着由正常眼底向DR的转变，血清IgG型AECA阳性率呈增高趋势，表明AECA与DR存在内在关联。     

融合基因EGFRi-IL-24真核表达载体的构建与表达

人工合成表皮生长因子受体干扰序列(epithelial growth factor receptor interference,EGFRi),应用重叠延伸PCR(Overlapping PCR)技术将其与白细胞介素-24(IL-24)连接,并在其间引入一段柔软短肽(Gly4Ser3)。进行序列分析后,将融合基因EGFRi-IL-24重组到表达质粒pPIC9k中,Sal I酶切线性化重组质粒EGFRi-IL-24/pPIC9k,电击转化毕赤酵母GS115,经G418抗性和PCR筛选得到阳性重组菌株。重组菌株用甲醇进行诱导表达后,通过SDS-PAGE和MTT法分析鉴定蛋白表达产物。结果证实EGFRi-IL-24在毕赤酵母中获得了分泌性表达的活性蛋白,为进一步研究其生物学功能及临床应用奠定了基础。